第八章微生物生长及其控制.pptVIP

目的和要求： 本章主要使大家掌握微生物生长繁殖的规律，微生物生长的测定方法，及各种物理、化学因素对微生物生长的影响，有害微生物的控制方法 一、测生长量 　一）、直接法 　　　 1.测体积法； 2.称干重法； 　二）、间接法 　　　 1.比浊法：比浊管法；分光光度计法； 2.生理指标法：测含N量；测含C量；其他。 分光光度计法 二、计繁殖数 　一）、直接法 　　 比例计数法、 血球计数板法、 薄膜过滤染色镜检法 薄膜过滤荧光镜检法 　二）、间接法（活菌计数法） 　　平板菌落计数法、平板涂布法、 薄膜过滤平皿计数法 2）平皿菌落计数法(平板涂布法) 特点： 生长速率常数最大，即代时最短 ; 细胞内各种成分进行匀衡生长 酶系活跃，代谢旺盛。 细胞对理化因素较敏感。 在指数期中，有三个参数最为重要： 1、繁殖代数N； 2、生长速率常数R；　　 3、代时G 。 一些细菌的代时 菌名 培养基 培养温度 代时 E. coli（大肠杆菌） 肉汤 37℃ 17min E. coli 牛奶 37 12.5 Enterobacter aerogenes（产气肠细菌） 肉汤或牛奶 37 16~18 E. aerogenes 组合 37 29~44 B. Cereus（蜡状芽孢杆菌） 肉汤 30 18 B. thermophilus（嗜热芽孢杆菌） 肉汤 55 18.3 Lactobacillus acidophilus（嗜酸乳杆菌） 牛奶 37 66~87 Streptococcus lactis（乳酸链球菌） 牛奶 37 26 S. lactis 乳糖肉汤 37 48 Salmonella typhi（伤寒沙门氏菌） 肉汤 37 23.5 Azotobacter chroococcum（褐球固氮菌） 葡萄糖 25 344~46 Mycobacterium tuberculosis（结核分枝杆菌）组合 37 792~93 Nitrobacter agilis（活跃硝化杆菌） 组合 27 1200 延长稳定期采取的措施： 补充营养物质 取走代谢产物 改善培养条件 特点： 细胞以指数速率死亡 细菌代谢活性降低 细菌衰老并出现自溶 细胞呈现多种形态，革兰氏染色有时呈假阴性 三、微生物的连续培养 连续培养(continuous culture)又称开放培养(open culture)。 目的：使微生物可长期保持在指数期平衡生长状态和稳定的生长速率上。 方法：当微生物以单批培养的方式培养到指数期的后期时，一方面以一定速度连续流进新鲜培养基，并立即搅拌均匀；另一方面，利用溢流的方式，以同样的流速不断流出培养物。 结果：培养物达到动态平衡，形成微生物高速连续生长（continuous growth）。　　 同一微生物不同生理生化过程有不同的最适温度。如：青霉素发酵：(产量比30℃提高14.7%)  30℃ 25℃ 20℃ 25℃ 0h 5h 40h 125h 165h 致死温度 致使微生物完全死亡的最低温度界限。 （一般在生理盐水中，10分钟）  多数细菌、酵母、霉菌和病毒：50 ℃ - 65℃；嗜热脂肪芽孢杆菌营养体：120 ℃以上；放线菌：76 - 80 ℃ ；芽孢：100 ℃ 以上，肉毒梭状芽孢杆菌：120 -121 ℃ 。 一）好氧菌 1、专性好氧菌（obligate or strict aerobes） 必须在较高氧分压的条件下才能生长，有完整的呼吸链，以分子氧作为最终氢受体，细胞含超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(catalase)。 2、兼性厌氧菌（facultative anaerobes） 在有氧或无氧条件下均能生长，但有氧情况下生长得更好；在有氧时靠呼吸产能，无氧时借发酵和无氧呼吸产能，细胞含SOD和H2O2酶。 3、微好氧菌（microaerophilic bacteria） 只能在较低氧分压下才能正常生长。也通过呼吸链并以氧为最终氢受体而产能。 二）厌氧菌 4