高产海藻糖酵母菌株利用玉米淀粉一步转化生产海藻糖的工艺研究-海洋生物学专业论文.docxVIP

高产海藻糖酵母菌株利用j兰米淀粉 高产海藻糖酵母菌株利用j兰米淀粉 步转化牛产海潼耱的。r艺研究 高产海藻糖酵母菌株利用玉米淀粉一步转化生产海藻 糖的工艺研究 摘要 海藻糖(Trehalose)又名覃糖，在细菌、酵母菌、真菌以及一些昆虫、脊椎 动物和植物中广泛存在。研究显示海藻糖不仅可以作为细胞碳源储存物，而且可 用作高效保护剂增加细胞组分对不良环境条件(如高温、冷冻、脱水、高渗透压 和高酒精浓度)的抗性。海藻糖的这种保护特性使它在许多方面具有广泛的应用， 如医学和微生物学中作为细胞防冻剂、作为化妆品的有效成分、作为诊断试剂和 生物产品的稳定剂，甚至还可以用作新鲜食品的防腐剂。因此，现在许多人正致 力于用廉价的方法生产海藻糖。 淀粉价格低廉，来源广泛，被认为是用来生产海藻糖的最佳原料。Pretorius 等报道能够利用淀粉作为碳源和能源的150株酵母菌中，能够表达淀粉液化酶和 糖化酶的扣囊复膜酵母(Saccharomycopsisfibuligera)对淀粉的降解效率最高。 我们过去的研究中发现Saccharomycopsis fibuligera sdu在淀粉培养基中经48小 时发酵海藻糖的累积量达到18．0％(wlw)，说明Saccharomycops妇fibuligera是 用来生产海藻糖的很好菌株。但是该酵母菌体内能合成酸性和中性海藻糖酶，这 些酶在细胞中可以分解合成的海藻糖， 这对海藻糖的累积是不利的。因此，为 了提高海藻糖的产量，从该菌株中去除或削弱酸性和中性海藻糖酶活力是必要 的。后来， 利用化学诱变技术获得酸性和中性海藻糖酶活力大大降低的A1l突 变株， 该突变株在可溶性淀粉培养基中培养菌体内海藻糖的累积量达到 19．1％(w／w)。本研究发现用玉米淀粉代替淀粉来生产海藻糖能使海藻糖的生产成 本更低，All突变株在1％(w／v)玉米淀粉培养基中发酵48小时菌体内海藻糖 的累积量达到24．O％(w／w)。 本论文利用突变株A1 l菌株分别用玉米淀粉和可溶性淀粉培养基在摇瓶中 发酵，结果发现用玉米淀粉代替可溶性淀粉发酵48小时，该突变株在玉米淀粉 培养基中生长后细胞内海藻糖的积累量在要高于在可溶性淀粉培养基中的积累 高产海藻糖酵母菌株利用弘长淀粉一步转化生产海藻糖的工艺研究量，比如说在发酵48小时后，突变株在玉米淀粉培养基中其细胞内海藻糖的含 高产海藻糖酵母菌株利用弘长淀粉一步转化生产海藻糖的工艺研究 量，比如说在发酵48小时后，突变株在玉米淀粉培养基中其细胞内海藻糖的含 量为21％(w／w)，在相同条件下该突变株在呵溶性淀粉培养基中培养其细胞内海 藻糖的含量为15．8％(w／w)。同时还比较了该突变株在这两种不同培养基中菌体 生长情况以及用不同淀粉培养基发酵过程中这两种培养基内还原糖和总糖的变 化情况。 本论文还利用2升全自动发酵罐研究该菌株发酵玉米淀粉生产海藻糖的最 佳工艺，得出A11菌株积累海藻糖的最佳条件是：培养基初始pH5．5，培养温度 30℃，发酵罐转速200rpm，通气量41／min，最佳碳源浓度为2．0％(w／v)的玉米 淀粉， 在这种最佳条件下，该突变株转化玉米淀粉可以产生22．89％(w／w)，这 是利用玉米淀粉直接转化生产海藻糖最高产量的酵母菌菌株， 我们是首次建立 了利用玉米淀粉直接经过产淀粉酶酵母菌转化生产海藻糖的工艺。我们发现不影 响菌体生长的条件下，低浓度碳源有利于菌体内海藻糖的积累。 在海藻糖提取精制工艺方面，本论文主要用了热蒸馏水提取菌体中的海藻 糖，提取液经过进一步分离纯化，得到的海藻糖晶体。 关键词：扣囊复膜酵母突变菌株，海藻糖，玉米淀粉发酵 2 高产海藻镛酵母菌株利蹦丘水淀粉一步转化生产海藻糖的r艺研究Studies 高产海藻镛酵母菌株利蹦丘水淀粉一步转化生产海藻糖的r艺研究 Studies On direct conversion of corn starch to trehalose by a mutant ofSaccharomycopsisfibuligera Absttact Trehalose(0【一D—giucopyranosyl一1·1一oc—glucopyranose)is widely present in bacteria，yeasts，and fungi as well some insects，invertebrates and plants．Recent results have shown that trehalose does not only primarily function a reserve carboh’rdrate but also as a taOdy efficient protectant，enhancing the re