建立胸腺瘤型重症肌无力裸鼠模型可行性的研究-临床医学专业论文.docxVIP

万方数据 万方数据 学位论文原创性声明 本人郑重声明：所呈交的论文是我个人在导师指导下独立进行研究工作取得 的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容和致谢的地方外，论文中不包含 任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，与我一同工作的同志对本研 究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。 学位论文作者签名： 日期： 年 月 日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解天津医科大学有关保留、使用学位论文的规定，即： 学校有权将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，并采用影印、 缩印或扫描等复制手段保存、汇编以供查阅和借阅。同意学校向国家有关部门或 机构送交论文，并编入有关数据库。 本论文属于 保密 ，在 年解密后适用本授权书。 不保密 。 （请在相对应的方框内打“√” ） 学位论文作者签名： 日期： 年 月 日 导 师 签 名 ： 日期： 年 月 日 天津医 天津医科大学硕士学位论文 中文摘要 目的 初步探索移植的瘤组织在 BALB/c 裸鼠体内存活情况，检测裸鼠总补体活 性、T 淋巴细胞及亚群，探讨胸腺瘤合并重症肌无力动物模型建立的可行性，为 研究胸腺瘤及重症肌无力的发病机制提供可能的动物模型基础。 方法 选择 2014 年 07 月至 2015 年 01 月天津医科大学总医院心胸外科收治的重 症肌无力合并胸腺瘤患者 6 例，术后病理诊断均为 B 型胸腺瘤。移植前经剪尾 取血法分别采集裸鼠外周血用于流式细胞学检测 T 淋巴细胞及其亚群和酶联免 疫吸附分析法检测外周血清总补体水平。在无菌条件下，获取瘤组织标本，用 无菌手术刀将其切割成 1-2mm3 的组织块，通过手术方式将组织块分别移植到 36 只 BALB/c 裸鼠的左侧肾被膜下，移植后 90 天分别经摘眼球法采取外周血进行 检测 T 淋巴细胞及其亚群和总补体含量变化。实验结束后采取颈椎脱臼法处死 裸鼠，取出其左侧肾脏，观察移植瘤组织块成活情况。应用配对 t 检验方法对瘤 组织块成活的裸鼠移植前后外周血 T 淋巴细胞及其亚群和总补体含量变化进行 统计学分析。 结果 1、 移植的胸腺瘤组织块在 BALB/c 裸鼠左侧肾被膜下存活：成活的瘤组织块位 于肾被膜下，结构清晰，无缺血、坏死，无明显增大，HE 染色及免疫组化 显示胸腺瘤组织块在肾被膜下存活，移植成功率 61%。 2、 移植前后 BALB/c 裸鼠外周血 T 淋巴细胞及其亚群的变化：移植后 CD3+T 淋巴细胞百分比、CD4+T 淋巴细胞比例与移植前比较明显升高，差异有统计 学意义（P0.05）；CD8+T 淋巴细胞比例移植后与较移植前比较明显降低， 差异有统计学意义（P0.05）。 3、 BALB/c 裸鼠外周血清中总补体含量的变化：移植后外周血清中总补体含量 与移植前比较降低，差异具有统计学意义（P0.05）。 结论 1、 人源性胸腺瘤作为异体移植物能够在 BALB/c 裸鼠体内长期存活。 I 2、 BALB/c 裸鼠有完整的补体系统，且能发挥作用。 3、 移植的胸腺瘤组织块对 BALB/c 裸鼠外周血 T 淋巴细胞及其亚群产生影响， CD3+T 淋巴细胞百分比、CD4+T 淋巴细胞比例升高，CD8+T 淋巴细胞比例降 低，T 淋巴细胞亚群比例处于失衡状态。说明移植的胸腺瘤组织在裸鼠体内 发挥部分胸腺功能，影响了裸鼠的细胞免疫，可能重建了其细胞免疫，后续 需针对 CD4+T 细胞亚群进行研究，了解其亚群细胞组成比例和功能的发挥。 4、 TAMG 动物模型建立具有一定的可行性，可为研究胸腺瘤和重症肌无力的发 病机制提供动物模型基础。 关键词 重症肌无力 胸腺瘤 T 淋巴细胞亚群 补体 动物模型 II Abstract Objective To explore the tumor tissue in nude mice survival status, and its influence the T lymphocytes cell immunity and complement activity. It is illustrated the feasibility of establishing of thymoma associated myasthenia gravis animal model, and provide the basis model for the study of pathogenesis of thymoma and myasthenia gravis. Methods 6 cases of thymoma associated myasthenia gravis patients from July 2014 to January 2015, Cardi