黑种草子总皂苷滴丸质量标准的研究.docVIP

黑种草子总皂苷滴丸质量标准的研究 　　摘要：目的 建立黑种草子总皂苷滴丸的质量标准。方法 以黑种草皂苷A为对照品，采用薄层色谱法对滴丸中的黑种草子进行定性鉴别，采用比色法对滴丸中总皂苷的含量进行测定，采用高效液相色谱法对滴丸中黑种草皂苷A的含量进行测定。结果 薄层鉴别图谱斑点清晰，阴性对照无干扰；总皂苷含量测定中平均回收率为102.6%，RSD=1.96%（n=6），滴丸中总皂苷平均含量为18.13%；黑种草皂苷A含量测定中平均回收率为103.2%，RSD=1.16%（n=6），滴丸中黑种草皂苷A平均含量为14.71%。结论 本研究制定的质量标准方法准确可靠、简便易行，可用于黑种草子总皂苷滴丸的质量控制。 　　关键词：腺毛黑种草子；总皂苷；滴丸；质量标准 　　DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2016.08.026 　　中图分类号：R284.1 文献标识码：A 文章编号：1005-5304（2016）08-0101-04 　　黑种草子为毛茛科黑种草属植物腺毛黑种草Nigella glandulifera Freyn et Sint.的干燥成熟种子[1]。黑种草子作为维吾尔族习用药材，主产于我国新疆和云南[2-4]。在维吾尔医中，黑种草子被称为“斯亚旦”，药性三级干热，味辛，具有生干生热、乌发生发、增强色素、强筋健肌、祛寒止痛等功效，主治湿寒性或黏液质性疾病[2-3，5]。本课题组前期研究结果表明，黑种草子总皂苷具有抗炎、镇痛和治疗关节炎的作用，而且安全性好[6-8]，故将其制成滴丸剂，以满足快速起效和稳定性的要求。本研究采用薄层色谱法对黑种草子总皂苷滴丸中的黑种草子进行定性鉴别，采用比色法对滴丸中总皂苷的含量进行测定，采用高效液相色谱法（HPLC）对滴丸中黑种草皂苷A的含量进行 　　基金项目：新疆维吾尔自治区科技计划项目（201130105-4） 　　测定，建立黑种草子总皂苷滴丸的质量标准，为该制剂的质量控制提供依据，并为黑种草子的进一步深入开发利用奠定基础。 　　1 仪器与试药 　　LC-10ATvp高效液相色谱仪，SPD-10Avp紫外可见检测器（日本岛津公司）；AL204型电子分析天平（梅特勒-托利多仪器上海有限公司）；UV-754型紫外分光光度计（上海菁华科技仪器有限公司）；WHF-203B暗箱式三用紫外分析仪（上海精科实业有限公司）；ZBS-6G智能崩解试验仪（天津市天大天发科技有限公司）；8002型电热恒温水浴锅（北京永光明医疗仪器厂）。 　　黑种草子总皂苷滴丸（批20141216，新疆维吾尔自治区药物研究所植物化学研究室制备；黑种草皂苷A对照品（常春藤皂苷元3-O-β-D-吡喃木糖基-（1→3）-α-L-吡喃鼠李糖基-（1→2）-α-L-吡喃阿拉伯糖-28-O-α-L-吡喃鼠李糖基-（1→4）- β-D-吡喃葡萄糖基-（1→6）-β-D-吡喃葡萄糖酯苷，含量95%），新疆维吾尔自治区药物研究所植物化学研究室制备；聚乙二醇4000（PEG4000），天津市盛奥化学试剂有限公司；聚乙二醇6000（PEG6000），天津市光复精细化工研究所；甲醇、乙腈为色谱纯；其他试剂均为分析纯。 　　2 方法与结果 　　2.1 性状 　　本品为棕褐色的滴丸，味微苦。 　　2.2 薄层鉴别 　　取黑种草子总皂苷滴丸15丸，加甲醇10 mL，超声使溶解，离心，取上清液作为供试品溶液。另取黑种草皂苷A对照品，加甲醇制成每1 mL含3 mg的溶液，作为对照品溶液。吸取上述2种溶液各5 ?L，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇-水-乙酸（4∶1∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105 ℃加热至斑点显色清晰，分别置日光和紫外光灯（365 nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，日光下显相同颜色的斑点，紫外光下显相同颜色的荧光斑点，并且阴性对照无干扰。 　　2.3 检查 　　按照《中华人民共和国药典》滴丸剂项下要求进行重量差异、溶散时限的检查。结果黑种草子总皂苷滴丸平均每粒丸重为35 mg，3批重量差异变异系数分别为4.55%、4.78%、3.62%，均小于12%，符合药典规定。3批黑种草子总皂苷滴丸溶散时间分别为5、5、4 min，均符合药典规定（30 min）。 　　2.4 总皂苷含量测定 　　2.4.1 对照品溶液的制备 取干燥的黑种草皂苷A对照品适量，精密称定，置量瓶中，加甲醇制成每1 mL含3 mg的黑种草皂苷A对照品溶液。 　　2.4.2 供试品溶液的制备 取黑种草子总皂苷滴丸4丸，精密称定，置10 mL量瓶中，加入甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。 　　2.4.3 阴性对照溶液的制备