丹酚酸a对心肌细胞离子通道以及收缩力的调控作用药理学专业论文.docxVIP

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丹酚酸a对心肌细胞离子通道以及收缩力的调控作用药理学专业论文

河北医科大学学位论文使用授权及知识产权归属承诺 河北医科大学 学位论文使用授权及知识产权归属承诺 本学位论文在导师(或指导小组)的指导下,由本人独立完成。 本学位论文研究所获得的研究成果,其知识产权归河北医科大学所 有。河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表 与学位论文主要内容相关的论文,第一署名为单位河北医科大学,试 验材料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河北医科大学所有。 否则,承担相应法律责任。 研究生签名:蒜葫嘞导师签章袭主 二级学院领导盖章: .-I; 1I,侈年弓月;矽日 河北医科大学研究生学位论文独创性声明 本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果,除了 文中特别加以标注和致谢等内容外,文中不包含其他人已经发表或撰 写的研究成果,指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写, 文责自负。 研究生签名:瘩森锄 万方数据 目 目 录 中文摘要 1 英文摘要 5 英文缩写 ..10 研究论文丹参酸A对心肌细胞离子通道以及收缩力的调控作用 前言月U吾 ..。 。11 1 材料与方法 12 结果 1 9 附图 一 ..2l 讨论 ..28 结论 3 l 参考文献 3 1 综述丹参酸A心血管保护作用的机制 .36 致谢 46 个人简历 ..47 万方数据 中文摘要丹参酸A对心肌细胞离子通道以及收缩力的调控作用 中文摘要 丹参酸A对心肌细胞离子通道以及收缩力的调控作用 摘 要 L.型钙离子通道(L.type calcium channels,LTCCs)介导并调控Can+ 进入细胞,对心肌细胞的正常生理功能有重要的意义。LTCCs主要分布 于肌纤维膜上,能够被去极化电压所激活,同时内流的Ca2+则能引起通道 失活关闭。L.型钙离子电流(L.type calcium current,ICa-L)不仅在心肌的 兴奋一收缩耦联中起着极为重要的作用,同时参与心肌动作电位的形成和 维持并与心律失常的发生有关。钙通道阻滞剂能够抑制心肌细胞Ca2+内 流,降低细胞内钙,减弱心肌收缩力,降低心肌氧耗量,在临床上可用于 高血压,冠心病,急性左心衰等病症。 慢激活延迟整流钾电流(the slowly activating delayed rectifier potassium current,IKs)和快激活延迟整流钾电流(the rapidly activating delayed rectifier potassium current,IK,)在心肌动作电位的复极化过程中发 挥重要作用。当电学重构或基因突变导致IK。和I融通道功能异常时,将引 起K+外流减少,使心肌复极减慢,动作电位延长,产生Q.T间期延长综 合征(Long QT syndrome,LQTS),表现为心电图Q.T间期延长并发生恶 性心律失常性晕厥及猝死。IK。和I心抑制剂则可能导致Q—T间期延长而引 发心律失常。 丹参(Salvia miltiorrhiza)在中国有几千年的临床应用历史,它被广 泛用于治疗高血压,冠心病,心肌梗塞,血液循环疾病和其他的心血管疾 病。越来越多的研究表明,丹参主要的水溶性成分为丹参酸A(Salvianic acidA,SAA),具有多种药理学活性,如抗炎和抗肿瘤,神经和心肌保护 作用,提高免疫力等。在前期的工作中,我们发现丹参注射液可以阻断 LTCCs,SAA作为丹参注射液主要的成分之一,可能是丹参注射液阻断 LTCCs发挥心肌保护作用的物质基础。 目的:本研究主要探讨了SAA心脏保护作用的机制。通过电生理膜 片钳技术观察S从对大鼠心室肌细胞LTCCs以及HEK293细胞上表达的 KCNQl/KCNEl、hERG通道电流的调控作用,通过IonOptix测量系统观 察SAA对大鼠心室肌细胞收缩力的影响。 万方数据 中文摘要方法: 中文摘要 方法: (1)成年大鼠心室肌细胞分离成年雄性Sprague.Dawley大鼠麻醉 后开胸取出心脏进行急性分离,心脏在Langendorff装置上用含0.02%胶 原酶II的无钙台氏液在37 oC下进行酶解消化。酶消化完毕后自左心室分 段剪取心室肌组织放入盛有Kreb’S(I④液)的试管中轻轻吹打使之分散 成单个细胞。单个心肌细胞通过200目尼龙网过滤收集,收集的心室肌细 胞在室温下静置于KB液中1小时后逐渐增加KB液中Ca2+浓度直到1.8 mlVl。而大鼠缺血性心室肌细胞则通过对大鼠尾静脉注射垂体后叶素诱导 心肌缺血10分钟后参照正常大鼠心肌细胞分离方法准备。所分离的心室 肌细胞需在分离后6小时内进行实验。全细胞膜片钳技术记录SAA对Ic孙L 及其动力学过程的影响。 (2)细胞培养HEK293细胞系在37 oC,5%C02和95%空气条件下 常规培养,并每隔1-2天进行细胞

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