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牛支原体生长曲线测定和培养基筛选 　　摘要：为筛选最适于牛支原体（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｂｏｖｉｓ）生长的培养基，利用活菌计数方法测定了牛支原体ＯＦ２株在改良Ｔｈｉａｕｃｏｕｒｔ’ｓ培养基、牛心汤培养基和改良ＫＭ２培养基中的生长曲线。结果发现，牛支原体在改良Ｔｈｉａｕｃｏｕｒｔ’ｓ培养基中生长３０ ｈ即可达到平台期，平均最高生长滴度７．０×１０９ ｃｃｕ／ｍＬ；在牛心汤培养基中生长４０ ｈ即可达到平台期，平均最高生长滴度４．０×１０９ ｃｃｕ／ｍＬ；在改良ＫＭ２培养基中生长５０ ｈ达到平台期，其平均最高生长滴度为７．０×１０８ ｃｃｕ／ｍＬ。结果表明，牛支原体在改良Ｔｈｉａｕｃｏｕｒｔ’ｓ培养基中生长快、滴度高，为下一步牛支原体灭活疫苗的研究提供了参考依据。 　　关键词：牛支原体（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｂｏｖｉｓ）；培养基筛选；生长曲线 　　中图分类号：Ｓ８５２．６２；Ｓ８５８．２３ 文献标识码：Ａ 文章编号：0439－８114（２０12）03－0549-03 　　 　　Ｍｅｄｉｕｍ Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ａｎｄ Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ Ｇｒｏｗｔｈ Ｃｕｒｖｅ ｏｆ Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｂｏｖｉｓ 　　 　　ＳHAO Ｑｉａｎ１，２，ＣHU Ｙｕｅ－ｆｅｎｇ２，ＨE Ｓｈｅｎｇ－ｈｕ１，ＬU Ｚｈｏｎｇ－ｘｉｎ２ 　　（１. Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ， Ｎｉｎｇｘｉａ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｙｉｎｃｈｕａｎ ７５００２１， Ｃｈｉｎａ； ２. Ｓｔａｔｅ Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｅｔｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ / Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ Ｇｒａｚｉｎｇ Ａｎｉｍａｌ Ｄｉｓｅａｓｅｓ ｏｆ Ｍｉｎｉｓｔｒｙ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ / Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ Ａｎｉｍａｌ Ｖｉｒｏｌｏｇｙ ｏｆ Ｍｉｎｉｓｔｒｙ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ / Ｌａｎｚｈｏｕ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ， Ｃｈｉｎｅｓｅ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ， Ｌａｎｚｈｏｕ ７３００４６， Ｃｈｉｎａ） 　　 　　Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｔｏ ｓｃｒｅｅｎ ｔｈｅ ｓｕｉｔａｂｌｅ ｃｕｌｔｕｒｅ ｍｅｄｉｕｍ ｆｏｒ Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｂｏｖｉｓ， ｔｈｅ ｇｒｏｗｔｈ ｃｕｒｖｅｓ ｏｆ Ｍ． ｂｏｖｉｓ ｓｔｒａｉｎ ＯＦ２ ｉｎ ｔｈｅ ｉｎｐｒｏｖｅｄ Ｔｈｉａｕｃｏｕｒｔ’ｓ ｍｅｄｉｕｍ， ｔｈｅ ｃａｔｔｌｅ－ｈｅａｒｔ ｆｕｓｉｏｎ ｍｅｄｉｕｍ ａｎｄ ｔｈｅ ｉｎｐｒｏｖｅｄ ＫＭ２ ｍｅｄｉｕｍ ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ｂｙ ｖｉａｂｌｅ ｃｏｕｎｔ ｍｅｔｈｏｄ， ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｓｔａｔｉｏｎａｒｙ ｐｈａｓｅ ｏｆ Ｍ. ｂｏｖｉｓ ａｐｐｅａｒｅｄ ａｆｔｅｒ ｃｕｌｔｒｕｒｅｄ ３０ ｈ ｉｎ ｔｈｅ ｉｎｐｒｏｖｅｄ Ｔｈｉａｕｃｏｕｒｔ’ｓ ｍｅｄｉｕｍ， ４０ ｈ ｉｎ ｔｈｅ ｃａｔｔｌｅ－ｈｅａｒｔ ｆｕｓｉｏｎ ｍｅｄｉｕｍ ａｎｄ ５０ ｈ ｉｎ ｔｈｅ ｉｎｐｒｏｖｅｄ ＫＭ２ ｍｅｄｉｕｍ． Ｔｈｅ ａｖｅｒａｇｅ ｈｉｇｈｅｓｔ ｇｒｏｗｔｈ ｔｉｔｅｒｓ ｏｆ ｔｈｅ ＯＦ２ ｓｔｒａｉｎ ｗｅｒｅ ７．０×１０９ ｃｃｕ／ｍＬ， ４．０×１０９ ｃｃｕ／ｍＬ ａｎｄ ７．０×１０８ ｃｃｕ／ｍＬ， ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ． Ｉｔ ｉｎｄｉｃａｔｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｇｒｏｗｔｈ ｒａｔｅ ａｎｄ ｔｉｔｅｒｓ ｏｆ Ｍ． ｂｏｖｉｓ ｓｔｒａｉｎ ＯＦ２ ｉｎ ｔｈｅ Ｔｈｉａｕｃｏｕｒｔ’ｓ ｍｅｄｉｕｍ ｗｅｒｅ ｔｈｅ ｈｉｇｈｅｓｔ ｉｎ ｔｈｅ ｔｈｒｅｅ ｓｅｌｅｃｔｅｄ ｍｅｄｉａ． Ｉｔ ｐｒｏｖｉｄｅｄ ａ ｕｓｅｆｕｌ ｄａｔａ ｆｏｒ ｔｈｅ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ｉｎａｃｔｉｖａｔｅｄ ｖａｃｃｉｎｅ ａｇａｉｎｓｔ Ｍ． ｂｏｖｉｓ． 　　Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｂｏｖｉｓ； ｃｕｌｔｕｒｅ ｍｅｄｉｕｍ ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ； ｇｒｏｗｔｈ ｃｕｒｖｅ 　　 　　牛支原体（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｂｏｖｉｓ）是引起牛的肺炎、关节炎、乳房炎、角膜结膜炎等病的病原体之一［１］。该病原体于１９６１年首次在美国患有乳房炎的病牛中分离出来［２］，目前在欧洲和北美洲流行并造成了严重的经济损失［３，４］。２００８年，我国部分地区新从外地引进肉牛暴发了由Ｍ．ｂｏｖｉｓ引