临床微生物额学概论.pptVIP

* 充分混匀 标准浊度 菌苔厚度的要求 Clin Microbiol Infect 2014; 20: O831–O839 J Antimicrob Chemother, 2010; 65: 249-251 接种菌量升高导致MIC升高 接种菌量升高导致改良Hodge试验假阳性升高 DMID,2004; 49: 41-46. * 合适的培养基厚度 普通细菌 MH琼脂培养基（Mueller－Hinton Agar） 培养基厚度：4mm 肺炎链球菌及其他链球菌 5％脱纤维羊血＋MH琼脂培养基 嗜血杆菌属 嗜血杆菌培养基（HTM）＋SR158添加剂 错误做法：采用血琼脂做肠球菌的药敏试验 * 4.合适的培养条件 需氧菌： 35℃ ±2 ℃ ，16-18小时 嗜麦芽窄食单胞菌、洋葱伯克霍尔德菌：20-24小时 葡萄球菌：33-35 ℃ ，苯唑西林、万古霉素 24小时 肠球菌：万古霉素-24小时 溶血性链球菌、肺炎链球菌、奈瑟氏菌属等：20-24小时 * 5.正确阅读结果（纸片法） 工具：游标卡尺，尺子 光源：反射光、透射光 阅读： 药敏平皿背衬不反光的黑色背景用 肉眼观察 也可用机器阅读抑菌圈直径 抑菌圈边缘微弱生长的、仅能在放大镜下才能观察到的细小菌落应忽略 * 正确测量苯唑西林、万古霉素和利奈唑胺对葡萄球菌；以及万古霉素对肠球菌的抑菌圈直径 透射光 反射光 * 不要用反射光 要使用透射光 抑菌圈内有菌落，怎么办？ 大肠埃希菌污染有肠球菌 菌落再次纯分 铜绿假单胞菌 有耐药菌落 * CLSI文件：我国部颁标准 * 结果判断和报告：纸片扩散法—— 1株细菌1个药1个标准 用精确度为1mm的游标卡尺量取抑菌圈直径。 通常采用CLSI公布的药敏结果判断标准，采用三级划分制。 临床实验室标准化协会(Clinical and Laboratory Standards Institute,CLSI 是我国的部颁标准 肠杆菌科细菌判断标准 结果判断和报告：稀释法—— 1株细菌1个药1个标准 * 结果判断和报告 敏感（Susceptible）：当一种细菌引起的感染，用某种药物常规量治疗有效，这种细菌即对该药高度敏感。 中度敏感（Intermediate）：当细菌引起的感染仅在应用高剂量抗菌药物时有效，或者细菌处于体内抗菌药物浓缩的部位或体液（如尿、胆汁、肠腔等）中时才被抑制，这种细菌对该药仅呈中度敏感。 耐药（Resistance）：药物对某一细菌的药敏高于药物在血或体液内可能达到的浓度时，有时细菌能产生灭活抗菌药物的酶，则不论其MIC值大小如何，仍应判定该菌为耐药。例如产青霉素酶的金葡菌即应认为该菌对青霉素耐药。 * 6.重要的质控菌 肠杆菌科细菌：大肠埃希菌ATCC25922 非发酵菌： 铜绿假单胞菌ATCC27853 葡萄球菌： 金黄色葡萄球菌ATCC25923 肠球菌： 粪肠球菌ATCC29212 肺炎链球菌： 肺炎链球菌ATCC49619 嗜血杆菌： 流感嗜血杆菌ATCC49247 * 改变条件对于质控的要求 要求质控的连续天数 方法改变 1 5 20或30 药敏纸片 更换新的批号 ☆ 更换新的厂家 ☆ 更换新的品种 ☆ 培养基 （配置药敏平板） 更换新的批号 ☆ 更换新的厂家 ☆ * 改变条件对于质控的要求 要求质控的连续天数 方法改变 1 5 20或30 接种物准备 校准更换的使用设备 ☆ 校准操作者技术 ☆ 测量抑菌圈 方法改变 ☆ 仪器/软件 软件的更新 ☆ 仪器的修理 ☆ * 纸片法药敏试验结果异常分析 * 天然耐药 * （二）正确的抗菌药物组合 原则：针对监测细菌设计监测药物的品种和数量 CLSI抗菌药物选择的原则（A、B、C、U组） 根据病原菌的种类 革兰阳性球菌 葡萄球菌、肠球菌 、链球菌等 革兰阴性杆菌 肠杆菌科细菌、铜绿假单胞菌、不动杆菌等 根据本单位临床实际需要 * FDA批准临床微生物室常规药敏试验分组 抗菌药： A .为常规的一级(一线)试验组合并常规报告结果 B. 亦可用于一级(一线)试验，但应选择性报告，即当A组药物耐药时可以选择性地报告B组中的同类药物 C. 为补充性药物，可选择性报告 U. 为补充性药物,仅用于治疗尿路感染的选择用药 * * 补充性药物选择性报告的原则 对一线试验组合的药物耐药 身体特殊部位 患者不能接受一线试验组合的药物 一线试验组合的药物对患者无效 复数菌感染 多部位感染 * * 肠杆菌科细菌的抗菌药物选择 抗菌药物 A B C U 抗菌药物 A B C U O 阿米卡星 √ 亚胺培南 √ 庆大霉素 √ 美罗培南