盾壳霉cmmpk1基因在产孢和寄生中的功能验证植物病理学专业论文.docxVIP

分类号 分类号 密级 华中农业大学硕士学位论文 盾壳霉CmMPKl基因在产孢和寄生中的功能验证 FUNCTIONAL AN删SIS OF CmMPKl IN CONIDIATION AND MYCOPARASITISM OF CONIOTHYRIUM l咀NI’I：ANS 硕士研究生：郜丽霞 学 号：2012301110166 指导教师：付艳苹教授 指导小组：付艳苹教授 姜道宏教授 程家森副教授 谢甲涛副教授 陈桃讲师 专业植物病理学 研究方向：分子植物病理学 获得学位名称：农学硕士 获得学位时间：2015年6月 华中农业大学植物科学技术学院 二。一五年六月 万方数据 华中农业大学学位论文独创性声明及使用授权书学位论文 华中农业大学学位论文独创性声明及使用授权书 学位论文 如需保密，解密时间 年 月 [j 独创性声明 』嘲 是否保密 彳’’ b-,／ 本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的砺究2r_作及取得的研究成 果。尽我所知．除了文孛特另l加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他入已经发 表或撰写过的磅究成果，也不包含为获得：{阜中农业大学或其他教育机构的学位或证书 而使用过的材料，指导教师对此进行了审定。与我一丽S-作的同志对本研究所傲的任 何贡献均已在论文中做了明确的说明，并表示了谢意。 研究生签名：j玉俺晶锄 时阍：02一·皇年易月，，譬 学位论文使用授权书 本人完全了解华中农韭大学关予保存．使属学位论文的规定，即学生必须按照学 校要求提交学位论文盼印剧本和电子版本：学校有权保存提交论文的印捌版和电子版， 并提供目录检索和阅甍服务，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存．汇编学位 论文。本人陵意华中农监大学可以用不同方式在不同媒体土发表、传播学位论文的全 部或部分内容，为存在馆际畲作关系的兄弟高校周户提供文献传递和交换服务，同时 本人保留在其他媒体发表论文的权力。 注：保密学位论文(印涉及技术秘密、商业秘密或申请专利等潜在需要提交保密的论 文)在解密后适用于本授权书。 学位论文作糙名：‰施翩懿：(峙事斟 l 签名星期：0移?岁年g月 ，，呈 签名目期：知。y 年‘月 7／日 注：请将本表直接装订在学位沦丈的扉页和目录之阔 万方数据 CmMPKI基因在盾壳霉产孢和寄生中的功能验证目 CmMPKI基因在盾壳霉产孢和寄生中的功能验证 目 录 摘要 ．i ABSTRACT ． ． ． ． ． ．ii 缩略词表 一iv 第一章前 言 。l 1．1死体营养型病原真菌核盘菌的研究进展 ．1 1．1．1核盘菌所致病害危害作物类型及经济价值 1 1．1．2核盘菌所致病害的防治措施 1 1．2核盘菌生防真菌盾壳霉的研究进展 ．3 1．2．1盾壳霉在不同环境因子下的适应性 4 1．2．2盾壳霉的生防机制以及前景分析 5 1．2．3盾壳霉基因功能研究进展 6 1．3不同物种中的MAPK途径 一7 1．3．1动物细胞中的MAPK途径 一7 1．3．2植物细胞中的MAPK途径 8 1．3．3真菌中的MAPK途径 9 第二章盾壳霉CmMPKl突变体生物学功能研究 ．1l 2．1材料与方法 11 2．1．1供试菌株 ．11 2．1．2试剂及仪器 ．12 2．1．3试验方法 一13 2．2结果与分析 2l 2．2．1 CmMPKl基因全长克隆分析 ．2l 2．2．2 CmMPKl基因进化分析 ．22 2．2．3 CmMPKl基因表达动态分析 ．23 2．2．4 CmMPKl敲除转化子和互补转化子的验证 ．24 2．2．5 CmMPKl突变体菌落形态 ．26 2．2．6 CmMPKl突变体抗生物质产生无变化 ．27 万方数据 华中农业大学2015届硕士研究生学位论文2．2．7 华中农业大学2015届硕士研究生学位论文 2．2．7 CmMPKl影响盾壳霉寄生菌核能力 ．28 2．2．8 CmMPKl敲除转化子耐受Ca2+环境 ．29 2．2．9 CmMPKl敲除转化子中ROS升高 3 l 2．2．10 CmMPKl突变体对细胞壁合成抑制剂不敏感 32 2．2．11 CmMPKl突变体对药剂多菌灵敏感 33 2．3总结与讨论 33 第三章CmMPKl与CmNOXl、CmHOGl等蛋白互作分析 37 3．1材料与方法 37 3．1．1供试菌株 37 3．1．2试剂及仪器 37 3．1．3试验方法 38 3．2结果与分析 39 3．2．1 CmNOXl、CmHOGl和C机趾乃等基因在突变体中表达下调 ．39 3．2．2构建酵母双杂交载体 ．39 3．2．3 CmMPKl与CmNOXl、CmHOGl和CmSLT2等不直接互作 ．40 3-3结论与讨论 4l 第四章结论与展望 43 参考文献 ．．46 附录 ．57 致{射 ．59 2 万方数据