2017-18学年高中生物专题5DNA和蛋白质技术5.3血红蛋白的提取和分离练习.docxVIP

课题3　血红蛋白的提取和分离 基础巩固 1电泳过程中,什么样的分子迁移速度最快?(　　) A.纤维状、大分子　　　　　B.纤维状、小分子 C.球状、大分子 D.球状、小分子 解析:电泳是利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状的不同将样品中各分子分离。一般来说,球状分子比纤维状分子移动速度快,小分子比大分子移动速度快。 答案:D 2蛋白质提取和分离分为哪几步?(　　) A.样品处理、凝胶色谱操作、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 B.样品处理、凝胶色谱操作、纯化 C.样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定 D.样品处理、纯化、粗分离、纯度鉴定 答案:C 3选用红细胞作为分离蛋白质的实验材料,其原因是 (　　) A.血红蛋白是有色蛋白　 B.红细胞无细胞核 C.红细胞中血红蛋白含量高　 D.红细胞中DNA含量高 解析:选用红细胞作为蛋白质分离的实验材料,是因为在红细胞的组成中,除水分以外,约90%是血红蛋白。 答案:C 4洗涤红细胞时,所采用的离心方法是(　　) A.低速长时间离心　 B.低速短时间离心 C.高速长时间离心 D.高速短时间离心 解析:高速或长时间离心,会导致白细胞和淋巴细胞一同沉淀,得不到纯净的红细胞,进而影响血红蛋白的提取纯度。 答案:B 5在蛋白质的提取和分离中,关于对样品处理及粗分离过程的分析,正确的是(　　) A.洗涤红细胞的目的是去除血浆中的葡萄糖、无机盐 B.洗涤时离心速度过小,时间过短,白细胞等会沉淀,达不到分离的效果 C.洗涤过程选用质量分数为0.1%的NaCl溶液 D.透析的目的是去除样品中相对分子质量较小的杂质 解析:洗涤红细胞的目的是去除血浆中的杂蛋白;洗涤时离心速度过高、时间过长,白细胞等会沉淀,达不到分离的效果;洗涤过程应选用质量分数为0.9%的NaCl溶液。 答案:D 6下列关于凝胶色谱柱装填的叙述,错误的是(　　) A.交联葡聚糖凝胶(Sephadex G-75)“G”表示凝胶的交联程度、膨胀程度及分离范围,75表示凝胶得水值 B.色谱柱内不能有气泡存在,一旦发现有气泡,必须重装 C.用300 mL物质的量浓度为20 mmol/L的磷酸缓冲液充分洗涤平衡凝胶12 h D.凝胶用自来水充分溶胀后,配成凝胶悬浮液 解析:本实验中使用的交联葡聚糖凝胶(Sephadex G-75),其中G表示凝胶的交联程度、膨胀程度及分离范围,75表示凝胶得水值,即每克凝胶膨胀时吸水7.5 g;气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序,降低分离效果,因此,一旦发现有气泡,必须重装;在洗脱过程中,应在约50 cm 高的操作压下,用300 mL物质的量浓度为20 mmol/L的磷酸缓冲液充分洗涤平衡凝胶12 h,以使凝胶装填紧密;装填色谱柱前,应使用蒸馏水将凝胶充分溶胀,制成凝胶悬浮液。 答案:D 7将经破裂处理后的红细胞混合液以2 000 r/min的速度离心10 min后,离心管中的溶液分为四层,从上到下的顺序依次是(　　) A.血红蛋白、甲苯层、脂溶性物质层、沉淀层 B.甲苯层、沉淀层、血红蛋白、脂溶性物质层 C.脂溶性物质层、血红蛋白、甲苯层、沉淀层 D.甲苯层、脂溶性物质层、血红蛋白、沉淀层 解析:混合液经离心后,按密度大小排列,在离心管中从上到下,第1层为无色透明的甲苯层,第2层白色薄层固体是脂溶性物质沉淀层,第3层红色透明液体是血红蛋白溶液,第4层暗红色沉淀物主要是红细胞破碎物沉淀。 答案:D 8某生物兴趣小组在“蛋白质的提取和分离”实验中,准备从羊的血液中初步提取血红蛋白,设计的血红蛋白提取、分离流程图如下: 实验准备(配制缓冲液、血细胞悬液)样品处理(洗涤、破碎、离心等) 蛋白质粗分离(透析)纯化、纯度鉴定(凝胶色谱法、电泳等) 请回答下列有关问题。 (1)样品处理中红细胞的洗涤要用　　　　　　　　　反复冲洗、离心。向红细胞悬液中加入一定量的低浓度pH=7.0的缓冲液并充分搅拌,可以破碎红细胞,破碎细胞的原理是　? 　。? (2)血红蛋白粗分离阶段,透析的目的是　　　　　　　　　　　　　　,若要尽快达到理想的透析效果,可以　　　　　　　　　　　　(写出一种方法)。? (3)电泳利用了待分离样品中各种分子的　　　　　　　　　　　　　　　　等的差异,使不同带电分子产生不同迁移速度,实现各种分子的分离。? (4)一同学通过血红蛋白醋酸纤维薄膜电泳,观察到正常人和镰刀型细胞贫血症患者的血红蛋白电泳结果如下图所示。由图可知携带者有　　　　　　种血红蛋白,从分子遗传学的角度做出的解释是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。? 答案:(1)生理盐水　渗透原理(当外界溶液浓度低于动物细胞内液浓度时,细胞吸水涨破) (2)除去