姜黄素通过IP3R途径抑制哮喘大鼠 气道重塑的研究-中西医结合临床医学专业论文.docxVIP

万方数据 万方数据 湖北中医药大学学位论文原创性声明 本人声明： 所呈交的学位论文是在导师的指导下进行的研究工作及取得的研究 成果。除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，本论文不包含其他个人或集体已经 发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得湖北中医药大学或其他单位的学位或证书 而使用过的材料。对本文的研究做出贡献的个人和集体，均已在论文中作了明确的说 明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。 学位论文作者签名： 年 月 日 关于学位论文使用授权的声明 本人完全了解湖北中医药大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保 留学位论文，允许学位论文被查阅和借阅；学校可以公布学位论文的全部或部份内容， 可以采用复印、缩印或其他手段保留学位论文；学校可以根据国家或湖北省有关部门 的规定送交学位论文。同意《中国优秀博硕士论文全文数据库出版章程》的内容。同 意授权中国科学技术信息研究所将本人学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》。 （保密论文在解密后遵守此规定） 论文作者签名： 导师签名： 年 月 日 目 录 中文摘要 Ⅰ AbstractⅡ 英文缩略词表 Ⅳ 前言 1 正文 3 1 实验材料 3 1.1 主要仪器 3 1.2 主要试剂及耗材 3 1.3 实验动物 3 2 实验方法 4 2.1 主要实验药品的配制 4 2.2 建立大鼠哮喘模型 5 2.3 处理实验动物收集标本 5 2.4 计数肺泡灌洗液炎症细胞 6 2.5 测量气管壁厚度及气道平滑肌厚度 6 2.6 检测支气管肺组织 IP3R 各亚型的 mRNA 含量 7 2.7 检测支气管肺组织 IP3R1 的蛋白含量 9 2.8 统计学处理 12 3 实验结果 12 3.1 大鼠激发期的反应 12 3.2 病理组织学改变 12 3.3 肺泡灌洗液中炎症细胞的改变 12 3.4 姜黄素对气管壁及平滑肌厚度的影响 13 3.5 姜黄素对 IP3R 各亚型 mRNA 相对表达量的影响 13 3.6 姜黄素对 IP3R1 蛋白相对含量的影响 13 3.7 相关性分析 14 讨论 17 1 中医对哮喘的认识 17 2 气道炎症与哮喘 17 3 气道重塑与哮喘 18 4 ASMC、IP3R 与哮喘气道重塑 19 5 姜黄素的作用 21 结语 23 参考文献 24 附录 30 文献综述 30 支气管哮喘的中医药研究进展 30 参考文献 38 技术路线图 42 建立哮喘模型流程图 43 论文数据图 43 致谢 45 中文摘要 目的：本研究通过观察不同干预条件下三磷酸肌醇受体(IP3R）在大鼠 支气管肺组织中的表达差异，从而探讨 IP3R 在气道重塑中的作用、姜黄 素对慢性哮喘大鼠气道重塑的影响及与 IP3R 的关系，进一步揭示其可能 的作用机制，为姜黄素的临床应用提供理论依据。 方法：32 只 SD 大鼠随机分为对照组、哮喘组、姜黄素组及地塞米松 组，卵清蛋白（OVA）联合氢氧化铝凝胶致敏、激发大鼠建立慢性哮喘气 道重塑模型，计数肺泡灌洗液（BALF）中不同炎症细胞所占比例；病理切 片观察气道结构改变；免疫组化染色鉴定气道平滑肌细胞并用专业图像分 析软件测量支气管管壁厚度及平滑肌肌层厚度；RT-PCR 检测肺组织 IP3R 各亚型 mRNA 表达，免疫蛋白印迹法检测肺组织 IP3R1 的蛋白表达。 结果：与对照组比较，哮喘组肺泡灌洗液嗜中性和嗜酸性粒细胞显著 增加（P0.01），姜黄素组及地塞米松组较哮喘组则显著减少（P0.05）。 与哮喘组相比，姜黄素组及地塞米松组气管壁厚度、气道平滑肌厚度均明 显降低（P0.01），但仍高于对照组（P0.01），差异均具有统计学意义。 与对照组比较，哮喘组 IP3R1 的 mRNA 表达明显升高，姜黄素组及地塞米 松组较之则明显降低（P 均0.01），各组 IP3R2 和 IP3R3 mRNA 含量无显著 性差异。免疫蛋白印迹证实，姜黄素组及地塞米松组 IP3R1 蛋白表达较哮 喘组均明显降低（P 均0.01），且 IP3R1 蛋白含量与气管壁厚度及平滑肌 层厚度呈正相关（r=0.937,0.918, P0.01）。 结论： 1． IP3R1 可能参与了气道重塑的形成。 2． 姜黄素能显著减轻气道重塑。 3． 姜黄素可能通过 IP3R1 途径抑制哮喘大鼠气道重塑。 关键词：姜黄素 哮喘 气道重塑 三磷酸肌醇受体。 I Research on Curcumin through the IP3R pathway inhibiting the airw