环孢霉素A对实验性干眼的疗效观察及对角膜上皮细胞调亡和相关基因表达的影响-病理学与病理生理学专业论文.docxVIP

中文摘要j幂孢霉素A对实验性千眼的精：效观察及对角膜上皮 中文摘要 j幂孢霉素A对实验性千眼的精：效观察及对角膜上皮 细胞凋亡和相关基因表达的影响 摘 要 目的：十眼是指由丁泪液分泌减少或过度蒸发导致泪膜 片常的·利·常见疾病。泪膜随着水分的丢火变的不稳定，眼 农亦随之逐渐退化。十眼发痫率较高，成年人中10—15％忠有 ltL77,j，随着社会老龄化、角膜接触镜的使心以及微机的普及 等，j￡发病率越来越高。干眼的临床症状主要表现为干涩、 日畦红、片物感或磨砂样感、痒感、烧灼感、流泪、粘性分泌 物麋视办模糊簿妒潆年累月的4i适降低J’患者的生活质量。 j』f】矿t‘叭的治疗1：要是局部滴用人，I：泪液改善症状，必要时 加川抗感染约物，但人∽日液必须频繁点眼方可奏效。随着 研究的；_；|{入，逐渐认识到频繁应川的滴眼液中所含氯化苯|f』 弪版等防腐剂对眼表I：皮有毒性作用，从而限制r这螳药物 的频繁和K期使川。据文献报道干眼的发生与机体免疫有 关，蹦：他霉素A足一种免疫抑制荆，可刺激T细胞活性、减 少}_，f=多炎症吲子的J_生、降低结膜炎性吲子白细胞介素一6的 水、|，I从而改善十眼症状。本实验对干眼兔局部滴用环孢霉 索A进行治疗，观察j￡对实验性干眼的疗效及对角膜上皮细 胞渊r_和相天基J★I尖达的影响，旨在找!ti滴H醍次数少、毒副 作川小且能改善症状的治疗一VNK-药物，为临床治疗十眼提供 依杯。 方法： 1 7卜=实验采JIJ健埭成年新I脚兰人白兔22 J{(河北医科大 中文摘要 中文摘要 学第三医院实验动铡一心)，体重2．5±0．5kg，：雌雄不分，随 机分为4组，分别为正常组(正常对照-21t)、治疗组(干眼造模 后点环孢霉索A治疗)、对照组(干眼造模后点蓖麻油)和干眼 纠f(十眼造模后不作任何干预)。正常组6岁0兔1 2眼，干眼组4 J{8眼，』乓余12只兔右侧12眼为治疗纰，左侧12眼为对 j!{{组。对各组兔双眼行泪膜破裂时问(tear break up time，BUT)、7日液分泌实验(schinner I，Sit)枪食。 2干眼模颦制f，l；：治疗组、对照绀和干眼组舣眼手术摘 墩汨腺、哈氏腺和瞬膜，于手术后每周分别盘sit、BuT，根 据诊断标准第5周末确诊为干眼。 3臼术后第6周开始点眼，治疗组弘以2％环孢霉素A 点眼，3次传f、2浦／次，』L，·量6删，对照纰于以龅麻油点眼， 川法l刊治疗算}。点眼后2、4、6 N森蠡转≮爨“嚣袋摄证常组 及十限绀做比较。 4粕理取材：治疗后第6周处死实验动物，取角膜、萍 侧球结膜，4％多聚I}i醛同定，石蜡包埋，，制片备圳。 5TUNEL试剂盒柃测干眼组、对照组、治疗缎和正常 纰角膜f．皮细胞捌产数量，计算缚高f齐视野下(400倍)凋 r_细胞数，计算、r均凋亡细胞数。 6免疫纰织化学检查：检测备组角膜¨-叟细胞Fas／FasL 的农达，蚱分析j￡表达的高低与细胞涮产的相天性。 7结膜纠钐：制成切片后行PAS染色，观察治疗前后杯状 细胞的变化。 8采川SPSS l 1．5软件包进行统计学分析。 中文摘要结果： 中文摘要 结果： l泪腺摘除术前治疗组、对照组、干眼组和正常组各组 问slt和BUT检查结果与正常相比差异无显著性(p0．05)， 术后Slt和BUT随时问延长数值逐渐下降，每次检测结果与 I卜^常组相比均有显著差异，但1．4周末未达到干眼诊断标准， “到第5周时各项指标符合干眼诊断标准 2治疗后’2川治疗组、对照组和干眼组sit和BUT柃台 结聚两两比较统计学分析差异无显著忭(pO．05)：治疗后4． 埘和6刷Sit和BUT榆食结果正常组治疗组对照组干眼’ 纰，经统计学分析均有娃著性差异(pO．01)。 3裂隙灯检查州‘见干眼组兔角膜干燥少光泽，荧光素染色 见骸在点辩。佚着色，结膜和脸缘充血，有多量异常分泌物，炎症 I归|U!。治疗后结膜和喻缘充向减轻，治疗组荧光素染色无着色， 对_|!ci乡1l弛敞在J?、i状着色． 4TUNEL试剂盒检测十眼组、对照组和治疗组角膜上皮 ·『，冽广细胞数分别为(6．2l±2．12)、(3．42-1．32)和(1．27 ±0．11)个／i岛俯视野，凋亡细胞核呈棕黄色，三组数据经 统讣学榆验差异订{u!著性(pO．01)。 5免疫组织化学检资捌亡相关垫圜蛋白Fas／FasL主要表 达r细胞膜和细胞浆，附盹反应物呈棕黄色，阳性表达细胞 的数量十碳纰对照卦l治j，组1卜常组，经统计’学分析各组 问斧芹仃_!lJ!著。m 6纰织病理学规察十H艮组结膜杯状细胞数量减少，上皮 细胞排列小规则，可她人量淋巴细胞浸涧：角膜上皮变薄， 』：J支细胞不完整，细胞核变小；治疗组结膜杯状细胞数量较 ‘卜眼纰明_!L|i增加，