头孢他啶高分子聚合物测定法（草稿）.PDFVIP

附件： 头孢他啶聚合物测定方法的质量标准（草稿）与研究资料 头孢他啶高分子聚合物测定法 （草稿） 头孢他啶聚合物 照分子排阻色谱法(中国药典2005 年版二部附录Ⅴ H) 测定。 色谱条件与系统适用性试验 用葡聚糖凝胶 G-10(40～120 μm)为填 充剂,玻璃柱（1.0×45cm）,流动相A 为含3.5%硫酸铵的pH7.0 的0.15mol/L （0.1 mol/L）磷酸盐缓冲液［取0.15mol/L （0.1 mol/L）磷酸氢二钠61ml 和0.15mol/L （0.1 mol/L）磷酸二氢钠39ml,混合均匀，加硫酸铵3.5g, 使 溶解后,滤过,］。流动相B 为水,流速每分钟 0.8ml,检测波长为 254nm,量取 1.5mg/ml 蓝色葡聚糖2000 溶液100 μl, 注入液相色谱仪，分别以流动相A,B 进行测定，记录色谱图。按蓝色葡聚糖 2000 峰计算理论板数均不低于500, 拖尾因子均应小于2.0。在两种流动相系统中蓝色葡聚糖2000 峰的保留时间 比值应在0.93～1.07 之间，对照溶液主峰与供试品溶液中聚合物峰与相应色 谱系统中蓝色葡聚糖2000 峰的保留时间的比值均应在0.93～1.07 之间。称 取头孢他啶约0.2g 与碳酸钠20mg,置10ml 量瓶中，用1.5mg/ml 的蓝色葡聚 糖2000 溶液溶解并稀释至刻度，摇匀。量取100 μl 注入液相色谱仪，用流 动相A 进行测定，记录色谱图。高聚体的峰高与单体与高聚体之间的谷高比 应大于1.5。另以流动相B 为流动相，精密量取对照溶液100 μl,连续进样5 次,峰面积的相对标准偏差应不大于5.0%。 对照溶液的制备 取头孢他啶对照品适量，精密称定，加水溶解并定量 制成每1ml 中约含头孢他啶100 μg 的溶液。 测定法 精密称取本品约0.2g 与碳酸钠20mg,置 10ml 量瓶中，加水 适量使溶解后，用水稀释至刻度，摇匀。立即精密量取100 μl 注入液相色谱 仪,以流动相A 为流动相进行测定,记录色谱图。另精密量取对照溶液100 μl 注入液相色谱仪，以流动相B 为流动相进行测定，记录色谱图。按外标法以 峰面积计算，含头孢他啶聚合物以头孢他啶计不得过XX%。 1 方法的研究与验证 1.流动相A 的选择 用含3.5%硫酸铵的 pH7.0 的0.1mol/L 和0.15 mol/L 磷酸盐缓冲液作为流 动相A 进行测定时,单体与其聚合体能得到良好分离, (附图) 。但含 3.5%硫 酸铵pH7.0 0.15 mol/L 磷酸盐缓冲液进行测定时,单体与其聚合体的分离优 于含3.5%硫酸铵的 pH7.0 的0.1mol/L 磷酸盐缓冲液。故选用含3.5%硫酸铵 的 pH7.0 的0.15 mol/L 磷酸盐缓冲液作为流动相A 。 Manual Run 9:1_UV Manual Run 9:1_EditedBaseline Manual Run 3:1_UV mAu 150 100 50 18.72 0 14.0 16.0 18.0 20.0 22.0 24.0 min 附图A 二种流动相A 的分离色谱图 （绿色：pH7.0 0.1mol/L，蓝色：pH7.0 0.15mol/L，） 流动相B : 水, 2. 检测波长: 254nm, 3. 分离度试验 根据药典附录ⅤH 分子排阻色谱法规定，高分子杂质检 查时，某些药物分子单体与其聚合体不能达到基线分离时，其分离度计算公 式为 R=高聚体的峰高/单体与高聚体之间的谷高＞2.0 分离度试验溶液 由于高分子聚合物的对照品不易获得，而样品中的高 聚物又极少，在配制分离度溶液时，适