结肠癌转移相关基因1对食管癌细胞增殖和迁移的作用及其机制研究-肿瘤学专业论文.docxVIP

中文摘要 中文摘要 结肠癌转移相关基因1对食管癌细胞增殖和迁移 的作用及其机制研究 东南大学医学院 研究生：林峰 导师：姜藻 【研究目的】 研究结肠癌转移相关基因l(Metastasis Associated In Colon Cancer 1，MACCl) 对食管癌细胞增殖和迁移的作用及可能的机制。 【研究方法】 1．采用RT-PCR及Western blot检测不同食管癌细胞株ECl09、EC9706、TEl3、ECl和 正常食管上皮细胞株HEEpiC中MACCl的表达，选取低表达MACCl的细胞株TEl3 和高表达MACCl的细胞株ECl09进行后续实验。 2．构建携带MACCl的腺病毒载体Ad-MACCl和MACCl siRNA，Ad—MACCl感染TEl3 细胞，增加MACCl的表达，MACCl siRNA转染ECl09食管癌细胞，降低MACCl 的表达，通过Western blot检测感染或转染效果。 3．Ad．MACCl和MACCl siRNA分别处理TEl3和ECl09细胞后，通过MTT实验检测 MACCl对人食管癌细胞增殖的影响，流式细胞术检测对MACCl细胞周期的影响。 采用划痕实验及克隆形成实验观察感染或转染前后食管癌细胞侵袭及迁移变化。 4．采用Western blot检测Ad—MACCl和MACCl siRNA处理食管癌细胞TEl3和ECl09 后的增殖细胞核抗原(PCNA)和c．MET等的表达。 【研究结果】 1．MACCl在食管癌细胞株EC9706和Ecal09中表达较正常食管上皮细胞株HEEpiC中 高，而在TEl3和ECl中表达较低。 万方数据 东南大学硕士学位论文2．成功构建Ad．MACCl和MACCl 东南大学硕士学位论文 2．成功构建Ad．MACCl和MACCl siRNA，Ad．MACCl感染TEl3细胞后，MACCl基 因和蛋白的表达增加。而MACCl siRNA转染ECl09细胞后，MACCl基因和蛋白的 表达降低。 3．Ad—MACCl感染TEl3细胞后，细胞的增殖和迁移明显的增加。而MACCl siRNA转 染ECl09细胞后，细胞的增殖和迁移受到明显的抑制。 4．Ad．MACCl感染TEl3细胞后，PCNA和c．MET基因和蛋白表达明显增加，而MACCl siRNA转染ECl09细胞后，PCNA和c．MET基因和蛋白表达较阴性对照组降低。 【结论】 MACCl在EC9706和Ecal09中表达较TEl3和ECl高，其高表达可促进细胞的增殖和迁 移，而表达下调后明显抑制食管癌细胞的增殖、侵袭及转移潜能，MACCl高表达促进 PCNA和c．MET的表达，而低表达抑制其表达。MACCl促进食管癌细胞的增殖、侵袭及转 移。其机制可能通过调节下游基因c—MET表达水平实现。 【关键词】 食管鳞状细胞癌；MACCl；增殖；迁移 II 万方数据 英文摘要AB 英文摘要 AB STRACT Effects of MACC 1 in proliferation and migration of esophageal carcinoma cells and its mechanism． Medical school of Southeast University Graduate：LIN Feng Supervisor：Professor JIANG Zao [Obieetive] To detect the effects of MACC 1 in proliferation and migration of esophageal carcinoma cells and its possible mechanism． [Methods] 1．The expression of MACCl in ECl09、EC9706、TEl3、ECl and normal esophageal epithelial cell lines HEEpiC were measured by RT-PCR and Western blot．TEl3(10w expression ofMACCI)and ECl09(hi曲expression ofMACCl)cell line was used as an ideal model for studying the role ofMACCl in tumorigenesis． 2．Adenoviral construct encoding the MACC 1 gene(Ad—MACC 1)was used to infect TEl 3 cells for increasing the expression of MACC Iand MACC 1 siR