蟾蜍二烯羟酸内酯类物质对her2过表达乳腺癌细胞的作用生物化学与分子生物学专业论文.docxVIP

大连医科大学硕士学位论文中图分类号 大连医科大学硕士学位论文 中图分类号 密级 蟾蜍二烯羟酸内酯类物质对HER2过表达乳腺癌细胞的作用 The Effects of Bufadienolides on HER2 overexpressing breast cancer cells 王天娇 计：学位论文：42页 表 格：7个 插 图：8幅 指导教师：袁予辉教授 申请学位级别：硕士学位 学科(专业)：生物化学与分子生物学 培养单位：大连医科大学研究生院 完成时间：二。一六年三月 答辩委员会主席： 万方数据 大连医科大学硕士学位论文独创性声明 大连医科大学硕士学位论文 独创性声明 本人郑重声明：所呈交的学位论文是本人在指导教师指导下进行的研 究工作及所取得的研究成果。除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论 文中不包含其他人己经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得大连医 科大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同 志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。 学位论文作者签名：二啤 签字日期：‘丝年—L月』L日 万方数据 大连医科大学硕士学位论文关于学位论文使用授权的说明 大连医科大学硕士学位论文 关于学位论文使用授权的说明 本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保 留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。 本人授权大连医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行 检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。 本学位论文属于(请在以下相应方框内打“√”)： 1．保密口，在年解密后适用本授权书。 2．不保密口。 作者签名： 日期：洲年-!=-FJ∥日 导师签名： 日期：20／g年，月哆日 万方数据 大连医科大学硕士学位论文目 大连医科大学硕士学位论文 目 录 一、摘要 1 (一)中文摘要 1 (--)英文摘要 3 二、正文 5 (一)前言(一)胃U舌 6 (--)材料和方法 8 1．材料 ．8 1．1细胞系及细胞培养相关试剂 8 1．2实验相关试剂盒 8 1．3 药品 ．8 1．4抗体 ． 8 1．5有机试剂与无机试剂 9 1．6配制试剂 9 1．7仪器与耗材 ．10 2．实验方法 1 1 2．1 细胞培养 ．1 1 2．2 MTT实验 12 2．3克隆形成实验 ．12 2．4蛋白质样品制备 ．13 万方数据 大连医科大学硕士学位论文2．5 大连医科大学硕士学位论文 2．5 SDS．PAGE电泳 13 2．6细胞划痕实验 ．14 2．7流式细胞术检测细胞周期 ．14 3．数据统计分析 14 (三)结果 ．．16 (四)讨论 22 (五)结论 25 (六)参考文献 26 三、综述 ．32 (一)综述 32 (二)参考文献 ．36 四、攻读学位期间发表文章情况 41 五、致谢 42 6 万方数据 大连医科大学硕士学位论文 大连医科大学硕士学位论文 蟾蜍二烯羟酸内酯类物质对HER2过表达乳腺癌细胞的作用 摘 要 目的：人类表皮生长因子受体2(Human epidermal growth factor receptor 2，HER2)是一 个在乳腺癌中频繁过表达的原癌基因，是人类表皮生长因子受体家族的成员，HER2阳 性乳腺肿瘤具有快速增长，高侵袭性，早期转移以及频繁的中枢神经系统转移，患者接 受治疗后效果相对较差等特点。典型的治疗方法是通过抑制HER2信号通路联合化学疗 法，约半数的HER2阳性肿瘤都伴随雌激素受体(estrogen receptor，ER)的表达，因此 治疗方案也包括激素疗法，其中最常用的药物为ER拮抗剂他莫昔芬(tamoxifen，TAM)。 膜受体HER2的酪氨酸激酶活性被激活后可导致下游一系列信号通路的活化，其中包括 丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路和磷脂酰肌醇．3激酶(P13K)／蛋白激酶B(AKT) ／哺乳动物雷帕霉素靶点(mTOR)通路。激活的下游通路又进一步修饰和磷酸化转录因 子和其他转录及细胞周期相关组件，这些过程使得这些通路对基因表达进行调节，并能 提高肿瘤细胞增殖和存活能力，增强转移和血管生成能力。曲妥珠单抗是临床上针对 HER2过表达乳腺癌进行治疗的典型药物，该药属于人工化的HER2单克隆抗体，通过 与HER2胞外结构域结合而阻止HER2二聚化活化。该药在早期应用时有显著作用，但 大部分病人会快速产生耐药性。HER2与ER在下游通路中的相互作用对乳腺癌治疗有 重要影响，临床前试验和新辅助疗法试验表明在ER可以作为防御机制绕开HER2受抑 制产生的影响，例如拉帕替尼靶向治疗HER2时会引起过多细胞存活相关通路的恢复， 其中包括雌激素受体ER，推测可能是通过持久的P13