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秋水仙素诱变薄皮甜瓜同源四倍体的研究 　　摘要：为了获得四倍体薄皮甜瓜材料，研究薄皮甜瓜多倍体的特征特性，以二倍体薄皮甜瓜金美为材料，以0.2％、0.4％、0.6％的秋水仙素采用滴苗和浸种2种方法进行诱变四倍体试验，并通过染色体观察和细胞学鉴定对其进行倍性分析。结果表明，滴苗法比浸种法诱变率高，其中以0.4％秋水仙素滴苗诱变率最高，为6.67％；与二倍体相比，四倍体植株子叶和真叶长宽比变小，茎增粗，节间变短，花冠变大，果肉变厚，种子增宽，可育性降低，中心可溶性固形物含量增高：保卫细胞变大，气孔密度变小，保卫细胞内叶绿体数目增加；获得了同源四倍体材料。 　　关键词：秋水仙素；薄皮甜瓜；四倍体；诱变 　　 　　薄皮甜瓜(sp.conomon)属于二倍体物种，染色体数目为2n=24。多倍体效应能提高植株的抗性，增加果皮、果肉的厚度，而且其耐贮性、可溶性固形物含量等性状也可获得改善。鉴于多倍体的效应，利用我国薄皮甜瓜资源丰富之优势，通过诱变大量获得四倍体，可从中选出抗性强、耐贮、品质优的品种(品系)直接应用于生产，扩大栽培区域，或者将其作为中间育种材料，选育三倍体或四倍体杂种一代品种。多倍体甜瓜材料具有生长势强，抗逆性强，品质优等特点。Lotfi、Sari、Abak、Sauton等对甜瓜单倍体进行了加倍研究，并成功获得双单倍体；Adel―berg、Rhodes、Ezura、何欢乐、马国斌等对甜瓜进行了离体诱导获得四倍体的研究；吴明珠等对甜瓜进行辐射诱变并获得多个多倍体甜瓜材料；柴兴容、魏育国等采用诱导生长点分裂细胞染色体加倍，获得综合性状较好的四倍体甜瓜材料；王双伍等用秋水仙碱进行了离体诱导薄皮甜瓜四倍体的研究。但迄今为止，甜瓜多倍体育种工作主要集中于厚皮甜瓜，对薄皮甜瓜的研究较少。本研究以薄皮甜瓜作为材料，通过化学活体诱导对其进行多倍体诱变。详细观察并总结出薄皮甜瓜经不同秋水仙素浓度诱变后的变异规律，从中得到了有利的变异性状，为薄皮甜瓜育种提供了新的育种材料。 　　 　　1　材料与方法 　　 　　1．1 材料 　　试验于2006年2月至2007年6月在广西农业科学院园艺研究所科研基地进行：材料为广西农业科学院园艺研究所提供的薄皮甜瓜品种金美。代号：JMI-1。 　　 　　1．2　方法 　　1．2．1 诱变方法 (1)滴苗法：2006年2月24日常规浸种催芽；2月26日点播于营养杯中：3月8日幼芽2片子叶微张开时，把1小块脱脂棉放在两片子叶之间，每天上午8：30-9：30进行滴苗处理1次，连续处理6 d。处理时在棉球上分别滴浓度0.2％、0.4％、0.6％的秋水仙素溶液，直到脱脂棉球浸满液体，生长点浸在溶液中，但又不下滴。处理期间注意遮阴，以减缓药液分解速度。处理后去掉脱脂棉球，精心照管，促进幼苗生长，幼苗2-3片真叶时移栽大田。每个处理90株。以不做任何处理的植株为对照。(2)浸种法：2006年2月24日，常温下用0.2％、0.4％、0.6％的秋水仙素溶液浸泡干种子8 h，药液用量以刚好浸过种子为度，处理后用清水冲洗数次，将种子置于32-34℃恒温条件下催芽。种子出芽后，2月27日点播于营养杯，幼苗2-3片真叶时移栽大田。每个处理90粒种子，以清水浸泡种子为对照。 　　1．2．2　变异观察鉴定方法 (1)植株形态观察初步鉴定：经诱导处理的幼苗移栽大田后，根据植株茎、叶、花、果、种子等形态变异特征。从诱变群体中初选出与四倍体特征相符合的植株。(2)细胞形态学鉴定：取对照和根据植株形态观察初选具有变异特征植株的新鲜叶片，用镊子小心撕下叶主脉两侧的下表皮，然后用碘一碘化钾染色(碘难溶于水，先将2 g碘化钾溶于100 mL的蒸馏水中，完全溶解后加入1g碘，震荡溶解)，染色10-30 min后，在10x40倍显微镜下观察记数。每个单株随机统计10个视野的气孔数目和500个保卫细胞叶绿体的数目。(3)根尖染色体数目直接鉴定：经器官形态观察和细胞形态学鉴定筛选的植株自交留种(D1)，每株(单瓜)分别取10粒种子，在32～34℃条件下催芽，待根芽长至1.5 cm左右时，进行根尖染色体鉴定。其他步骤参考张永兵等人的根尖染色体鉴定法， 　　1．2．3 四倍体植株器官形态特征观察测定 经染色体数目鉴定为四倍体的自交瓜种子当年秋季继续种植观察(D2)，随机取3株，观察测定第10～15片叶子的节间距、茎粗、叶片长和宽、叶柄长度和粗度：每株分别取3朵当天开放的雌、雄花，分别测量花冠长和宽、萼片长、子房纵径和横径；每株取1个自交果实测量果实纵径和横径、果脐大小、果肉厚度、种腔纵径和横径、单瓜正常种子数和单瓜空秕种子数、种子长和宽、千粒重及可育率。 　　1．2．4　其他性状的比较 (1)中心可溶性固形物含量；随机取成熟度一致的四倍体