复方补骨胶囊的研制-药物分析学专业论文.docx

中文搞飞也 中文搞飞也 复方补骨胶囊的研制 摘要 目的:本试验以复方补骨胶囊的制 为基础，研究和 评价反相高效液相色谱法用于其质量控制的可行性，并观 察其对去势大鼠骨密度、血清生化指标的影响，为其应用 于临床提供理论依据。 方法:中医传统理论认为骨质疏松由肾精亏虚、牌失 他运所至，故治疗应以补肾健牌，填精生髓，活血止痛为 主。由此，本文以中医传统理论和多年临床用药经验为依 据组成复方补骨胶囊的处方。试验前先进行正交试验设 计，将影响异补骨脂素含量测定结果的三个主耍因素(补 骨脂有效成分的提取方法、含量测定中异补骨脂素提取所 m榕剂和回流提取时间)按正交试验表 L9 (34) 安排试验， 拟据结果选择最佳方案。本试验分为三部分:胶囊的制备、 制剂的质量控制和对去势大鼠的影响。 l 复方补骨胶囊的制备:取经过鉴别的优质中药材，以水 煮醇沉法提l极其中大部分在j材的有效成份，并以乙瞠为溶 媒渗漉法提取补骨脂的有效成分，加入辅料制成胶囊。 2 制剂的质量控制:按照中国药典的规定进行有效成分的 含量测定、成分鉴别(包括补节脂、黄茂和熟地黄〉、溶 tH度检查、微生物检测和装量差异试验等。复方补自·胶囊 的质量控制的重点在于其有效成分的含量测定。本试验采 用反相高效液相色谱法测定补骨脂的主要有效成分一异 巾立f商业 补骨脂素( isopsoralen )的含量。首先进行方法学考察， 边择甲醇·水 (50: 50) 为流t;JJ 相，紫外检测波长设定为 249nm 。以外标法进行含量测定，建立标准曲线。进行对 照试验和阴性?空白试验，考察杂屈和补即脂京对异补骨脂 索测定的影响。在凹收率试验 1 分别将 20陆、40μg 和 60阳 的对mt 品加入空臼样品中，然后进行分离提取和测定，计 算回收率，评价测定方法的准确度。重复测定闻利不同浓 度的对照品溶液 (10μglm1 和 20μglm1) 的含量，计算日 内精密度。逐日测定三种不同浓度的对照品溶液 (5μglm1、 10μglml 和 20μglml) 的含量，计算，日间精密度。最后测 定复}j补骨胶囊中异补骨脂素的含量，制定其质量控制标 准。 3 对去势大鼠的影响: Wistar 大鼠被随机分为假手术组 (Shame) 、去势组(OVX) 、妇复春组(FFC)、阵钙素组 (CT) 和复方补骨胶囊组 (CBC)。假手术组在手术中不摘除卵巢， 其他四组大鼠手术摘除卵巢制成骨质疏松动物模型。用药 3 个月后，测定大鼠的骨密度及各种生化指标。根据实验 结果研究药物对骨代谢的影响，评价复方补骨胶囊对去势 大鼠的治疗效果。 结果: 1 正交实验设计:通过对含量测定结果的分析， 选择了乙醋渗漉法提取补骨脂的有效成分，氯仿为洛媒提 l驭复方补骨胶囊中所含的异补骨脂素，回 1M提取时间定为 2ho 2 质量控制: 2.1 鉴别:各样品的梅层色谱中，在与对照品相对应的位 置均显示相同的斑点，而空白溶液不显示相应的斑点。 中文Illi业 中文Illi业 中立 中立 商业 2.2 锹生物检测 z 细菌数每 Ig 内容物为 600 个，霉菌数 为 30 个，结果符合中国药典规定。 2.3 装量差异:平均装量为 1.535g. 每粒胶囊装量均在1.5 士 0.15g 的范围内，符合中国药典规定。 2.4含量测定:选择甲醇-Jj( (50: 50) 为流动相，理论塔 板数 (n) 以异补骨脂素计算为 1600. 补骨脂索、异补骨 脂素两峰分离度 (R) 为1.40 ，峰形尖锐，分离良好。 1m 性空白试验和对照试验中，其他成分在该色谱条件下 对 异补骨脂素峰无干扰，对其保留时间无影响。对照品的浓 度在 2-20μglml 的范围内，浓度与峰面积有良好的线性关 系，相关系数 (r) 为 0.9989 。平均回收率为 98.85%. RSD 为1.32%(n=5); 日内精密度 RSD 分别为 0.52%和 0.73%; FI间精密度 RSD 分别为1.08% 、0.89%和 0.84%。样品叶 异补骨脂素的平均含量约 0.8mg/g (0.795 mg/g). 按每粒 1.5g 装量计算，每粒胶囊中含异补骨脂素为1.2mg. 其含 量j业占标示量的 90%-110% 。 2.5 胶囊溶出度及崩解时限检查:胶囊均在 20min 内崩解， 胶囊的平均溶出度为 79%. 均符合中国药典规定。 3 对去势大鼠的影响:对照细 (Sham) 同去势组(OVX) 比较:血钙值无明显差异:血磷值低，有显著差异 (p 0.05); 骨密度 (BMD) 高、碱性磷酸酶 (ALP) 低、抗 酒石酸碱性磷酸酶 (TRAP)低，均有极显著差异 (P 0.01 )