细胞与分子生物学实验-实验室常见仪器设备.ppt

DIC利用的是偏振光，DIC棱镜可将一束光分解成偏振方向不同的两束光（x和y），二者成一小夹角。可使标本的细微结构呈现出正或负的投影形象，通常是一侧亮，而另一侧暗，这便造成了标本的人为三维立体感，类似大理石上的浮雕。 下村修首次从发光水母中分离出GFP。他发现该蛋白在紫外线下会发出明亮的绿光。 马丁证明了GFP作为多种生物学现象的发光遗传标记的价值。 钱永健的主要贡献在于让人们理解了GFP发出荧光的机制。 今日，一般电镜分辨率已达1纳米，能将物体放大200万倍，细胞、细胞里的膜、膜上的分子世界豁然开朗；如果再让电子疯狂加速，加上软件的帮忙，不到1埃（=0.1纳米）的原子也能分辨清楚 电子显微镜是根据电子光学原理，用电子束和电子透镜代替光束和光学透镜，使物质的细微结构在非常高的放大倍数下成像的仪器。 细胞与细胞间或细胞与细胞外基质的联结结构称为细胞连接。 中性粒细胞透射电镜图，图中所示为典型的中性粒细胞分叶核和细胞质中不同的颗粒溶酶体。 细胞线粒体。 来测量通过有色溶液后透射光的强度，从而求出被测物质含量的方法叫做光电比色法。基于此而设计的仪器叫做光电比色计。 离子交换树脂是带有官能团（有交换离子的活性基团）、具有网状结构、不溶性的高分子化合物 DNA是遗传信息的载体,也许是人们最熟知的分子生物学法则， 然而这一法则的发现及被人们普遍接受，却相当曲折不易。 在遗传物质的探索过程中，生物学家是如何证明DNA是遗传物质的呢? 要回答这个问题，按照我们现在的科学技术条件当然很容易，要是把大家放在二三十年代来回答这个问题，恐怕没那么简单。 在当时，蛋白质的发现比核酸早30年，发展迅速。进人20世纪时，组成蛋白质的20种氨基酸中已有12种被发现，到1940年则全部被发现。 当时认为遗传物质是蛋白质，因为蛋白质分子量大，结构复杂，20种氨基酸的排列组合将是个天文数字，可作为一种遗传信息。 而DNA分子量小，只含有4种不同的碱基，人们一度认为不同种的有机体的核酸只有微小的差别。 从核酸的发现到 DNA 双螺旋结构模型建立历时 80 余年，人类最终确认了 DNA 是生命的遗传物质，解决了一个生命科学研究中极其关键的重大问题。 1868年瑞士青年科学家米歇尔以外科诊所里被人抛弃的手术绷带上的脓细胞为研究材料，从其细胞核中提取出一种含磷量很高的酸性化合物，根据此种化合物对胃蛋白酶的耐受性及其溶解度性质，米歇尔判断它是一种新的细胞成分，将其命名为“核素”。 20世纪初，德国科赛尔和他的两个学生琼斯和列文的研究，弄清了核酸的基本化学结构，认为它是由许多核苷酸组成的大分子。核苷酸是由碱基、核糖和磷酸构成的。 1928年格里菲斯用一种有荚膜、毒性强的和一种无荚膜、毒性弱的肺炎双球菌对老鼠做实验。发现有一种 物质能把无荚菌转变成有荚菌，称称之为转化因子。 1944年艾弗里通过排除法来寻找转化因子，最后确定转化因子就是DNA。但这个发现没有得到广泛的承认，人们怀疑当时的技术不能除净蛋白质，残留的蛋白质起到转化的作用。 1952年赫尔希和他的学生蔡斯用同位素标记技术，做噬菌体侵染大肠杆菌的实验。这个实验证明DNA有传递遗传信息的功能，而蛋白质则是由DNA的指令合成的。这一结果立即为学术界所接受。 20世纪初期，人们还没有发现抗生素，每年肺炎双球菌导致的肺炎都要夺去几千条的生命。 * 1928年，英国细菌学家格里菲思想研制出能够抗肺炎双球菌的疫苗。当时，他选择了2种肺炎双球菌，带有荚膜可以引起肺炎甚至致人死亡的S型菌和没有荚膜、没有毒性的R型菌。 为了判断S型菌的毒性是不是由荚膜引起的，格里菲思进行了3组实验并取得了预期的结果：注射了S型活菌的小鼠死亡；注射了R型活菌的小鼠存活下来；注射了低热杀死的S型菌的小鼠也存活下来。 按照预先的设计，实验可以到此结束了，但或许是一时兴起，也或许是灵感突发，格里菲思又顺手做了一组实验—将低热杀死的S型菌和R型活菌混合注射到小白鼠体内。这应该是一个毫无悬念的实验，但结果却让格里菲思大吃一惊——小鼠死亡了。检查死鼠血样，发现其体内竟然存在S型活菌。死菌并没有复活，那么只能是R型活菌变成了S型活菌。 * 麦卡蒂通过实验发现，简单地在体外培养R型肺炎球菌，然后向器皿中加入加热致死的S型菌，也能促成R型向S型菌的遗传转化现象的发生。这一实验暗示人们，细胞中的某种物质的转移导致了遗传转化现象。这种 物质究竟为何物，当时还不为人所知。因此，艾弗里通过排除法来寻找转化因子，通过加入特定的消化酶去除某类物质，观察转化现象能否正常发生。 但这个发现没有得到广泛的承认，人们怀疑当时的技术不能除净蛋白质，残留的蛋白质起到转化的作用。 3? 5? 3? 5? 解链方向 3′ 5′ 3′ 3′ 5′ 领头链 (leading strand)