猪内源性逆转录病毒及其敲除抑制的方法.docVIP

猪内源性逆转录病毒及其敲除抑制的方法 　　【摘 要】 猪内源性逆转录病毒（porcine endogenous retrovirus，PERV）是一种以前病毒DNA形式整合入猪基因组中的逆转录病毒，它可随细胞基因组的复制而复制。部分猪源细胞可释放PERV病毒颗粒，并能感染多种体外培养的人源细胞。由于猪器官大小和解剖生理与人体器官相似，被认为是异种器官移植的最佳供体。但猪基因组内的PERV存在跨物种间感染风险，以猪源器官作为器官供体移植人体后可能导致PERV感染人体。PERV感染是异种器官移植的一大障碍，从生物安全性考虑，需要去除或抑制猪基因组内PERV，以降低其物种间传播风险。因此，本文对PERV的生物学特征及近年来PERV的去除和抑制方法等方面的研究进展进行了综述。 　　【关键词】 猪内源性逆转录病毒 异种器官移植 基因编辑 　　Characteristics of PERV and methods for its inhibition and elimination 　　【Abstract】 Porcine endogenous retrovirus （PERV） is a virus that can integrate into porcine genome and replicate with host cell replication. Some kinds of porcine cells can release infectious virus particles and infect human cells in vitro. Pigs are the best organ donors for xenotransplantation considering their organ size， anatomical structure and physiological function are similar to that of human， however， the PERV in pig can infect other species， and human body has the risk for PERV infection when porcine organs transplant to human. PERV infection is a main hindrance for xenotransplantation， so PERV in pig genome should be inhibited or removed. In this paper， the characteristics of PERV and the progression of methods for PERV inhibition or deletion methods are reviewed. 　　【Key words】 PERV，Xenotransplantation，gene editing 　　引言 　　目前，供体的极度短缺是器官移植所面临的最大的障碍，很多患者在等待供体器官中死去。虽然国家采取了多项措施用于鼓励和推广器官捐赠，但并没有有效解决我国器官供体严重短缺现象。目前，异种器官移植被认为是解决供体器官短缺现状的一种有效方法。其中，猪由于具有以下优点：1、猪的心血管系统、消化系统、皮肤、营养需要、骨骼发育以及矿物质代谢等都与人的情况极其相似；2、猪的主要脏器器官与人类大小相近；3、猪基因多样、繁殖周期短、生产力高，一窝产仔多，便于根据特殊需要进行选育；因此，被认为是异种移植器官组织来源的最佳供体。但使猪成为异种移植器官供体仍有很多障碍需要克服，这主要包括免疫排斥和致病微生物的传播。早在十几年前科学家就开始对猪进行免疫学改造，以解决免疫排斥问题。对于猪体内的病原微生物，其绝大多数真菌、细菌、病毒可通过SPF级培育净化去除，但猪基因组内存在的PERV难以通过净化培育去除。本文对PERV的特征及抑制其表达的方法进行了综述。 　　1 PERV简介 　　1.1 PERV分子特性： 　　PERV的基因组为单股正链线性RNA，长约7-9kb，由两端的非编码区和中间的gag、pol、env三个编码区组成。Gag编码病毒的核心蛋白 ；pol基因编码病毒复制所需的酶类，主要有蛋白酶（PR）、逆转录酶（RT）和整合酶（IN）；env基因编码囊膜糖蛋白，主要包括表面蛋白（SU）gp70和穿膜蛋白（TM）p15E。根据PERV env基因编码的不同，可以将PERV分为三个亚型：PERV-A、PERV-B、PERV-C，其差异主要在于SU表面糖基化的VRA、VRB和PRO区，这种差异可能导致不同类型的PE