μ阿片受体pet显像剂11ccfn的制备与生物学评价基于针麻开颅的针刺镇痛机制研究影像医学与核医学专业论文.docxVIP

硕士研究生毕业论文Il阿片受体PET显像剂11C．CFN的制备与生物学评价 硕士研究生毕业论文 Il阿片受体PET显像剂11C．CFN的制备与生物学评价 基于针麻开颅的针刺镇痛机制研究 中文摘要 一． 背景： 针刺麻醉是中医针灸学在现代科学技术条件下的重大发展和突破。针刺镇痛 (acupuncture，AA)作为针刺麻醉的核心组成部分，持续多年都是国内外医学研 究的热点。大量神经生物化学、组织病理、受体放射性配基结合分析等研究揭示， 针刺作为一种刺激镇痛疗法，通过激活脑内与痛觉有关的结构实现镇痛，是多种 神经递质(包括神经肽)及受体共同参与下的生理过程，其中，内源性阿片肽与 阿片受体(opiate receptors，ORs)是参与AA的主要神经化学物质。但由于目前多 数研究仅限于动物实验，基于人体的作用机制至今尚未阐明。近10多年，功能磁 共振和正电子发射断层扫描(positron emission tomography,PET)等影像技术的 发展，为针刺基于人体的穴位特异性和镇痛中枢机制研究提供了直接、客观的有 力手段。 PET受体显像依据受体一放射性配基特异性结合的特性实时观察活体内微量 受体的存在和变化，以无创性的方法获得受体的分布(定位)、数量(密度)和 功能(亲和力)影像，具有独特的显像优势。将PET受体显像技术应用于针刺研 究，对于阐明AA的中枢机制和促进针刺麻醉的科学应用都将具有重要意义。理 想的放射性配基是开展PET受体显像的关键。本课题为国家重点基础研究发展计 划(973计划)中医理论专项——“基于针麻开颅的针刺镇痛机制研究’’子项目， 旨在通过对IX．ORs正电子配基11C．卡芬太尼(carfentanil，CFN)的放射性制备、质 量控制以及大鼠体内分布研究，从而建立应用国产¨C模块在线自动化制备 11C．CFN的方法，评价其物理、化学和生物学性质，为AA肛．ORs PET显像临床试 验的开展做好前期准备。 二． 内容： 第一部分Ix-ORs PET显像剂¨C．CFN能J放射性制备 目的：建立应用国产11C模块在线自动化制备p．ORs PET显像剂11C—CFN馓g 硕士研究生毕业论文有效的方法。 硕士研究生毕业论文 有效的方法。 方法：¨C．碘代甲烷(CH3I)在线转化为11C．三氟甲基磺酰甲烷(嘶nate．CH3I)， 后者通入装有0．5 mg前体去甲基CFN(溶解于O．15 ml一--甲基亚砜溶液)的V型瓶 内，分次在常温(丹=12)、冰浴(，z．2)、加热(55v，2 min，萨3)条件下对前体进行甲基 化反应并完成¨C标记。粗产品用3 ml--元体系溶液(异丙醇／氨水)转移至Sep—Pak C2柱，先后用10 ml×3注射用水淋洗C2柱，再经氮气(10 ml／min×3 rnin)吹干 后，用0．5 ml无水乙醇将11C-CFN从C2柱洗脱下来。另称取1．0 mg前体置于常温下 反应(萨3)，计算产率。 结果：应用国产¨C模块在线自动化制备11C．CFN合成时间约20 mill(加速器 轰击结束，EOB)。O．5 mg前体常温下反应平均产率为(35．5±2．2)％(萨12，不校 正)；冰浴下产率明显降低，为(5．7±2．3)％(甩-2)；加热时产率(34．9+3．7)％(，l=3)。 1．0 mg前体常温下反应产率为(36．8±3．9)％(门=3)。11C．CFN的纯化不需经高效液相 色谱仪(HPLC)分离。 第二部分 11C．CFN的鉴定与质量控制 目的：应用分析型HPLC进行¨C．CFN鉴定，建立¨C．CFN的物理、化学、生 物学性质等质量控制标准，小鼠毒性试验评价药物的安全性。 方法：11C．CFN的鉴定采用分析型HPLC检测系统：固定相Xterra RP 18柱 (5岬，3．9×150 mnl，Waters)：流动相v(L腈)：y(水)：v(o．02 mol／L乙酸铵)=55： 45：0．1，pH值6．5；流速0．5 ml／min：紫外检测波长224 nln。11C．CFN的质量控 制参考美国药典正电子药物标准和国家食品药品监督管理局制定的《正电子类放 射性药品质量控制指导原则》执行。12只KM小鼠随机分为试验组与对照组进 行¨C—CFN毒性试验，观察尾静脉注射一定负荷量的¨C．CFN与等体积的10％ 乙醇溶液后小鼠的反应，常规饲养一周后送检主要组织脏器病理。 结果：11C．CFN的紫外保留时间(Rt)为5．0 min，放射峰Rt为5．1 min，与CFN 标准品Rt(5．1 min)一致。产品中未探测到明显的前体去甲基CFN及其他杂质峰。 ¨C．CFN注射液澄清、透明、无沉淀，pH值6．5～7．O，放化纯度98％，放射性浓 度9．2 mCi／ml，放射性半衰期