仿刺参糖胺聚糖对贫血小鼠造血功能的影响-药物化学专业论文.docxVIP

仿刺参糖胺聚糖对贫血小鼠造血功能的影响 摘要 海参（sea cucumbers，Holothurians）是棘皮动物门（Echinodermate）海参 纲（Holothurioidea）动物，具有较高的营养价值和药用价值，在明代以后收入本 草并列为补益药。资料记载，海参具有补益精肾、生脉血的功效。癌症是威胁人 类健康的疾病之一，其治疗方案中大部分的化疗药物对骨髓有不同程度的损害作 用，使癌症患者造血功能低下进而导致贫血。仿刺参糖胺聚糖（HGAG）是从仿 刺参体壁中提取出的重要活性物质之一，具有抗肿瘤、增强免疫力、抗凝血和抗 衰老等功效，但其对造血功能影响的研究尚未见报道。本论文通过对骨髓抑制贫 血小鼠体内给药和体外细胞给药，观察了 HGAG 对造血功能的影响，对于海参 多糖新的活性研究和新型肿瘤辅助药物开发具有重要意义。 研究内容和结果如下： 建立贫血小鼠体内给药观察 HGAG 对造血功能的作用。将 40 只雄性昆明种 小鼠随机分为正常组、模型组、HGAG 治疗组（剂量分别为 1 mg·kg?1、5 mg·kg?1 和 15 mg·kg?1），除正常组外其余各组腹腔注射环磷酰胺(Cy) 100 mg·kg?1 制备贫 血小鼠模型，并与造模当日起 HGAG 治疗组给予不同剂量的 HGAG，正常组和 模型组给予相应剂量的生理盐水，7 天后测定小鼠外周血细胞数量、骨髓有核细 胞数（BMNC）、脾脏指数和骨髓细胞周期。结果表明 3 个剂量组的 HGAG 能显 著升高贫血小鼠白细胞（WBC）和血红蛋白（HGB）的数量，高剂量组的 HGAG 还能显著升高小鼠红细胞（RBC）和血小板（PLT）的数量；HGAG 3 个剂量组 均能显著升高贫血小鼠 BMNC 的数量和脾脏指数，解除骨髓细胞 G0/G1 期周期 阻滞，促进骨髓细胞的增殖。 建立贫血小鼠体外细胞给药，MTT 法测定 HGAG 对 BMNC 增殖的影响。 通过比较无血清和 10%血清两种血清条件下 HGAG 对 BMNC 增殖的作用，发现 10%血清培养条件较好的体现了 HGAG 促进 BMNC 增殖的能力；在 10%血清培 养条件观察不同分子量的 HGAG 对 BMNC 增殖的作用，发现 HGAG 分子量越 小，促进 BMNC 增殖的活性越强，需要的多糖浓度也越高。 建立贫血小鼠体外细胞给药，通过造血祖细胞培养技术观察 HGAG 对贫血 小鼠粒单系、红系和巨核系三系造血祖细胞增殖的影响。结果发现浓度为 1 1 μg·mL?1 和 10 μg·mL?1 的 HGAG 能够促进红系和巨核系造血祖细胞集落的增加， 但对粒单系造血祖细胞的增殖没有显著性作用。WBC 来源于粒单系造血祖细胞 的分化，结合 HGAG 体内用药能够升高小鼠外周 WBC 的数量推测，HGAG 可 能通过促进造血因子的分泌，可间接促进粒单系造血祖细胞的增殖。 关键词：仿刺参糖胺聚糖；贫血；小鼠；造血功能 2 Effects of Glycosaminoglycan from Apostichopus Japonius on hematopoietic function of Anemia Mice Abstract Sea cucumber, which belongs to class of Holothurioidea from phylum of Echinodermate, has high nutritional value and medicinal value. It was recorded in Compendium of Materia Medica since the Ming Dynasty and classified as tonics. According to the records, sea cucumber has many benefits of protecting kidney and blood vessel. Cancer is one of the main threatening diseases to human health. Most chemotherapy drugs would cause damage to the bone marrow on different degrees, which lead to a reduction of hematopoietic function and anemia of patients. Glycosaminoglycan in present study (HGAG) is extracted from Sea Cucumber Apostichopus Japonius, which possess th