健脾祛痰化瘀法对氧化型低密度脂蛋白诱导内皮细胞凋亡的影响-中西医结合基础专业论文.docxVIP

摘 摘 要 1980年Furchgott和Zawadaki发现T1fit管内皮细胞(endothelial cell，EC)释放内皮 依赖性舒张因子，对EC功能的研究逐渐成为心血管领域的热点。多年的研究证实， 内皮功能障碍(endothelial dysfunction，ED)是多种疾病之源，冠状动脉疾病的发生 发展与ED密切相关，逆转失调的内皮功能是心血管疾病防治的新趋势。研究显示 As的备个阶段均伴有ED，且许多冠状动脉事件的发生并非与冠状动脉机械性狭窄的 程度相关，而与冠状动脉ED密切相关。内皮功能在冠状动脉疾病中的重要性越来越 为人瞩H。AS是一个复杂的病理过程，血管内皮细胞损伤是其发生的始动环节，脂 质过氧化足细胞损伤的重要机制。目前认为，内皮细胞损伤在AS等疾病过程中起着 晕要作用，近年来的文献报道，内皮细胞损伤除以“坏死”形式出现外，更重要的是 可发／}i凋广。倪护内皮细胞是预防和治疗AS的关键措施之一。 术研究从健脾祛痰化瘀方药(沥水调脂胶囊)抑制氧化LDL诱导内皮细胞凋亡及其 部分机制方面，阐示脂质过氧化是痰瘀相关的中心环节，内皮细胞损伤是由痰致瘀的 主要病理特征等理论假说，为痰瘀互结证这一诸多疾病共同的病理基础的治法提供理 论依据，即防止痰浊(脂质)的质变(过氧化作用)比其量变(单纯降脂)更具实际 意义，对此类疾病l|盎i床治疗不仅要痰瘀同治，更要注重治气，即在辨证的基础上施以 理气行气、益气等相应治法。 理论研究 1． 导师宋剑南研究员十余年痰及痰瘀相关的研究成果及提出的理论假说。 2．探讨内皮细胞损伤及功能障碍、脂质过氧化作用在高脂血症及动脉粥样硬化 发病巾的作用，同时结合巾医对此的认识，阐示脂质过氧化是痰瘀相关的巾心环节， 内皮细胞损伤是由痰致瘀的主要病理特征等理论假说。 3．健脾祛痰化瘀足动脉粥样硬化的重要治法。注意防止痰浊(脂质)的质变(过 氧化作用)在抗动脉粥样硬化形成中可能比其量变(单纯降脂)更具实际意义。抗氧 化(修饰)作用是抑制减缓由痰致瘀的重要手段。对其他如糖尿病、肿瘤、老年痴呆、 炎症等痰瘀相关疾病的治疗也具有普遍意义。因此，对此类疾病的临床治疗在痰瘀同 治的同时，应在辨证的基础}：施以理气行气、益气等相应治法。实验研究 治的同时，应在辨证的基础}：施以理气行气、益气等相应治法。 实验研究 实验 OX．LDL诱导人脐静脉内皮细胞凋I二：= 1．同步化处理的人脐静脉内皮细胞与100 u g／mI、1 50 u g,／ml及200 u g／ml OX．LDL温育24h，应用流式细胞术(FCA)、Hoechst 33342染色法及DNA电泳(DNA Ladder)检测，可以清楚地观察到OX—LDL可致内皮细胞凋亡。建立了OX．LDL诱导 内皮细胞凋亡的模型，探讨OX．LDL对内皮细胞的损伤机制。研究认为，高脂血症时 机体，1：成的OX．LDL可以损伤『f『|管内皮细胞，并成为高脂血症引发AS的始动因素， 而OX—LDL诱发内皮细胞凋亡是其损伤内皮细胞的作用之一。 2木研究表明OX—LDL能诱导培养的人脐静脉内皮细胞凋亡，而在相同剂晕及作 用时问的条件下，N—LDL并未引起内皮细胞凋亡。说明脂质过氧化损伤是诱导内皮细 胞凋广：的主要阗素之。 实验二沥水调脂胶囊对OX—LDL诱导EC凋亡的影响 在实验一的基础卜观察了沥水调脂胶囊对OX．LDL诱导人脐静脉内皮细胞凋亡的 作用。结果表明，沥水调脂胶囊对OX．LDL诱导内皮细胞凋亡有一。定的抑制作用。通 过对细胞周期的分析发现，沥水调脂胶囊对Gl／S期有影响，与其抑制细胞凋亡作用 的关系尚待进 步探讨。 实验三沥水调脂胶囊抑制OX—LDL诱导EC凋亡的部分机制研究 细胞凋亡具有复杂的分子调控机制，多种基因参与凋亡的发生。目前，在细胞凋 产的信号调节中被认为有三个关键的调控关蒂：半胱天冬酶家族，Bel．2基因家族及 残稳体。这些分子的相互作用对于共同的凋亡调控执行通路有着极其重要的影响。 平胱天冬酶家族目前被认为是与凋亡最为密切相关的一类蛋白酶，凋亡的大多数 形态变化足凋亡细胞中的半胱天冬酶特异性活化的结果，在决定细胞凋亡的生化事件 巾起关键作用。细胞凋亡是由各种信号诱导的一系列反应，半胱天冬酶是介导这些信 号转旨和实现细胞凋亡的关键性物质，是引起细胞凋亡的直接效应物。其能特异地水 解底物蛋白，引起染色体凝聚，最终导致细胞凋亡。其中凋亡的效应分子Caspase-3 有促进凋亡{乍用。Bcl．2基闲家族是蠲产研究中最受蘸褫静癌菸霹，楚调节细稳猗产的关键元释。萁 有促进凋亡{乍用。 Bcl．2基闲家族是蠲产研究中最受蘸褫静癌菸霹，楚调节细稳猗产的关键元释。萁 成员分为两类：一类熊促进细Jj6i的凋亡，有Bax、BcL，xs、Bad、Bak； 类能