汉族人维生素d受体基因多态性与退变性腰椎间盘病的相关性研究-外科学(骨外科)专业论文.docxVIP

汉族人维生素D受体基闻多态性与退变‘H-fI要椎间盘痛的相关性研究导师：黄东生敦授硕士生：陈为坚(PCR--RFLP)法，我们按PCR--RFLP法测定部分标本后发现其精确性较差。于 汉族人维生素D受体基闻多态性与退变‘H-fI要椎间盘痛的相关性研究导师：黄东生敦授硕士生：陈为坚 (PCR--RFLP)法，我们按PCR--RFLP法测定部分标本后发现其精确性较差。于 是将半定量PCR方法应用到PCR—RFLP测定法中，用于测定VDR基因型，结果 显示其精确性和可重复性得到明显提高。 我们用半定量PCR--RFLP法测定VDR受体基因多个位点的多态性。结合这 些标本所对应的LDDDI[缶床症状和MRI，分析VDR基因多态性与LDDD的关系。 发现在VDR基因的FokI、Bsml、Apal、Trul*tlTaqI 5个限制性内切酶位点多态性 中，TapI酶切位点多态性与LDDD十H关。 第一部分：半定量PCR--RFLP酶切法的建立及 VDR基因多态性测定方法探讨 目的： 探讨将半定量聚合酶链反应(PCR)方法，应用于PCR—RFLP酶切法中对 提高基因多杰性测定精确性和可重复性的作用；用此方法检测维生素D受体 (VDR)基因多态性。 方法： 收集81例健康汉族人外周静脉血标本，从血标本中提取基因组DNA，依照 常规方法取不同酶量用限制性片段多态性(RFLP)酶切法先后测定8l{Pll汉族人 维生素D受体(VDR)基因Bsml酶切位点多态性；对PCR产物进行半定量和分类 后，调整酶切体系中产物浓度，先后用不同酶量测定此组汉族人VDR BsmI、Trul 多态性，考察其一致性。 结果： 1．PCR--RFLP*口半定量PcR—RFLP法测定81例汉族人VDR基因BsmI酶切 位点多态性，先后两次测定Il々Kappa值为O．71*n0．87，差别有统计学意义，P0．叭。 2．测得汉族人的VDR Bsml位点基因型频率为BB 6．2％，Bb 49 4，bb 44 4％； VDRTruI基因型频率为T‘T’69．1％，T—t 25．9％，tt’4．9％。 中山大学硕士研究生 中山大学硕士研究生 汉族人维生素D受体基因多态性与退变性胆椎问盘病的相关性研究 结论： 1．应用半定量PCR方法可明显提高PCR--RFLP酶切法的精确性和可重复 性。 2．汉族人VDR基因存在TruI多态性，其多态性分布与白种人群不同。 第二部分：汉族人VDR基因多态性与退变性腰椎问盘病的关系 目的： 应用半定量聚合酶链反应邛艮制性片段长度多态性(PCR—RFLP)法测定汉族 人维生素D受体(VDR)基因多态性；结合退变性腰椎间盘病(LDDD)的临床 和MRJ表现探讨VDR基因多态性与LDDD的关系。 方法： 收集汉族人群中81例有LDDD症状的患者和101例对照者的外周静脉血标本 以及M砌。病例组中男41例，女40例，年龄(42．7±13．7)岁，对照组中男40例， 女6l例，年龄为(38．4±12．6)岁。提取标本的基因组DNA，用半定量PCR--RFLP 法测定对照组和病例组标本的VDR FokI、Apal、TaqI、BsmI和TruI酶切位点多态 性；根据MRJ显示的信号差异按Schneiderman分级法确定各个体腰椎间盘的退变 程度，分为无LDDD、轻度LDDD、中度LDDD与重度LDDD四组。分析病例一对 照组中基因型、等位基因频率分布规律：分析基因型分布、等位基因频率与腰椎 间盘退变MRj分级的关系； 结果： 1．对照组@FokI、BsmI、ApaI、TruI(用T’、t’表示)平[]Taql位点的等位基 因频率的分布为F 59．4％，f40．6％；B 31．1％，b 68．8％；A 34．7％，a65．3％；T’79．2％， t’20．8％：T 92．1％，t 7．9％。病例组中VDR Fokl、VDR BsmI、VDRApaI、VDR 1hI和TaqI酶切位点的等位基因频率的分布为：F 53．7％，f 46．3％；B 37．O％，b 63．O％：A 28．4％，a71．6％；T’80．9％，t：19．1％：T 98．8％，t 1．2％。病例组中 ¨l 汉族人维生素D受体基因多态性与退变性腰椎间盘病的相关性研究导师：黄东生教授砸十生：陈为坚VDR 汉族人维生素D受体基因多态性与退变性腰椎间盘病的相关性研究导师：黄东生教授砸十生：陈为坚 VDR TaqI等位基因T携带者明显多于对照组。差别有统计学意义。 2．在MRl分组中，VDR TaqI基因TT型在重度LDDDff3分布比中度LDDD、 轻度LDDD}D无LDDD高，差异有统计学意义(P0．05)，而VDR FokI、Bsml、 ApaI、Trul位点的基因型分布差异无统计学意义(P0．