第二讲生物石信息的传递下从mrna到蛋白.ppt

二、起始（initiation) 起始因子的功能 IF-3分子量为20kD， 具有解离30S与50S亚基的活性；是30S亚基与mRNA起始位点的特异结合所必需的。 问题：为什么其它Met-tRNAs不能进入起始位点？ 是由于两种tRNA本身的差别导致的 3、移位（Translocation) 四、肽链合成的终止 真核生物的蛋白质合成 真核与原核生物翻译的比较 mRNA 核糖体 tRNA起始 起始因子 延伸因子 释放因子 原核生物 5′端：SD序列 70S fmet-tRNAfmet 三种 三种 三种 小结：原核生物与真核生物翻译的差别 (1)真核生物mRNA具有m7GpppNp帽子结构，mRNA分子5′端的“帽子”和3′端的多聚A都参与形成翻译起始复合物。 (2)原核生物的起始tRNA是fMet-tRNAfMet，而真核生物是Met-tRNAMet； (3)原核生物中30S小亚基首先与mRNA模板相结合，再与fMet-tRNAfMet结合，最后与50S大亚基结合。而在真核生物中，40S小亚基首先与Met-tRNAMet相结合，再与模板mRNA结合，最后与60S大亚基结合生成80S·mRNA·Met-tRNAMet起始复合物。 (4)原核生物mRNA上5′末端通过SD序列与核糖体结合；真核生物核糖体上有专一位点或因子识别mRNA的帽子，使mRNA与核糖体结合。除了帽子结构以外，40S小亚基还能识别mRNA上的起始密码子AUG。 (5)真核生物mRNA与核糖体小亚基结合时需要ATP，可能蛋白质合成中消除ｍＲＮＡ二级结构需ＡＴＰ水解提供能量。 有些动物病毒如脊髓灰质炎病毒的mRNA可翻译成很长的多肽链，含多种病毒蛋白，经蛋白酶在特定位置上水解后得到几个有功能的蛋白质分子。 2．二硫键的形成 ??mRNA中没有胱氨酸的密码子，而不少蛋白质都含有二硫键，蛋白质合成后通过两个半胱氨酸的氧化作用生成的。如胰岛素的形成。 七、蛋白质合成的抑制剂 ????? 抗生素能够抑制蛋白质的合成。它们对蛋白质合成的作用主要是阻止mRNA与核糖体结合（氯霉素），或阻止AA-tRNA与核糖体结合（四环素类），或干扰AA-tRNA与核糖体结合而产生错读（链霉素、新霉素、卡那霉素等），或作为竞争性抑制剂抑制蛋白质合成。 ????? 白喉毒素（diphtheria toxin) 对真核生物剧毒，实质是一种修饰酶，对真核生物的EF-2起共价修饰作用，使其失活。 由于肿瘤细胞对白喉毒素比正常细胞更敏感，故用它与抗肿瘤细胞的特异抗原结合以消灭肿瘤细胞。 干扰素（ interferon) 由真核生物细胞感染病毒后分泌的具有抗病毒作用的蛋白质。可抑制病毒繁殖，保护宿主。 干扰素在双链RNA（某些RNA病毒）存在时，作用于蛋白质合成的启动阶段，使蛋白质合成受抑制。 二、翻译后运转机制: 信号序列被称为前导肽，前导肽在跨膜运转中起重要作用。 (二) 叶绿体蛋白的转运 膜 基质 类囊体 3、叶绿体与线粒体蛋白质转运比较 （1）膜上都有各自特定的受体蛋白； （2）需要能量，利用ATP和质子动力势； （3）前导肽； （4）某些Hsp分子相同 （5）受体蛋白复合体是不同的。 （三）核定位蛋白的运转机制 核蛋白：在细胞质内合成后，进入细胞核内发挥功能的一类蛋白质。 核定位信号（nuclear localization sequence,NLS）：引导蛋白质进入细胞核的一段信号序列。 NLS是存在于亲核蛋白内的一些短的氨基酸序列片段，富含碱性氨基酸残基，如Lys、Arg，此外还常含有Pro。 NLS的氨基酸残基片段可以是一段连续的序列，也可以分成两段，两段之间间隔约10个氨基酸残基（核质蛋白）。 NLS序列可存在于亲核蛋白的不同部位，在指导完成核输入后并不被切除。 NLS只是亲核蛋白进入核的一个必要条件而非充分条件 四、蛋白质的降解 2. 降解涉及到的三种重要酶 泛素活化酶 (ubiquitin-activating enzyme，E1) 泛素结合酶 （ubiquitin-conjugating enzyme，E2) 泛素蛋白连接酶 (ubiquitin-proteinligating enzyme, E3) （3）SRP结合GTP,释放信号肽，进入膜通道，翻译继续进行 （4）GTP水解，SRP与DP分离并恢复游离状态， （5）多肽合成继续进行； （6）新生肽过膜后，信号肽酶将蛋白切割，蛋白释放到内质网中。 问题1：信号肽在蛋白质运输中是如何起作用的？ β－半乳糖苷酶 (L) 麦芽糖结合蛋白（MB） 麦芽糖转运蛋白（MT） MB N端基因片段 MT N端基因片段 L C端基因片段 L C端基因