安徽蜜蜂病毒病的发生与流行研究农业昆虫与害虫防治专业论文.docxVIP

摘 摘 要 全球I，3的食物产量源于蜜蜂的授粉增收效益，蜜蜂在给人类带来益处的同时，其 生长发育过程中各个阶段均能遭受到蜂螨、真菌、细菌、病毒以及天敌等其他动物侵害。 近年来，蜂群数量大幅减少，研究表明蜂群丢失是多种因素共同作用的结果，而蜂螨与 各种RNA病毒病的协同侵害是导致蜜蜂健康问题高发的主要诱因之一。安徽是中国七 大养蜂大省之一，养蜂生产的组织化程度和规模化水平较高，但关于安徽省的蜜蜂健康 情况调查却尚未见系统调查，掌握了安徽省的蜜蜂健康状况，有利于蜂农及相关政府部 门进行有效应对，科学引导我省蜂产业的良好发展。本论文内容主要包含以下两部分： 一、安徽省内蜜蜂病毒病流行病学研究 本研究调查安徽省内21个乡镇的38个蜂场关于7种常见蜜蜂病毒：蜜蜂畸翅病毒 (Deformed wing virus，DWV)、以色列急性麻痹病毒(Israeli acute paralysis virus，IAPV)、 急性蜜蜂麻痹病毒(Acute bee paralysis virus，ABPV)、慢性蜜蜂麻痹病毒(Chronic bee paralysis virus，CBPV)、黑蜂王台病毒(Black queen cell virus，BQCV)、蜜蜂囊状幼虫 病病毒(Sacbrood virus，SBV)、克什米尔病毒(Kashmir bee virus，KBV)的感染发生情 况，为安徽养蜂业可持续健康发展提供理论依据。 运用反转录RT-PCR和序列分析比对的方法对安徽省内21个乡镇中的38个蜂场蜜 蜂样品进行研究分析，以获得以上7种蜜蜂病毒的特异性发生情况。研究结果如下： 1．意大利蜜蜂Apismellitbra ligustica蜂场感染率：DWV(64％)，IAPV(43％)，CBPV (32％)，ABPV(14％)，BQCV(11％)，KBV(0％)，SBV(0％)；中华蜜蜂Apis朋馏船 ccrslJB蜂场感染率：DWV(80％)，IAPV(40％)，CBPV(30％)，ABPV(10％)，BQCV(0％)， KBV(0％)，SBV(0％)。SBV和KBV在所有的蜜蜂样品中均未检测到。 2．将样品呈阳性的五种蜜蜂病毒与GeneBank比对，测序结果表明同源性均超过 95％，结果符合预期。其中，DWV登记号：JX878304．1(97％)；IAPV登记号：EU224279．1 (99％)；ABPV登记号：HQ89716I．1(98％)；BQCV臀录号：GU825962．1(95％)； CBPV登记号：KJ437447，1(97％)。 3．DWV，IAPV，CBPV，ABPV，BQCV在安徽省内大范围都存在发生流行现象， SBV和KBV对安徽蜜蜂的潜在危害可能性小。 ■、人工离体培养幼虫及DWV侵染试验 本试验旨在成功建立人工离体培养幼虫体系，为蜜蜂病毒学的室内研究提供理论基 础和研究条件。 通过试验，成功获得化蛹出房蜜蜂，建立获得了蜜蜂幼虫人工离体培养体系。试验 结果显示：人工离体培养蜜蜂与正常蜂群培育出的蜜蜂在生理指标上并无显著差异：形 态指标上前翅的肘脉指数差异显著。 III 万方数据 通过饲喂含有DWV的营养液给发育幼虫这一方式，DWV能成功侵染蜜蜂幼虫， 通过饲喂含有DWV的营养液给发育幼虫这一方式，DWV能成功侵染蜜蜂幼虫， 结果显示：DWV能导致蜜蜂羽化异常，出现畸翅现象；感染DWV病毒的蜜蜂寿命显 著低于阴性对照组，验证了之前学者的报道。 关键词：蜜蜂，病毒病，安徽，RT-PCR IV 万方数据 AbstractThis Abstract This is the first detailed report of detection of these bee viruses in Apjs mellifcra and Apis in Anhui province．It will help bee researchers and related institutions screening the present situation of honey bee health in Anhui，and warn them of the potential threat to sustainable development of apiculture． This paper includes two parts below：1．Reprots of honey bee virues in Anhui province；2，System established of honey bee larvae incubation in vitro． In this study，using transcriptase PCR a