降钙素基因相关肽对平滑肌细胞增殖的影响-人体解剖学专业论文.docxVIP

降钙素基因相关肤对平靖肌细腿增殖的影响 降钙素基因相关肤对平靖肌细腿增殖的影响 中文提要 降钙素基因相关肽对平滑肌细胞增殖的影晌 中文提要 研究目的：本课题探讨降钙素基因相关肽(CGI冲)对血管平滑肌细胞增殖的影 响，为阐明神经因素与平滑肌细胞增生调控之间的关系提供理论依据。 研究方法：取五个月胎龄水囊引产人胚胎的主动脉，体外原代培养血管平滑肌细 胞，用甜SM-actin免疫细胞化学染色鉴定细胞纯度。实验分为A：联胺诱导组：B： 联胺+CGRP组；C：CGRP组；D：正常对照组。CGRP和联胺的作用浓度分别为2 ×104mol／L和5×10。6moFL。用细胞计数法、Mr丌法检测细胞增殖，RT-PCR法检测 细胞周期蛋白D1、E和基质金属蛋白酶抑制剂-2(TIMP一2)mRNA的表达，流式细 胞仪法检测细胞周期的变化。 研究结果：本文用胎儿腹主动脉原代培养的细胞呈典型“峰与谷”样生长。培养 的血管平滑肌细胞通过Ⅱ．SM。actin免疫细胞化学染色鉴定，98％以上的细胞呈阳性反 应。从细胞生长曲线可以看出第3．5天是细胞的对数生长期。联胺作为巯基氧化剂， 能诱导血管平滑肌细胞脂质过氧化刺激平滑肌细胞的增殖。CGRP作用正常血管平滑 肌细胞，24小时之后对细胞的增殖呈抑制作用，但对联胺诱导增生的血管平滑肌细 胞抑制作用更明显。CGRP对周期蛋白D1 mRNA的表达有明显下调作用，对瑚．2 mRNA的表达有上调作用。提示：CGRP对血管平滑肌细胞的增殖和迁移有调控作用。 结论：l、人胚胎血管平滑肌细胞原代培养通过a．SM-actin免疫细胞化学染色鉴 定，纯度可达98％以上。细胞生长的第3．5天是细胞生长的对数期。2、联胺作为巯 基氧化剂可作为血管平滑肌细胞增殖的诱导剂。3、CGRP对血管平滑肌细胞的增殖 有下调作用，特别对联胺诱导增生的平滑肌细胞作用更明显，提示CGRP对平滑肌细 胞增殖有调控作用，有必要对其作用机理作进一步研究。4、CGRP对TIMP．2 mRNA 的表达有上调作用，提示对平滑肌细胞的迁移有调控作用。 关键词：降钙素基因相关肽血管平滑肌细胞增殖 联胺周期蛋白基质金属 蛋白酶抑制剂一2动脉粥样硬化 作 者：杨刚 指导老师：吴开云 堕塑塞苎里塑墨塾塾!堂坠塑堕塑蕉塑墅堕————————————茎：兰坚Influence 堕塑塞苎里塑墨塾塾!堂坠塑堕塑蕉塑墅堕————————————茎：兰坚 Influence of Calcitonin Gene-related Peptide on the Proliferation of Vascular Smooth Muscle Cells Abstract Objective To evaluate the effect of neuropeptide on the proliferation and migration of vascular smooth muscle cells(VSMCs)，this study was to investigate whether calcitonin gene-related peptide(CGRP)can regulate the proliferation and migration of vascular smooth muscle cells reduced by diamide． Methods VSMCs of abdominal aorta were obtained fresh aborted 5-month human fetus through primary culture．The purity of cultured VSMCs was assessed by positive immuoreaation cells of anti-a．smooth．actin with immunocytochemical method．The experiment Was divided into four groups：A，diamidc group，B，CGRP group，C，diamide and CORP group，D，control group．the concentration of CGRP and Diamide is 2x10’7M and 5x10-6M respectively．the prolifcrous change of VSMCs was confirmed by也c MTT