第八章：细菌民和病毒的遗传学分析.ppt

1.噬菌体的结构和形态 T噬菌体的结构 蛋白质外壳 核酸 2 噬菌体的繁殖和感染周期 烈性噬菌体: 如T噬菌体 吸附 细菌裂解,释放出子代噬菌体颗粒 细菌染色体 降解 噬菌体DNA和蛋白质外壳包装成 子代噬菌体颗粒 烈性噬菌体的感染周期 噢，一只倒霉的大肠杆菌遇了细菌病毒T4噬菌体！ 病毒马上抓住猎物不放，但是大肠杆菌体积是病毒的1000倍。病毒怎么办呢？ T4 噬菌体的生命旅程 请看： 病毒的蛋白质外壳发挥作用，将病毒的核酸物质注入大肠杆菌体内，请注意病毒的外壳最后会被弃在寄主体外。 左图：病毒核酸链接入到寄主核酸链中右图：病毒核酸链指挥大量复制自己 病毒的核酸链（蓝色部分）经过一系列作用，接入寄主的核酸链（橙色部分）中，进而控制寄主的生命活动。利用寄主本身的营养物质复制出成千上万的病毒核酸，同时新产生的病毒核酸链（黄色部分）又指挥寄主的细胞，利用寄主的营养物质大量地生产病毒外壳蛋白质，最后把外壳与病毒核酸一起装配成完整的新病毒。 最后: 大肠杆菌死亡并破裂，释放出里面的病毒，新一代病毒开始新的生命旅程 随着时间的推移，细菌的数量变得越来越少，这是因为它们被细菌病毒杀死了，这种现象也称为“溶菌”现象。 温和噬菌体 吸附 溶菌周期 - uv诱导 细菌裂解 溶源周期 原噬菌体 如?噬菌体: 温和噬菌体侵入相应宿主细胞后，由于前者的基因组整合到后者的基因组上，并随后者的复制而进行同步复制，因此，这种温和噬菌体的侵入 并不引起宿主细胞裂解， 此即称溶源性或溶源现象。 溶源性（lysogeny） 原噬菌体（prophage） 当温和噬菌体侵入其敏感宿主的细胞后，前者的核酸可整合到后者的核基因组（genome，即核染色体）上，这种处于整合态的噬菌体核酸，称作原噬菌体（prophage）。 凡能引起溶源性的噬菌体即称温和噬菌体，而其宿主就称溶源菌。 溶源菌是一类能与温和噬菌体长期共存，一般不会出现有害影响的宿主细胞。 溶源菌（lysogen或lysogenic bacteria） 温和噬菌体的溶源性反应： 3 噬菌体的突变型 条件致死突变型: (1). 温度敏感突变 (2). 抑制因子敏感突变 宿主范围突变型: E.coli B E.coli B2 E.coli B+E.coli B2 h+ + - 半透明噬菌斑 h- + + 透明噬菌斑 噬菌斑形态突变型: (1). r+ 小噬菌斑,边缘模糊 (2). r- 大噬菌斑,边缘清晰: 快速溶菌(rapid lysis) 4 烈性噬菌体与基因定位 双重感染：是指用两种噬菌体同时感染某一菌株。 例如： 噬菌体Ⅰ：h－r+即能感染B和B2菌株产生噬菌斑小而边缘模糊，即透明、小噬菌斑。 噬菌体Ⅱ：h+r－能感染B株，产生约大两倍的边缘清楚的噬菌斑，即为半透明、大的噬菌斑。 用h－r+和h+r－两种噬菌体同时感染B株，进行双重感染 。 h＋r－ 半透明，大 42 h＋r＋ 半透明，小 12 h－r＋ 透 明，小 34 h－r－ 透 明，大 12 重组率= (h+r++h-r-) ×100% 总噬菌斑数 T2 phage重组试验结果 有四种可能的排列顺序 六 转导 (transduction) 以噬菌体为媒介，把某一细菌的DNA转移到另一细菌，进行基因重组的过程。 转导的遗传重组 普遍性转导 (generalized transduction)： 供体的任何一个基因都可能被转移，且几率相等。 局限性(特异性)转导 (specialized transduction) ： 噬菌体只把细菌基因组中特定部分的基因整合到自己的DNA中，并传递给受体的过程。 采集志愿者的少量静脉血（3～5毫升）， EB病毒转化B淋巴细胞为永生细胞，经过技术处理的数千株细胞被保存在零下196摄氏度的液氮中，在需要的时候将冻存的细胞复苏，可以保存志愿者基因供永久性研究。 * 用不同的Hfr菌株进行中断杂交实验所作出的大肠杆菌基因连锁图，其基因向F-细胞转移的顺序大不相同。 重组作图 当转移时间间隔在两分钟之内， 如已知lac与ade紧密连锁，距离约为1分钟，中断杂交作图就不可靠，须用传统的重组作图(recombination mapping) (1)不用亲本类型 (2)两对基因间的交换频率，必须在形成部分二倍体的条件下，计算重组率。 (3)部分二倍体如果不发生重组，