基于GGBP蛋白绑定的表面等离子共振葡萄糖检测技术研究-测试计量技术及仪器专业论文.docxVIP

摘要 糖尿病是中老年人的常见病和多发病，人体血糖浓度的动态、连续、精确检 ，、 飞，测是糖尿病预防和控制的前提和基础。目前，国际上人体血糖浓度检测方法主要 包括有创测盘、无创测量和微创测量。其中，有创血糖检测技术即传统的指尖取 血，这种技术使病人疼痛且不能实现血糖浓度的动态、连续检测，而光学无创血 糖检测技术在世界上尚处于研究阶段，距 i临床应用还高较大距离。因此微创血糖 检测技术越来越成为研究热点。本课题组研究的微创血糖检测技术，通过透皮抽 取组织液，然后基于表面等离子共振 (Surface Plasmon Resonance ， ， 、 飞 ， 量了组织液中的葡萄糖浓度，并最终实现对人体血糖浓度的预测。 本文主要进行了葡萄糖浓度检测技术的研究，通过引入对葡萄糖具有特异性 吸附能力的 D伽葡萄糖 /D-半乳糖结合蛋白 (D-galactoselD-glucose Binding Protein， GGB肘，进行了蛋白绑定和葡萄糖的测量实验，分析了实验过程中的影响因素， 并且开发了小型化葡萄糖检测仪器。本论文完成的主要工作包指: (1) 系统研究了血糖检测的发展现状:阐述了表面等离子共振的原理、发展及 应用;讨论了 GGBP 的特性、制备方法以及在传感器表团的固定方法。 (2) 研究了肢糯合蛋白绑定方法，并且进行了 GGBP 的胶糯合绑定实验以及 葡萄糖的测量实验。实验结果显示，基于胶糯合蛋白绑定的测量结果要明 显好于直接测量的结果，测量下限可以达到 O.5mgldL，且测量线性区间 为 O.5-5mgldL 。 (3) 分析了肢梢合实验过程中的各种影响因素，包括 pH 值、蛋白浓度、蛋白 活性、蛋白制备流程以及温度。 、‘(4) 研究丁硫醇梢合蛋白绑定方法，并且进行了 GGBP 的硫醇祸合绑定实验 以及葡萄糖的测量实验。实验结果显示，基于硫醇祸合蛋白绑定方法的实 验结果过程要好于胶糯合的实验结果，其葡萄糖的测量线性区间为 O.l-l OmgldL，并且通过大量实验，验证了测量的稳定性和囊复性。 、 ‘ (5) 开发了…套小型化的微创血糖仪，本论文对其进行了系统的可行性验证实 验，分析了系统目前存在的问题并提出了改进意见。 关键词z 葡萄糖检测表团等离子共振 GGBP 肢辅合碗醇祸合 ABSTRACT Diabetes is a 仕叫uent1y encountered disease for old folks，dynarnic，continuous and accurate detection ofhuman blood glucose ωncentration ís the key for prevention and treatment of the diabet创. At present ，the detection methods of human blood glu∞se concentration main1y inc1ude invasive，minimally-invasive and non-invasive. ，‘?Among the three methods ，invasive detection bases on ph1ebotomized from fing即tip， this technology made 出e patients feel pain， and also cant achieve dynarnic and continuous detection.ηle method of non-invasive blood glucose ，‘ ? technology.in the wor1d is sti11 in the research stage，位lere is a large distance away 仕om 也e clinical application. 白1町efore，minimally-invasive blood glu∞se testing technology becomes research hotspot. ηle minima11y-invasive human glu∞se detection technology w础 studied by our group.η10Ugh int町stitial fluid transderm a1 extraction，it can estimate the bloOd glucOse concentratiOn thrOugh detecting glucOse cOncentration in 伽 interstitia1 fluid by SPR. 币