父代糖尿病引起子代代谢紊乱的研究-药理学专业论文.docx

重庆医 重庆医科大学硕士研究生学位论文 万方数据 万方数据 英汉缩略语名词对照 英文缩写 STZ 英文全称 Streptozotocin 中文名称 链脲佐菌素 DM Diabetes mellitus 糖尿病 DM-O Offspring of diabetes mellitus 糖尿病后代 CT Control 对照 CT-O Offspring of control 对照组后代 ALT Alanine aminotransferase 谷丙转酶 AST Aspartate transaminase 谷草转氨酶 TC Total cholesterol 总胆固醇 TG Triglyceride 甘油三脂 HDL High density lipoprotein 高密度脂蛋白 LDL Low density lipoprotein 低密度脂蛋白 mg milligram 毫克 kg kilogram 千克 mM mmol/L 毫摩尔每升 GTT Glucose tolerance test 葡萄糖耐量实验 s second 秒 min minute 分钟 h hour 小时 U Unit 单位（国际） rpm revolutions per minute 每分钟转数 ml milliliter 毫升 PBS Phosphate buffered saline 磷酸盐缓冲液 HE Hematoxylin and Eosin 苏木精-伊红染色 Acc-a acetyl-coa carboxylase-alpha 乙酰辅酶 a 羧化酶-a Fasn-1 Fatty acid synthase-1 脂肪酸合酶-1 固醇调节元件结合蛋 Srebp1 serpine1 mRNA binding protein 1 白-1 Akt protein kinase B, PKB 因子蛋白激酶 B Irs1 MeDIP-seq insulin receptor substrate 1 Methylated DNA Immunoprecipitation Sequencing 胰岛素受体底物 1 甲基化 DNA 免疫共沉 淀测序 1 父代糖尿病引起子代代谢紊乱的研究 要 目的： 流行病学研究表明，父亲或母亲患糖尿病是子代患糖尿病的重要 危险因素。母亲患糖尿病及妊娠期合并糖尿病对子代代谢的影响已有 系统和深入的研究，但父亲患糖尿病对子代生长发育及代谢的影响尚 不明确。因此本课题考察了父代糖尿病所生子代的生长发育及代谢情 况，旨在明确父代糖尿病对子代生长发育和代谢的影响及机制。 方法： 雄性 SD 大鼠腹腔注射链脲佐菌素(35 mg/kg)，选择血糖持续高于 16.7 mM 低于 26.0 mM 的动物作为糖尿病模型，与正常雌鼠交配；子 鼠出生后监测体重、随机血糖和空腹血糖；实施葡萄糖耐量、高胰岛 素正常血糖钳夹实验；观测体型；监测摄食量。处死动物后，收集血 清和肝脏组织。血清检测谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆 固醇(TC)、甘油三脂(TG)、高密度脂蛋白(HDL)及低密度脂蛋白(LDL)； 肝脏组织进行 HE 染色、油红 O 染色、透射电子显微镜观测、TG 测 定；Real-Time PCR 检测分析肝脏脂质代谢关键因子乙酰辅酶 a 羧化 酶 alpha（Acc-a）、脂肪酸合酶 1（Fasn-1）和固醇调节元件结合蛋白 -1（Srebp1）RNA 的相对表达；Western blot 检测胰岛素信号通路关键 因子蛋白激酶 B(protein kinase B, PKB, Akt) 和胰岛素受体底物 2 1(insulin receptor substrate 1, Irs1)的磷酸化；肝脏全基因组甲基化分 析。 结果： 父代糖尿病组大鼠血糖水平显著高于对照组。与对照组相比，糖 尿病组子代体重明显增加、葡萄糖耐量受损、摄食量增加，但两组随 机血糖及空腹血糖未见明显差异。血清生化指标检测显示，与对照组 相比，糖尿病子代组血清 ALT、AST 水平并无显著变化，但 TC、TG、 LDL 水平升高、HDL 水平降低。糖尿病组子代肝脏细胞内有大量脂质 堆积、肝脏 TG 含量明显增多；糖尿病组子代肝脏细胞 Srebp1 相对表 达明显升高；透射电镜观察到糖尿病组子代肝脏细胞出现内质网扩张。 老年期时，糖尿病子代葡萄糖耐量受损加重，胰岛素信号通路关键因 子 Akt 和 Irs1 磷酸化程度降低，胰岛素敏感性明显降低。肝脏全基因 甲基化分析表明，糖尿病子代肝细胞大量基因甲基化水平发生变化。 实验结论： 父代糖尿病可导致子代代谢紊乱，患糖尿病风险升高；结果初步 显示表观遗传学机制可能参与父代糖尿病致子代代谢改变。 关键词：糖尿病,代谢紊