泛耐药肺炎克雷伯菌株的耐药机制与播散特点研究临床检验诊断学专业论文.docxVIP

硕 硕 士 学 位 论 文 目 的 : 调 查 上 海 华 山 医 院2 0 0 6 年 8 月 一 2 0 0 9年 12 月 泛 耐 药 KP n 菌 株 的 分 离 率 ， 以 及 耐 药 菌 株 的 耐 药 表 型 ，为 临 床 合 理 应 用 抗 生 素 提 供 依 据 。同 时 从 分 子 水 平 上 研 究 耐 药 株 的 耐 药 基 因 ， 为 同 种 耐 药 基 因 型 别 菌 株 的 分 子 流 行 学 研 究 提 供 参 考 依 据 。 方 法 :收 集 上 海 华 山 医 院2 00 6 年 8 月 一2 0 09 年 12 月 共 57 株 泛 耐 药 仰 n 菌 株 ， 按 照 美 国 临 床 和 实 验 室 标 准 协 会 (C lin ieal an d L ab orato 叮 S tan dard s In stitute ，e L s l)推 荐 的 K 一B 纸 片 扩 散 法 和 微 量 肉 汤 稀 释 法 对 收 集 到 的 57 株 P D R KP n检 测 其 对 C L SI推 荐 的 2 1种 抗 菌 药 物 的 敏 感 性 ，根 据 C L S IZO 10 年 版 的 标 准 判 断 结 果 。采 用 E S B Ls 初 筛 试 验 和 表 型 确 证 试 验 检 测 菌 株 是 否 产 超 广 谱 p 一内酞 胺 酶 。采 用 改 良H od ge 试 验 检 测 菌 株 是 否 产 碳 氢 霉 烯 酶 。采 用 等 电 聚 焦 电泳 检 测 菌 株 产 p一内 酞 胺 酶 情 况 。采 用 P C R 及 测 序 方 法 检 测 p一内 酸 胺 酶 耐 药 基 因 (bla c T x 一M 一、 blaT E M 一、 blas H v 一、 b laKP C 一、b laV IM 一、blaIM P 一和 bldN D M 一l一) 、 哇 诺 酮 耐 药 基 因 (仔nrA 、叮nrB 和 卯 沼 ) 、氨 基 糖 普 类 耐 药 基 因 aae(6 ’)一Ib和 质 粒 介 导 的A m p e 酶 (M o x 、e IT 、D H A 、 A C C 、 E B C 和 F O X ) 。 结 果 : 药 敏 结 果 显 示 所 有 菌 株 对 检 测 的 全 部 抗 生 素 高 度 耐 药 ， 并 与 文 献 “p alir esistan ce in V IM 小 pro du ein g Kl ebsiella 尸n eum o n ia e”表 现 出 相 似 的 耐 药 表 型 ，所 以 57 个 菌 株 都 认 为 是 泛 耐 药 KP n 菌 株 。E S B Ls 筛 选 试 验 和 表 型 确 证 试 验 结 果 表 明 所 有 57 株 菌 株 都 产 E S B Ls 。 改 良 H od ge 试 验 显 示 所 有 菌 株 都 产 碳 青 霉 烯 酶 。等 电聚 焦 电泳 (lE F ) 显 示 所 有 菌 株 均 产 4 种 p 一内 酞 胺 酶 ，等 电 点 PI 分 别 为 5 .4 ，6 .7 ，7 .9 ，8 .2 。 b la C T X 一M 一、 b laT E M 一、 b laS H V 一 、 b laKP C 一、仔n rB 一和 aac 阿少乃一cr一特 异 性 引 物 的 P C R 结 果 是 阳 性 的 。P C R 产 物 测 序 结 果 表 明 所 有 的 菌 株 都 携 带 有 b laT E M 一1， b laC T X 一M 一14 ， blaS H V 一12 ， blaKP C 一2 ， 叮n rB 和 aa c必失乃一cr 。20 株 菌 株 含 有 D H A 型 质 粒 介 导 的 A m p C 酶 。只 有 两 株 细 菌 含 有 b laV IM ， 经 测 序 为 blaV IM 一1 。 . 讨 论 : 近 年 来 ，KP n 已成 为 医 院 感 染 和 免 疫 缺 陷 者 感 染 的 重 要 机 会 致 病 菌 ， 该 菌 在 免 疫 力 低 下 或 接 受 有 创 性 诊 疗 的 患 者 中可 引 起 肺 炎 、败 血 症 、尿 道 或 腹 腔 内 感 染 。 由 于 广 谱 抗 生 素 的 不 断 使 用 ，勒 n 的 耐 药 谱 也 随 之 扩 大 。 因 此 ，KP n 对 抗 菌 药 物 的 耐 药 性 和 临 床 治 疗 问 题 引 起 了 全 球 极 大 的 重 视 。我 院 的 耐 药 的 情 况 也 极 其 严 重 ， 自 2 00 6 年 我 院 发 现 了第 一 株 泛 耐 药 助