间皮素在卵巢癌诊断、病情监测、基因治疗中的价值及对卵巢癌细胞周期和失巢凋亡的影响机制研究-外科学专业论文.docxVIP

目 目 录 摘要 l 摘要 ．．11 缩写 ．．22 论文 间皮素在卵巢癌诊断、病情监测、基因治疗中的价值及对卵巢 癌细胞周期和失巢凋亡的影响机制研究 引言弓l吾 ． ．．24． 24 第一部分血清SMRP在上皮性卵巢癌诊断和病情监测中的价值 前言日IJ百 ．．26．．26 材料与方法 ．．27 结果多口7K ．．3U“．．j 附图 ．．34 附表 ．．36 讨论 ．．37 小结 ． ．39 参考文献 ．．40 第二部分间皮素对卵巢癌细胞增殖和细胞周期的影响及其机制研究 前言月lJ舌 ． ． ．。4—4‘．． 材料与方法 。45 结果 ．．54 附图 ．．56 附表 ．．60 讨{念 ．． 62 小结 ．． 64 参考文献 ．．64 第三部分 间皮素对卵巢癌细胞失巢凋亡的影响及其机制研究 前言fjU舌 ． ．．．67 材料与方法 ．．68 结果 ．．70 附图 ．．72 讨{仑 讨{仑 ．．74 小结 ．．75 参考文献 ．．76 第四部分 间皮素在卵巢癌裸鼠腹腔移植瘤基因治疗中的价值及机制探 讨 前言刖吾 ．．‘78．．78 材料与方法 ．．78 结果 ．．82 附图 ．．85 附表 ．．88 讨{仑 ．．89 小结 ．．90 参考文献 ．．91 结j沧 ．．93 综述 ．．94 致谢 107 个人简历 108 中文摘要间皮素在卵巢癌诊断、病情监测、基因治疗中的价值及对 中文摘要 间皮素在卵巢癌诊断、病情监测、基因治疗中的价值及对 卵巢癌细胞周期和失巢凋亡的影响机制研究 摘 要 卵巢上皮性癌(epithelial ovarian cancer,EOC，以下简称卵巢癌)，恶性 程度高，在妇科恶性肿瘤中死亡率最高，多数患者发现时已是晚期，晚期 卵巢癌患者五年生存率仅30％，如能早期发现有效治疗，五年生存率高达 90％。临床亟需新的卵巢癌肿瘤标记物和新治疗方法。 间皮素(Mesothelin，MSLN)是一种新发现的肿瘤细胞表面抗原，通常 仅表达在体腔表面的间皮细胞，在恶性胸膜间皮瘤、胰腺癌和卵巢癌等恶 性肿瘤中过表达。间皮素有两个异构体，其中一个可以从细胞表面脱落入 血，称可溶性间皮素相关蛋I刍(soluble mesothelin related peptides／proteins． SMRP)。由于SMRP可以释放入血且分子量明显低于常用的卵巢癌肿瘤 标记物CAl25，所以，理论上敏感性要高于CAl25，而且在恶性间皮瘤 中血清SMRP升高，因此，组织中同样高表达间皮素的卵巢癌患者血清 中SMRP也有可能升高，从而有望成为卵巢癌诊断的标记物。 间皮素可以增强多种恶性肿瘤细胞的增殖、粘附能力，但是其确切机 制还不为人知。鉴于间皮素在包括卵巢癌在内的少数几种癌组织中高表 达，而在正常间皮组织不表达或者低表达的特点，我们推测：间皮素可能 与卵巢癌的肿瘤发生形成、腹腔转移等多个环节有关，正因如此，间皮素 有望成为生物卵巢癌靶向治疗的优质靶点。详细了解间皮素的作用机制， 将为卵巢癌的诊断、控制腹腔转移和新疗法的提出提供强有力的理论依 据。 在肿瘤的发生形成过程中，细胞的锚定依赖生长(anchorage．dependent growth)能力和非锚定依赖生长(anchorage—independent growth)能力是 代表肿瘤增殖能力的两个重要方面。锚定依赖生长指细胞的生长依赖细胞 与细胞之间和细胞与细胞外基质(ECM)之间的信号传递。非锚定依赖 生长能力指细胞失去与细胞和ECM之间的信号传递后仍能生长增殖。非 锚定依赖生长能力增强是恶性肿瘤生长特性和发生转移的条件之一。 细胞周期是调控细胞生长增殖过程中的关键环节，其失控是发生肿瘤 中文摘要的重要原因之一，在对细胞周期的调控过程中，细胞周期蛋白(cyclin) 中文摘要 的重要原因之一，在对细胞周期的调控过程中，细胞周期蛋白(cyclin) 和细胞周期蛋白依赖性激酶(cyclin．dependent kinase，CDK)是关键物 质，两者结合成为二聚体后激活CDK从而启动细胞周期，并促进细 胞周期中不同实相的转换。Cyclin D1是细胞周期蛋白中非常重要的 一分子，对细胞周期起正向调控作用，在多种肿瘤组织中过表达，被 认为与多种肿瘤的发生相关。 失巢凋亡是细胞凋亡中的一种特殊类型，是指细胞在脱离原来生存环 境的特殊情况下发生的凋亡。恶性肿瘤细胞往往具有很强的抗失巢凋亡的 特性，从瘤体上脱落后并不发生凋亡，从而发生转移。抗凋亡蛋白Bcl．2 和凋亡前体蛋白Bim是在细胞凋亡过程中作用相反的两个调节因子。 本课题拟首先研究血清SMRP在卵巢癌诊断和病情监测中的应用价 值，对其诊断效能进行评价；然后在细胞水平对间皮素的生物学功能进行 研究，分为间皮素对细胞锚定依赖生