附子理中汤对腹泻型肠易激综合征大鼠治疗作用的机理研究中西医结合临床专业论文.docxVIP

附子理中汤对腹泻型肠易激综合征大鼠治疗作用的机理研究 附子理中汤对腹泻型肠易激综合征大鼠治疗作用的机理研究 广州医科大学硕士学位论文 广州医科大学硕士学位论文 PAGE PAGE 1 PAGE PAGE 2 主要英文缩略词表 Abbreviation 缩写词 英文全称 中文全称 IBS irritable bowel syndrome 肠易激综合征 D-IBS diarrhea-predominant irritable bowel syndrome 腹泻型肠易激综合征 C-IBS constipation-predominant irritable bowel syndrome 便秘型肠易激综合征 M-IBS Mixed irritable bowel syndrome 混合型肠易激综合征 U-IBS undifferentiated irritable bowel syndrome 未分型肠易激综合征 SPF specific-pathogen-free 无特殊病原菌感染 RIA radioimmunoassay 放射免疫分析 HE hematoxylin-eosin 苏木伊红 PBS phosphate buffered solution 磷酸盐缓冲溶液 CNS central nervous system 中枢神经系统 ENS enteric nervous system 肠神经系统 NEI Neuroendocrine -Immunity 神经-内分泌-免疫网络 VIP vasoactive intestinal peptide 血管活性肠肽 附子理中汤对腹泻型肠易激综合征大鼠治疗作用机 理研究 导 师：张志敏 主任 研究生：谢文娟 中文摘要 目的 对正常大鼠予番泻叶灌胃加束缚应激，观察大鼠一般情况、体质量增长率、 稀便率、粪便隐血分析以及结肠病理等的变化，评价大鼠 D-IBS 模型，探讨简 单、可靠、周期短、可重复性强的 D-IBS 模型构建方法。 通过观察腹泻型肠易激综合征(D-IBS)大鼠血清及结肠黏膜血管活性肠肽 (VIP)的变化，探讨附子理中汤治疗 D-IBS 模型大鼠的可能机制，进一步阐明附 子理中汤治疗 D-IBS 的具体作用靶点，为该方的临床合理应用提供实验基础， 为中药方剂治疗功能性肠病提供思路及方法，为挖掘出新的治疗功能性肠病的有 效药物提供实验依据。 方法 1、将 50 只 SPF 级成年 SD 大鼠随机分为对照组（C）和模型组（M），对照 组 10 只，模型组 40 只，每组雌雄各半。适应性喂养 3 天后，秤起每只大鼠体质 量作为初始体质量，模型组予浓度为 0.2kg/L 的番泻叶水煎液灌胃，灌胃结束后 1h 用统一拉力橡皮筋对大鼠进行束缚 2h，将其四肢固定在木板上，使其活动受 限，烦躁不安；对照组每天只予生理盐水灌胃，不行束缚。每隔 1 天同一时间秤 取大鼠体质量作为当日体质量，观察大鼠每天排便情况，连续 2 周，通过观察大 鼠一般情况，评估大鼠体质量增长率及稀便率，对大鼠粪便进行分析，并从每组 中随机抽取 2 只大鼠做结肠粘膜病理切片，评价造模成功与否。 2、将造模成功的 D-IBS 大鼠随机分成 4 组，分别为模型组（M），得舒特组 （D），附子理中汤小剂量组（f）、附子理中汤大剂量组（F），每组 8 只，雌雄各 半；另外，将对照组剩余 8 只大鼠设为正常组（Z）纳入第二部分实验，共 5 组 大鼠，各组加相应的药物干预；Z 组每天只予等量生理盐水灌胃，M 组每天灌服 0.2kg/L 的番泻叶水煎液后 1h 予等量生理盐水灌胃，D 组每天灌服 0.2kg/L 的番 泻叶水煎液后 1h 予 1.5mg/mL 的得舒特溶液灌胃，f 组每天灌服 0.2kg/L 的番泻 叶水煎液后 1h 予 0.75g/mL 的附子理中汤灌胃，F 组每天灌服 0.2kg/L 的番泻叶 水煎液后 1h 予 1.5g/mL 的附子理中汤灌胃，连续 2 周。 3、末次给药后，禁食不禁水 24h，10%水合氯醛腹腔麻醉后剖开大鼠腹部， 腹主动脉采血至大鼠心跳停止，离心血清保存，取距肛 8cm 结肠，沿纵轴剪开， 刮取结肠黏膜组织，用匀浆机制成匀浆，-20℃冷藏。 4、采用放射免疫分析法（RIA）测定各组大鼠血清及结肠粘膜血管活性肽 （VIP）含量。 结果 1、经番泻叶水煎液灌胃加束缚应激的模型组大鼠体质量增长缓慢，部分呈 负增长，对比对照组有统计学意义（p0.05）； 2、造模第 2 天开始，模型组大鼠出现不同程度的稀便，部分可见排粘液便， 无见排脓血便，粪便 OB 在(+)以内，造模第 14 天稀便率达 50%以上，对照组全 程未出现稀便，对比对照组，模型组稀便率有统计学意义（p0.05）。 3、各组 D