浅析体外诊断试剂稳定性研究.docVIP

浅析体外诊断试剂稳定性研究 内容提要：稳定性作为检测体系的关键技术指标之一，对体外诊断试 剂的安全有效具有重要的指导意义。本文从诊断试剂上市前研究过程 中涉及到的稳定性类型及相关要求方面，对其进行Y阐述。 关键词：体外诊断试剂稳定性 体外诊断试剂稳定性的定义在GB/T 29791.1-2013中有明确 描述：体外诊断医疗器械在制造商规定界限内保持其性能特性的能力 ［1］。该标准中明确丫稳定性适用的三种情形：一是适用于当体外诊断 试剂、校准物或控制物在制造商规定的条件下储存、运输和使用时； 二是按照制造商使用说明制备、使用和贮存的复溶后冻干材料、工作 液和从密闭容器中取出的材料；三是校准后的测量仪器或测量系统， 对体外诊断试剂而言，测量系统的稳定性通常用时间来量化。 稳定性作为体外诊断试剂保持产品安全有效的重要指标，对 产品的生产、运输、保存和使用等环节具有重要的指导意义。美国临 床和实验室标准协会(Clinical and Laboratory Standards Institute, CLSI) 在其指南EP25-A中，对体外诊断试剂稳定性研究的目标、稳定性研 究计划、稳定性研究过程路径，以及实时稳定性、加速稳定性研究方 法等都作Y详细的描述［2］。在附录中，还结合具体实例分析Y测景漂 移(Measure and Drift)、将加速稳定性实验数据用阿伦尼乌斯方程 (Arrhenius Equation)推导产品保存期限，以及基于线性回归分析来 确定稳定性研究中的时间点设置等。该指南为体外诊断试剂的稳定性 研究提供了重要的技术参考。国家食品药品监督管理总局(CFDA) 在2014年9月5日发布的《关于公布体外诊断试剂注册中报资料 要求和批准证明文件格式的公告(2014年第44号)》中，对体外诊 断试剂的稳定性研究提出Y明确要求：包括至少三批样品在实际储存 条件下保存至成品有效期后的实时稳定性研究资料，并应当充分考虑 产品在储存、运输和使用过程中的不利条件，进行相应的稳定性研究； 应当详细说明稳定性研究方法的确定依据及具体试验方法、过程［3］。 下面结合体外诊断试剂研究中涉及的稳定性要求作如下分析。 1. 实时/效期稳定性 诊断试剂的实时稳定性对于确定产品的有效期具有重要意 义［4］。实时稳定性研宄应将至少三个批次的产品，按照制造商声称的 条件，例如温度、湿度等，考察至预期的有效期后，按照产品技术要 求进行全性能检测。在考察过程中，应结合产品情况，合理设置考察 时间点，对环境影响敏感、保存要求较高的产品，建议增加相应的时 间点，以及时了解产品性能。实时稳定性研究资料应包括研究方法的 确定依据、研究所用试剂、仪器以及校准品和质控品的信息、具体的 研究方法及评价指标、详细的研宄数据以及结论。 加速稳定性 对于体外诊断试剂而言，加速稳定性通常指在非试剂说明书 中声称的储存条件下的稳定性考察。加速稳定性旨在考察试剂在特定 的极端环境中，试剂的技术指标是否还在可接受的合理区间，以评估 试剂的性能。通常情况下，考虑到大多数试剂中主要组成成分为蛋白 类物质，在试剂实际储存温度的基础上，升高温度来考察加速稳定性 是最常用的方式，即我们通常所讲的热稳定性。需要注意的是，尽 管加速稳定性试验是考察诊断试剂性能的一种常见方法，但是CFDA 仍然期望产品的稳定性结论是基于产品的实时稳定性研宄数据。在 CFDA发布的众多体外诊断试剂行业标准中，通常提供Y效期稳定性 和热稳定性两种方式进行验证，但是均注明了热稳定性不能用于推导 产品有效期，除非是采用基于大量的稳定性研究数据建立的推导公 式。虽然加速稳定性研究结论不能直接用于声称产品有效期，但是考 虑到试剂在运输和使用过程中可能遇到的不确定性，产品加速稳定性 研究仍具有重要意义。 3. 幵瓶/封稳定性 开瓶/封稳定性旨在考察试剂在正常使用条件下，外界因素 对试剂性能指标的影响。对于很多生化类试剂而言，受空气影响较明 显，比如含存NaOH的生化类试剂，吸收了空气中的C02,导致试剂 中NaOH的浓度不降，立接影响试剂分析质量?，还原型辅酶1(NADH)、 邻-硝基酚-P-D-半乳糖苷(ONPG)以及其他部分发光底物等一些稳 定性较差的物质，也会因暴露于空气中而影响测定效果［5］。对于免疫 类试剂，由于其主要组成成分为抗原、抗体和酶等蛋白类物质，此 类试剂除与空气接触影响试剂的酸碱度外，微生物污染也是很重要的 因素，因此对此类试剂进行开瓶稳定性研宄是非常必要的［6］。另外， 对于胶体金试纸条/卡，由于生产时的低湿度要求，在开封时直接吸 收空气中水分，也必须对幵封后使用期限有明确要求。通常而言，开 瓶稳定性的研究建议考察三批次样品，按照说明书的操作要求，合理 设定时间间隔，在不同时间点，按照试剂的技术指标，对