肺癌组织中EB病毒及p53基因变化的研究-外科学专业论文.docxVIP

中文摘要 中文摘要 申文摘要 申文摘要 肺癌组织申 EB 病毒及 p53 基因变化的研究 -品 摘要 研究目的:肺癌是当今世界上最常见的恶性肿瘤之 一章其发病率里逐年快速上升趋势。目前认为吸烟、空气 污染和职业因素等与肺癌发生密切相关。但在研究吸烟与 不同组织类型肺癌之间的关系时发现，吸烟与肺鳞癌及小 细胞肺癌的关系较肯定，而与腺癌的关系尚无统一看法。 据统计女性肺癌中的 80.7%，男性肺癌中的19.5%不能用 吸烟来解释。临床上经常遇到一些无上述病因暴露史的肺 癌患者 F 因此寻找其他致癌因素很有必要。近年来，在肿 瘤病因学中对肿瘤病毒的研究证明肿瘤病毒中有癌基因 存在梦当细胞发生恶性转化时，病毒基因组中的相关基因 整合到细胞基因组中，作为细胞基因组的一部分表达并产 生转化蛋白〈称为癌蛋白 λ 这些蛋白改变细胞功能和表 型，使这些细胞被转化进而增殖形成肿瘤。自从有人用羊 逆转录病毒 (JSRV) 在羊体内可以快速诱导出类似人细 支气管肺泡癌的多灶性肺癌，使肺癌与病毒之间的相关性 得到证明步随后病毒敖癌作用日益受到关注。 EB 病毒( Epstein-Barr virus) 是第一个被认为与人类 恶性肿瘤发病相关的肿瘤病毒曹已经证实与其相关的恶性 肿瘤主要杳 Burkitt 淋巴瘤、鼻咽瘤。对于 EB 病毒感染与 肺癌发生的关系曹仅有少数报道而且尚无定论。一些学者 对病毒的研究发现，肺癌组织中可检测到 EB 病毒的存在， -肺癌患者血清中 EB 病毒的 VCA-IgA 抗体滴度明显高于 非肺癌患者和正常人，在实验状态下 EB 病毒可转化支气 管上皮细胞。以上初步表明肺癌发生与 EB 病毒感染存在 - 、 一定关系，但还缺乏有力的证据，为此我们采用冰冻新鲜 肺癌组织标本检测肺癌组织中的 EB 病毒，进一步探讨 EB 病毒与肺癌的关系， pS3 基因是肺癌发生的重要抑癌基因，多数研究认为 pS3 基因突变是肺癌发生中的一个频发事件。报道称几乎 所有的小细胞肺癌和 42%的非小细胞肺癌有 p53 基因的 缺失或点突变。 p53 突变后表达突变型 p53 蛋白，可用免 疫组织化学法检测到，而正常情况下野生型 p53 蛋白半衰 期很短，不易被免疫染色着色。因此可通过检测肺癌组织 中 p53 蛋白的表达来间接反应 p53 基因的变化。本文通过 检测肺癌组织中 pS3 蛋白的阳性表达水平，进一步证明 pS3 基因在肺癌发生中的突变情况。初步探讨 EB 病毒与 p53 基因在肺癌中的作用关系，为肺癌的病毒病因学研究 及其致癌机制提供理论基础。 实验方法:①实验对象:经病理证实的 30 例肺癌手 术标本，男性 20 例，女性 10 例a 鳞癌 11 例，腺癌 16 例， 小细胞肺癌 3 例。②取材方法 z 将手术切除下的肺癌标本 在 2 小时内分三部分取材，分别取同侧肺叶远隔肿瘤的边 缘肺组织(边缘组织)、距肿瘤边缘 3cm 以内组织(癌旁 组织〉及非坏死部位的肿瘤组织(癌组织 )0 即刻分装作 标记，放入 -700C冰箱中保存。③IEB 病毒检测:采用聚 合酶链反应 (PCR) 分别检测 30 例肺癌标本相对应三部 2 申文摘要 申文摘要 ， ，中文摘要 .，. ? 分组织的 EB 病毒。取- 700C冰箱中保存的手术标本，按 每一例标记的三部分用冰冻切片机切取少量组织，经过加 入蛋白酶 K 和 DNA 提取液制作出待测液目在基因扩增仪 上扩增 35 个循环后行 2%琼脂糖凝胶电泳，最后在紫外线 检测分析仪上观察，以在 250bp 处出现橙黄色条带为 EB 病毒感染阳性。将癌组织中的 EB 病毒感染率与癌旁组织 和边缘肺组织进行比较，并将不同病理类型之间的 EB 病 毒感染率进行比较。 ④p53 蛋白检测:将上述同组 30 例 标本的三部分做成石蜡切片，应用链霉菌抗生物素蛋白- 过氧化物酶 (S-p) 免疫组织化学法分别检测各例肺癌标 本相对应的癌组织、癌旁组织和边缘肺组织的 p53 蛋白表 达水平，以癌组织与癌旁组织和边缘肺组织进行比较。⑤ 将上述两种实验方法得出的 EB病毒感染情况和 p53 蛋白 表达水平的结果进行相关性分析。上述所有数据资料均用 统计学软件进行处理。 ∞实验结果:①肺癌组织中 EB 病毒感染率为 43.30Ió(13/30). 癌旁组织和边缘肺组织中 EB 病毒感染率 为 3.3o/o(2fω)，其中鳞癌占45.5领5/11)、腺癌43.8圳7/16)、 小细胞肺癌 33.3%(11匀。结果显示癌组织中 EB 病毒感染 率明显高于癌旁组织和边缘肺组织 (PO. 01)，不同病 理类型之间的 EB 病毒感染率无显著性差异(扣0.05)。② 肺癌组织中 p53 蛋白阳性表达率为 46.70/