江苏省某地区健康绵羊体内产志贺毒素大肠杆菌的分离、λ噬菌体诱导以及致病力的初步研究-预防兽医学专业论文.docxVIP

扬州大学硕士毕业论文 扬州大学硕士毕业论文 2 本研究分离的优势血清型为093，为江苏地区的公共卫生及疾病预防提供参考。 2．STEC分离株入噬菌体噬茵斑的筛选以及志贺毒素表达的鉴定 STEC的主要毒力因子一志贺毒素(Shiga toxin,Stx)由细菌基因组上的噬菌 体编码，噬菌体在与细菌的相互作用中，能够改变宿主菌的表型、增强宿主菌的 毒力，或使无毒力的菌株转变为致病菌，促进细菌种群遗传多样性的形成。本研 究以109株志贺毒素基因阳性临床STEC分离株为受试菌株，用诺氟沙星对其进 行诱导，通过双层琼脂平板法筛选噬菌斑阳性的菌株，既可以检测那些诱导后可 以产生噬菌斑的菌株，又能够检测到诱导后不能产生噬菌斑的菌株，与之前的PCR 方法互补，增强了筛选的敏感性及特异性。通过Vero细胞毒性试验确定志贺毒素 的表达与否。 3．STEC优势分离株致病力的鉴定 根据本室已经建立的感染适应株的制备方法，挑选093、091分离株及参考 菌株EDL933、K-12等5株细菌，以109菌落形成单位(colony forming unit。CFU) 的菌量灌服3周龄ICR小鼠，从粪便中分离到的菌株，经PCR、血清型鉴定正确 后，即为感染适应株。以此感染适应株，测定LD50，以确定所分离的菌株致病力 大小，及致病力与志贺毒素的关系，为STEC引起的疾病的预防与控制提供参考。 关键词：产志贺毒素大肠杆菌；多重PCR；血清型；入噬菌体：诱导；噬菌斑； Vero细胞；LDso： 顾丛丛：江苏省某地区健康绵羊体内产志贺毒素大肠杆菌的分离、^噬菌体诱导 顾丛丛：江苏省某地区健康绵羊体内产志贺毒素大肠杆菌的分离、^噬菌体诱导 3 Isolation of Shiga toxin—producing E．coli strains and induction of their lambdoid bacteriophages and the pathogenicity evaluation O士isolates onglnated打Om healthy sheep of Jiangsu province M．S．candidate：Gu Congcong Advisor：Prof．Gao Song Abstract Shiga toxin-producing E．coli(STEC)。also called Vero toxin—producing E．coli (VTEC)，has emerged邪a pathogen that can cause food poisoning，severe and potentially fatal diseases．It is a major cause of human hemo=ha百c colitis(HU)or hemolytic uremic syndrome(HUS)．It Can also cause acute renal failure in children． Domestic ruminants，mainly earle，sheep，goats，have been implicated them as the principal reservoir．Sheep harbor many Serotypes of STEC in their gastrointestinal tracts． Ovine STEC strains belonged to a total of 50 O$elotypes which fell into 101 O：H serotypes have been reviewed by the Laborat6rio de Referencia de Escherichia coli (LREC)，Lugo，Spain(Gut／errez et a1．，unpublished data)．However,among them，only a few number of serotypes has been the most common serotypes found in other different countries，including 05：H-，091：H-，0103：H2，0128：H2，0146：H8．Serotypes ofSTEC 0157，026 arc rarely found in sheep．Cases reports of human diseases caused by non-O 1 57 STEC isolates are more and more． 1．Serotypes，virulence gene identification