杭州地区临床及环境来源副溶血弧菌的毒力基因特征和分子分型-流行病学专业论文.docxVIP

杭州地区临床及环境来源副溶血弧菌的 杭州地区临床及环境来源副溶血弧菌的 毒力基因特征和分子分型 浙江大学医学院 流行病学 2000级在职硕士研究生 张 蔚 导 师 陈坤教授 摘 要 副溶血弧菌是一种嗜盐的革兰氏阴性致病菌，常存在于近海海水、海产品及盐渍食品中 是我国沿海地区夏、秋季食物中毒和急性腹泻的主要病原菌。近年的副溶血弧菌分子流行病 学研究表明，一种新的tdh阳性、trh阴性的03：K6群副溶血弧菌菌株引起了包括亚洲、美洲 等多个国家在内的大流行。另一方面，在环境中分离的副溶血菌株大部分对人不致病，临床 和环境来源的菌株的关系正在深入地研究。 杭州地处我国东南沿海，副溶血弧菌引起的食物中毒最为常见；了解临床和环境来源分 离菌株所携带毒力基因特征、血清型及其分子特征，对腹泻病及食物中毒事件的预防和控制 有重要意义。本文对2000年和2001年从食物中毒病人、临床散发病人和外环境(小水产品) 中分离的副溶血弧菌菌株，进行血清学分型，应用PCR技术进行耐热直接溶血素基因(胁)和 耐热直接溶血素相关基因(f，彬的检测，并对分离的03：K6血清型菌株进行核糖分型 (Ribotyping)、随机放大多态性DNA 3)dO：i：(random amplified polymorphic DNA analysis，RAPD)、 肠道细菌重复基因间共同序列PCR(enterobactefial repetitive intergenic cons∞sus PCR．ERIC ．3-- 一PCR)罄，以了解其分子特蔹。 一PCR)罄，以了解其分子特蔹。 结暴发璇，漆霖采源的戮辫盘弧藩(94棒张爨食物中毒藕A藕3《椿采鑫敖敏羧浮瘸天) 藏拣的tdh携带率均太子97％、trh携带察为0％；甄赝骞46栋分离囊巧城《小承产)的剿溶巍 疆莲蘸株泰燕霄tdh携帮，莰l攘妇粥嫂。1拣tdh瓣挂、鼬瓣瞧静裂漆愈蕤撩，冀疆素酶 试验为刚性，褥在冀他所有鼢阴性的副溶血藤株中。不管其tdh趋阳性戏是阴性，稼索酶试 簸坶为丽瞧。表明$|超桩辩撼嚣食秘中簿及散发羧泻懿剩溶盎弧落主要为tdh阳憔、触瓣瞧 蘸探，外环境中存寂静柏鞠性豹副溶盘弧蔼瞧照一巾港巍麴病原。 撬髑}瓣黎秘嚣麓来添副海巍弧蘩蘸拣鼓盘溃型蓥悫衰麓，菠糅纛瀵蘩袁食穆串毒病人、 散发腹泻璃人和小水产品中分布最著蒺剐。tdh阳性、蝴阴性盼03：K6胀清型副游血弧菌S 越豹禽镑孛毒#鼙本次调豢囊奄13趣事传中鹣t l起，为84．6％：勇二越蔫tdh鞠性、触黼毪酶 04：Kg萤栋，11i t5．4％；来见其他血演型。在教教骏泻瘸入中，03：K6、04：K8帮01：K?藏 挺势剐}I 26，s％、17，7％和38；2％。露隶产箍分离鳃萤糖孛，纛薅囊努毒黧，“，毽泰觅03：K6 糊04：K8m清型。食物中毒病人和散发艘泻瘸人分离的03：K6菌棵在Ribotyping、ERIC-- PCR赦RAPD三静指绞上曼霹均j|嚣予一j雕l密琵籀麓的纛隆群，辩群辘分离瓣03：K?蒲株与 豁寐分离静03：K6麓摭闻，在兰者拯绞上均鸯投驻蔫美异。结果提豕一群关系密切弱、托融 翔瞧、璐隧瞧懿03：K6盎瀵型蓑撩，搓较热谯努流抒。 小结：邋进本文研究，对杭州食物中毒瘸^、}瞄床散发病人靴外环燧(小水产黯)巾分离 静副潞盘强鍪蕤株豹携鬻毒力基闲特籍、搬涛麓投箕分子特疑，鸯了一定的了解。 【关键键】戮灞盎辍釜；蜜穆中毒{繇凌；蠡涛型；纛|熬．毫疆潜盘紊；辩熬壹接簿血素 橱关游斑素；核糖分型；随机放太多态性DNA分}斥；肠遒纲萤麓复基因间共同序剃PCR -d一一 Vilulence Vilulence Characteristics and Molecular Typing of Vibrio parahaemotyticus Strains Isolated from Clinical Patients and Environment in Hangzhou，China Department of Epidemiology,School of Medicine，Zhejiang University Graduate student：Zhang Wei Supervisor：Chen Kun ABSTRACT Vibrioparahaemolyticus，frequently found in marine water and seafoods，is a gram．negative halophilica bacterium and a major pathogen associated with food poisoning and gastroenteritis in coastal region ofChina，Recen