高产无色素普鲁兰多糖菌株的选育及发酵条件优化-微生物学专业论文.docxVIP

Abstract optimal fermentation conditions was:fermentation temperature 28℃,initial pH 5.0,4% inoculum,and speed at 200 r/min.After 5-L fermenter culture,the yield of pullulan of strain P1012 was 43.77 g/L,and the sugar conversion rate was 62.53%.After fermentation,pH of the fermentation broth increased from 6.56 to 5.00,and the viscosity was 52.10 mpa.s. Key Words: Aureobasidium pullulans;pullulans;strain separate;identified; compound mutation; fermentation 目录 目录 目录 摘要 Ⅰ Abstract Ⅱ 第 1 章 引言 1 1.1 前言 1 1.2 茁芽短梗霉的特性 1 1.2.1 生物学地位 1 1.2.2 形态特征 1 1.2.3 黑色素的产生 3 1.3 普鲁兰多糖的性质 3 1.3.1 分子结构3 1.3.2 物理及化学性质 4 1.4 普鲁兰多糖的合成机制 5 1.5 普鲁兰多糖生产的研究进展 5 1.5.1 菌种选育 5 1.5.2 培养基成分 6 1.5.3 培养条件 8 1.5.4 下游处理 9 1.6 普鲁兰多糖的应用进展 10 1.6.1 食品行业 10 1.6.2 医药行业 10 1.6.3 其他行业11 1.7 普鲁兰生产问题11 1.8 本文研究意义与方法 12 第 2 章 出发菌株的分离及鉴定 13 2.1 仪器与材料 13 2.1.1 材料与试剂 13 2.1.2 仪器与设备 13 2.1.3 主要试剂配制 13 2.2 实验方法 14 2.2.1 土壤样品采集及处理 14 2.2.2 真菌的分离及纯化 14 2.2.3 18S rDNA 的克隆及测序 14 2.2.4 18S rDNA 分析 16 2.2.5 真菌发酵产物的提取及定性分析 16 2.2.6 菌种保藏 17 2.3 实验结果与讨论 17 2.3.1 真菌的分离及纯化 17 2.3.2 18S rDNA 的克隆及测序 18 2.3.3 18S rDNA 分析 19 2.3.4 真菌发酵产物的提取及定性分析 20 2.4 小结 22 第 3 章 出发菌株的复合诱变 23 3.1 仪器与材料 23 3.1.1 材料与试剂 23 3.1.2 仪器与设备 23 3.1.3 主要试剂配制 23 3.2 实验方法 24 3.2.1 菌种活化及菌悬液的制备 24 3.2.2 复合诱变条件的优化 24 3.2.3 复合诱变步骤 25 3.2.4 遗传稳定性实验 25 3.2.5 菌落与细胞形态比较 25 3.2.6 产普鲁兰多糖比较 26 3.2.7 分析方法 26 3.3 实验结果与讨论 26 3.3.1 复合诱变条件的优化 26 3.3.2 复合诱变结果 28 3.3.3 遗传稳定性实验 30 3.3.4 菌落与细胞形态比较 30 3.3.5 产普鲁兰多糖比较 31 3.4 小结 32 第 4 章 菌株 P1012 的发酵条件优化及验证 34 4.1 仪器与材料 34 4.1.1 材料与试剂 34 4.1.2 仪器与设备 34 4.1.3 主要试剂配制 34 4.2 实验方法 35 4.2.1 菌种活化及菌悬液的制备 35 4.2.2 培养基成分的单因素实验 35 4.2.3 培养基成分的正交实验 35 4.2.4 培养条件优化实验 35 4.2.5 发酵条件验证 35 4.2.6 分析方法 35 4.3 实验结果与讨论 36 4.3.1 培养基成分的单因素实验 36 4.3.2 培养条件优化实验 38 4.3.3 培养基成分的正交实验 40 4.3.4 发酵条件验证 41 4.4 小结 42 第 5 章 结论与展望 43 5.1 仪器与材料 43 5.1.1 出发菌株的分离及鉴定 43 5.1.2 出发菌株的复合诱变 43 5.1.3 菌株 P1012 的发酵条件优化及验证 43 5.2 展望43 致谢45 参考文献 46 附录 50 攻读学位期间的研究成果 55 第一 第一章 引言 PAGE PAGE 1 第一章 引言 1