二甲双胍调控Nrf2对非小细胞肺癌EGCG和放射敏感性的影响及机制研究-放射医学专业论文.docx

中文摘要 二甲双胍调控 Nrf2 对非小细胞肺癌 EGCG 和放射敏感性的影响及机制研究 的水平。二甲双胍能通过抑制 Nrf2 的细胞核分布降低 HO-1 的水平。最后通过分 析基因芯片的结果发现相比于肺癌组织，正常肺上皮中 HO-1 水平明显增高，且正 常肺上皮 BEAS-2B 相比于 A549 对 EGCG 更为耐受。二甲双胍能增加 EGCG 对 A549 裸鼠移植瘤的抑制作用。EGCG 能增加裸鼠移植瘤中 Nrf2 的水平，二甲双胍 抑制 EGCG 增加 Nrf2 的效应。结论 本研究表明，二甲双胍能抑制 A549 细胞中 HO-1 的蛋白水平，并且能通过诱导凋亡和 ROS 的产生增加 EGCG 对 A549 生长的 抑制。二甲双胍能够通过抑制细胞核内的 Nrf2 水平减少 HO-1 的水平。此外，正 常肺上皮和肺癌中 HO-1 的表达存在差异，因此对 EGCG 的敏感性不同。二甲双 胍联合 EGCG 可以为临床肿瘤治疗提供了一个新方案。 关键词：二甲双胍（metformin）；表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)；NF-E2 相关因子 2（Nrf2）；血红素加氧酶-1(HO-1)；非小细胞肺癌（NSCLC） 第二部分 二甲双胍对非小细胞肺癌细胞 A549 细胞放射敏感性的 影响和机制研究 目的 研究二甲双胍对非小细胞肺癌 A549 细胞放射敏感性的影响及其机制。 方法 采用克隆形成法检测二甲双胍和 X 射线对 A549 克隆形成的影响；采用 PI 法检测二甲双胍和 X 射线对 A549 细胞周期的影响；采用细胞凋亡试剂盒检测二 甲双胍和 X 射线对 A549 细胞凋亡的影响；分别采用 Western Blot 和免疫荧光检测 二甲双胍和 X 射线对 HO-1 蛋白及 Nrf2 蛋白水平的影响及对 Nrf2 在细胞内亚分布 的影响。结果 二甲双胍能抑制 X 射线对 A549 细胞克隆形成的抑制能力；二甲双 胍能抑制 S 期细胞的比例，同时减少 X 射线诱导的 G2/M 期阻滞；二甲双胍能减 少 X 射线导致的 Nrf2 细胞核转位。结论 本研究表明，二甲双胍能增加 X 射线抑 制 A549 细胞克隆形成的能力，并且能通过改变 A549 的细胞周期并减少 X 射线诱 导的 G2/M 期阻滞。此外，二甲双胍能够通过抑制 X 射线诱导的 Nrf2 细胞核转位 抑制 Nrf2 信号通路。二甲双胍联合 X 射线可以为临床肿瘤治疗提供了一个新方案。 关键词：二甲双胍（metformin）；NF-E2 相关因子 2（Nrf2）；非小细胞肺癌； 二甲双胍调控 Nrf2 对非小细胞肺癌 EGCG 及放射敏感性的影响及机制研究 中文摘要 放射敏感性 作 者：俞辰逍 指导教师：焦旸 Metformin Sensitizes Non-small Cell Lung Cancer Cells to Epigallocatechin-3-Gallate (EGCG) and Ionizing Radiation Treatment via Regulating Nrf2 Abstract Part I Metformin Sensitizes Non-small Cell Lung Cancer Cells to EGCG Treatment via Regulating Nrf2 Objectives: To study the mechanism of metformin sensitizing the non-small cell lung cancer cells to EGCG treatment. Methods: (1) Investigate the HO-1 expression in four NCSLC cell lines, namely A549, H1299, H1975 and H460, and perform MTT assay to examine the cell proliferation change after EGCG treatment. (2) cell apoptosis was detected by flow cytometry and PARP1 expression. (3) ROS level was detected using flow cytometry and flow cytometry after DCFH-DA staining. (4) Nrf2 and HO-1 protein expression and Nrf2 traslocation was detected by Western Blot and immunofluorescene. (5) HO-1 mRN