姜黄消痤搽剂中有效成分松油烯-4-醇对痤疮丙酸杆菌、院内感染细菌作用的研究-皮肤病与性病学专业论文.docxVIP

贵阳医学院 贵阳医学院 2013 届硕士研究生论文 PAGE PAGE 10 姜黄消痤搽剂中有效成份松油烯-4-醇对痤疮丙酸杆菌、 院内感染细菌作用的研究 专业：皮肤病与性病学 研究生：曹璨 导师：曹煜 教授 摘要 目的：研究姜黄消痤搽剂中有效成分松油烯-4-醇对痤疮丙酸杆菌、常见院内感 染细菌的体外抗菌效果，进一步论证姜黄消痤搽剂对痤疮治疗作用及其抗菌疗 效。进行痤疮丙酸杆菌对红霉素的耐药机制的探讨，为以后姜黄消痤搽剂的靶向 治疗及改善耐药现状提供理论依据。 方法：1、采用琼脂稀释法进行松油烯-4-醇、红霉素、米诺环素、多西环素、甲 硝唑对痤疮丙酸杆菌标准株（ATCC6919）的体外药敏实验。 2、次浓度诱导痤疮丙酸杆菌标准株对红霉素耐药。 3、采用琼脂稀释法进行松油烯-4-醇、米诺环素、多西环素、甲硝唑对诱 导耐药的痤疮丙酸杆菌的体外药敏试验。 4、提取痤疮丙酸杆菌标准株及耐药株的 DNA，合成 23S rRNA 基因的引物， 进行 PCR，测序后探讨 23S rRNA 基因的突变情况。 5、采用液体稀释法研究左氧氟沙星、头孢他啶、多西环素分别对大肠埃 希菌临床株、金黄色葡萄球菌临床株、表皮葡萄球菌临床株、肺炎克雷伯菌临床 株、铜绿假单胞菌临床株的作用；庆大霉素对铜绿假单胞菌的作用，然后由松油 烯-4-醇作用于其中的耐药株及大肠埃希菌标准株（ATCC25922）。 6、根据卫生部《消毒技术规范》进行松油烯-4-醇的皮肤消毒的现场试验。 结果：次浓度法成功诱导痤疮丙酸杆菌对红霉素耐药。体外药敏试验结果显示， 痤疮丙酸杆菌标准株与耐药株对松油烯-4-醇均敏感。与多西环素、米诺环素、 甲硝唑相比，痤疮丙酸杆菌对松油烯-4-醇不容易产生耐药。痤疮丙酸杆菌耐药 机制探讨中，提取出完整的痤疮丙酸杆菌标准株及耐药株的 DNA,PCR 后测序，结 果显示：痤疮丙酸杆菌耐药株的 23S rRNA 基因在 2040bp 处缺失碱基 A，在 2424bp 处插入碱基 T。院感耐药的大肠埃希菌临床株、金黄色葡萄球菌临床株、表皮葡 萄球菌临床株、肺炎克雷伯菌临床株、铜绿假单胞菌临床株对松油烯-4-醇均敏 感。在室温 22℃±1℃的条件下，浓度为 5%的松油烯-4-醇对自愿者前臂皮肤上 的自然菌进行擦拭消毒，作用 2min 杀灭对数值均≧1.00。 结论：次浓度法诱导痤疮丙酸杆菌对红霉素耐药的方法有效。痤疮丙酸杆菌 标准株及耐药株对松油烯-4-醇均敏感。与多西环素、米诺环素、甲硝唑相比， 痤疮丙酸杆菌不容易对松油烯-4-醇耐药。常见院内感染细菌的耐药株对松油-4- 醇敏感。浓度为 5%的松油烯-4-醇对于前臂皮肤上的自然菌杀灭率高。 关键词：松油烯-4-醇、药敏试验、耐药痤疮丙酸杆菌、院内感染耐药细菌、 现场试验 前言 姜黄消痤搽剂是姜黄、重楼、扛板归、一支黄花、土荆芥、绞股蓝、珊瑚姜 等组成的复方搽剂，具有清热祛湿、活血消痤的功效[1]。能对抗多种致病细菌和 真菌[2-3]，是皮肤科用于治疗脂溢性皮炎和痤疮的常用药物。 近年来，抗生素的广泛应用，一方面抑制了普通致病细菌，另一方面却促进 了耐药性细菌的增长，使耐药细菌感染的治疗成为严重困扰人类健康的难题。我 国中药历史悠久、功效显著，许多研究资料表明，中药在体内外有不同程度的抑 菌作用，并且中药有特殊的抗菌机理，较西药不易产生耐药性[4]。 珊瑚姜油为姜黄消痤搽剂中君药珊瑚姜的挥发油，对多种细菌、真菌有抗 菌作用[5-8]，对常见耐药菌的抑菌作用也有论证[9]，并可作为消毒液进行消毒杀 菌[10]。但对痤疮丙酸杆菌的作用未见报道。珊瑚姜油的有效成分为：萜类化合 物香桧烯、松油烯- 4-醇、γ- 松油烯、α- 松油烯、月桂烯、蒎烯、β-倍半水 芹烯等[11]，其中松油烯-4-醇含量达到49.45%，被认为是抗细菌、抗真菌的主要 成分[9]。 茶树油具有独特的药用价值,对细菌、真菌和病毒具有明显的杀灭和抑制作 用,其杀菌和抑菌能力是苯酚的 11～13 倍[12]，是一种以科学实验为基础被认可的 天然杀菌剂[13]。茶树油对痤疮丙酸杆菌的抑制作用已有报道[14]。松油烯-4-醇被 发现为其主要成分和抗菌活性成分，含量高达 42.11%[12]。 松油烯-4-醇对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、乙型溶血性链球菌、大肠 杆菌、绿脓杆菌和白色念珠菌等具有较强的抗菌性能[15]。在痤疮疾病治疗中， 抗菌药物的耐药性是影响痤疮治疗疗效的主要因素。姜黄消痤搽剂应用十多年， 在临床应用中未见明显的耐药现象。我们推测姜黄消痤搽剂对耐药痤疮丙酸杆菌 有作用。姜黄消痤搽剂中珊瑚姜的有效成分松油烯-4-醇已被认为是主要的功能 性成分，并已作为姜黄消痤搽剂的质量控制点。为了进一步论证松油烯-4-醇的 抗菌机理，我们采用松油烯