stat3表达与鼻咽癌细胞凋亡的关系及机制研究病理学与病理生理学专业论文.docxVIP

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stat3表达与鼻咽癌细胞凋亡的关系及机制研究病理学与病理生理学专业论文

学位论文独创性声明本人呈交的学位论文系在导师指导下所取得的研究成果。除了文 学位论文独创性声明 本人呈交的学位论文系在导师指导下所取得的研究成果。除了文 中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰 写的研究成果,也不包含为获得广东医学院或其他教育机构的学位或 证书所使用过的材料。 学位论文知识产权声明 本人在就读研究生期间所完成的学位论文及其相关成果,知识产 权归属学校。本人在毕业离校前会将有关的研究资料和结果全部上交 导师,离校后发表或使用学位论文或与该论文直接相关的学术论文或 成果时,署名单位仍然为广东医学院。学校可以将学位论文的全部或 部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复 制手段保存、汇编学位论文,可以公布(包括刊登)论文的全部或部 分内容。导师享有发表学位论文、申请成果和专利的权利。 作者签名:暨垦鱼 日期:艘 注:保密的学位论文在解密后适用本声明。 导师签名: STAT3表达与鼻咽癌细胞凋亡的关系及机制研究摘要 STAT3表达与鼻咽癌细胞凋亡的关系及机制研究 摘要 【目的】 研究STAT3及相关基因在鼻咽癌中的表达;研究STAT3信号通路阻滞剂 AG490对鼻咽癌细胞增殖和凋亡的影响及其机制;探讨EB病毒LMPl基因对鼻 咽癌细胞增殖凋亡和STAT3表达的影响。 【方法】 1.采用免疫组化SP法检测45例鼻咽癌、27例鼻咽粘膜慢性炎组织中LMPl、 STAT3、磷酸化STAT3(p-STAT3)和Survivin蛋白的表达。 2.体外培养人低分化鼻咽癌细胞系CNE2.Z、人高分化鼻咽癌细胞系CNEl及 转染了EB病毒LMPl基因的CNEl细胞——℃NEl.GL细胞,不同剂量的 STAT3抑制剂AG490作用于鼻咽癌CNE2-Z细胞。通过绘制细胞生长曲线、 平板克隆形成实验、MTT法检测细胞增殖;流式细胞术、Hoechst33342/PI 双荧光活染法检测细胞凋亡;RT-PCR、Western blot、免疫细胞化学方法检测 STAT3、Survivin和Mcl.1等基因的表达。 【结果】 1.免疫组化结果显示,鼻咽癌组织qbLMPl、STAT3、p-STAT3和Survivin蛋白的 阳性率均高于鼻咽粘膜慢性炎组织(脚.01)。相关分析结果显示,LMPI和 p-STAT3、STAT3和SuⅣiviIl、STAT3并tlp-STAT3表达之间呈正相关关系(馗分别 为0.302、0.3 18和0.328,P0.05)。 2.与CNEl细胞相比,CNEl.GL细胞生长加快,克隆形成能力增强,STAT3活 化程度增加,Survivin基因表达上调,但细胞凋亡率及Mcl.1表达无明显变 化。 3.AG490可明显抑制CNE2.Z细胞生长,使细胞克隆形成能力减弱,凋亡率增 加,STAT3活化程度降低,Survivin、Mel.1基因表达下调。 【结论】 【结论】 1.鼻咽癌中存在STAT3蛋白高表达和持续激活,STAT3可能通过调节Survifin 基因表达参与鼻咽癌的发生发展,LMPl基因可能参与STAT3的活化。 2.EB病毒LMPl基因导入可使CNEl细胞生长加快,STAT3活化程度增加, 对细胞凋亡无影响。 3.阻断STAT3信号通路可抑制CNE2.Z细胞增殖,并可能通过下调凋亡抑制基 因SurvMn、Md.1表达,使细胞凋亡增加。 【关键词】 鼻咽癌;信号传导与转录活化因子3;EBV-LMPl;凋亡;生存素;Mcl.1;AG490 2 Relationship Relationship Between STAT3 Expression and Apoptosis of NPC Cells ABSTRACT [Objective]To investigate the expression of signal transducer and activator of transcIiption 3(STAT3)in human nasopharyngeal carcinoma(NPC)tissues and cell lines.To explore the role of STAT3 signaling pathway in the regulation of apoptosis in NPC cells and to study the influence of latent membrane protein I(LMP 1)on the apoptosis ofNPC cells and the expression of STAT3. [Methods]The expression of STAT3,phoshated STAT3(p.STAT3)and Survivin

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