桑枝化学成分及其抑制磷酸二酯酶4活性的研究药物化学专业论文.docxVIP

广州中医药大学学位论文原创性说明本人郑重声明： 广州中医药大学学位论文原创性说明 本人郑重声明： 所呈交的学位论文，是个人在导师的指导下，独立进行研究工作所取 得的成果。除文中已经特别加以注明引用的内容外，本论文不含任何其他个人或集体已经发 表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式 标明并致谢。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。 学位论文作者签名二蝴 日期：训罗年B月7日 关于学位论文使用授权的声明 本人完全了解广州中医药大学有关保留使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有 关部门机构送交论文的复印件和电子版，允许被查阅和借阅。本人授权广州中医药大学可以 将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复印 手段保存和汇编本学位论文。 (保密论文在解密后应遵守此规定) 者签础． 臌丝彳 日期： l再6月，日 桑枝化学成分及其抑割磷酸二酯酶4活性的研究摘 桑枝化学成分及其抑割磷酸二酯酶4活性的研究 摘 要 桑枝为桑科(Moraceae)桑属(Morus)落叶灌木或乔木，桑的叶、根、枝、 果实均可作为药用。桑枝性苦、平，归肝经，具有祛风湿、利关节、行水之功效， 适用于风寒湿痹、四肢拘挛、脚气浮肿之病症。现临床上主要用于治疗肩臂关节 及手足酸痛麻木、风湿痹痛、瘫痪等多种疾病。化学成分研究报道桑枝主要含多 酚类成分(包括黄酮类、二氢黄酮类、二氢黄酮醇类、查耳酮类、Diels-Alder 加合物、苯骈呋喃衍生物、二苯乙烯类及其衍生物)，其次为生物碱类、多糖类 等其他成分，其中多酚类成分也是桑枝最主要的活性成分。现代药理研究表明桑 枝具有抗炎等多种药理活性，其抗炎作用与其所含的活性成分密切相关。 磷酸二酯酶4(PDE4)是PDE酶家族的一员，主要分布于各种炎症细胞内， 可通过抑制PDE4的活性来抑制炎症细胞。因此，PDE4被认为是一种新型抗炎 靶标。本课题以PDE4抑制作用为中心，首先对桑枝95％乙醇提取物的各有机萃 取相进行了PDE4抑制活性筛选，然后针对乙酸乙酯活性部位进行化学成分研 究，旨在获取桑枝中具有PDE4抑制活性的化学成分，为从天然药物中发现PDE4 抑制剂先导化合物提供有力的科学支撑，并且进一步证实桑枝是寻找抗炎活性成 分的重要药用资源。 本研究基于PDE4抑制活性跟踪方法，综合运用多种显色剂相辅助的化学方 法结合正相硅胶、反相硅胶、凝胶、半制备高效液相等色谱分离方法，对桑枝中 具有显著抑制PDE4靶标的乙酸乙酯活性部位进行了系统的化学成分研究，从中 分离得到了16个单体化学成分；采用有机质谱、核磁共振等现代波谱学手段以 及物理常数对照等方法将化合物分别鉴定为：5，7．二羟基香豆素(5，7一dihydroxy coumarin，1)、Noratocarpanone(2)、二氢桑色素(Dihydromorin，3)、桑辛 素M(Moracin M，4)、氧化白藜芦醇(Oxyresveratrol，5)、熊果酸(Ursolic acid， 6)、桑皮酮C(Kuwanon C，7)、桑根皮素(Morusin，8)、2,4．二羟基苯甲 醛(2．4-dihydroxybenzaldehyde，9)、伞形花内酯(Umbelliferone，10)、邻苯 二甲酸二丁酯(Dibutyl phthalate，11)，桑辛素M．3’．O-fl-D．葡萄糖苷(Moracin M．3’．O-fl-D．glucopyranoside，12)，顺式氧化白藜芦醇-4．O-p-D．葡萄糖苷(c／s- oxyreseratrol-4．O-fl-D．glucopyranoside(Ramorin A，化合物13)，2’，4’．二羟基 ．7，8．(2”．异丙烯基)呋喃基．6．异戊烯基．黄酮醇【2’，4’-dihydroxy-7，8-(2”- isopropenylfuranyl)-6-prenyl-flavonol】(Ramorin B，化合物14幸)，Momigrol E (化合物15)，Momigrol F(化合物16)，其中化合物13，14为新化合物。 所得化合物包括2个香豆素类(化合物1，10)，1个三萜类化合物(化合 物6)，7个黄酮类化合物(化合物2，3，7，8，14，15，16)，2个苯骈呋喃 及其苷类化合物(化合物4、12)、2个二苯乙烯类化合物(化合物5，13)，2 个其它类(化合物9、11)。 运用【3H】标记液体闪烁计数法对其中13个化合物进行体外PDFA抑制活性测 试，药理活性测试结果显示4个酚性化合物(化合物4、7、8、16)具有显著的 PDE4抑制活性，四者的IC50分别为2．90¨M、0．381zM、1．02州和0．50州。 关键词：桑枝：化学成分；