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华中科技大学硕士学位论文
华
中
科
技
大
学
硕
士
学
位
论
文
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英文缩写词表
缩写词 英文全称 中文全称
VSMC vascular smooth muscle cell 血管平滑肌细胞
AS atherosclerosis 动脉粥样硬化
ACS acute coronary syndromes 急性冠脉综合征
PTCA percutaneous transluminal coronary angioplasty 经皮冠状动脉腔内成形术
CDKs cylin-dependent kinases 周期蛋白依赖性激酶
CDKIs cylin-dependent kinases inhibitors 细胞周期蛋白依赖性激酶抑
制物
DMSO dimethylsulfoxide 二甲基亚砜 DMEM Dulbeccos modified Eagles medium DMEM 培养基 FCS Fetal calf serum 胎牛血清
PBS Phosphate Buffered Saline 磷酸盐缓冲液
PI Propidium Iodide 碘化丙啶
TUNEL Terminal deoxynucleotidyl transferase mediated dUTP nick end labeling
末端脱氧核苷酸转移酶介导
的 dUTP 缺口末端标记
PAGE Polyacrylamide gel Electrophores 聚丙烯酰胺凝胶电泳
SDS Sodium dodecyl sulfate 十二烷基硫酸钠
姜黄素对血管平滑肌细胞增殖与凋亡的影响
硕士研究生 王天红
导师 王祥 副教授 曾秋棠 教授
中文摘要
目的 观察姜黄素(curcumin)对大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)增殖抑制、诱导细胞周 期停滞和细胞凋亡的作用,以及对细胞周期蛋白cyclinD1,P21waf1 / cip1 表达的影响。 方法 采用组织贴块法体外培养大鼠VSMC,MTT法测定姜黄素对VSMC增殖的抑制 作用,流式细胞仪分析不同浓度姜黄素对细胞周期分布的影响,TUNEL法和流式细胞 仪分析细胞凋亡,Western印迹法检测cyclinD1,P21waf1 / cip1 蛋白的变化。
结果 MTT法观察不同浓度姜黄素对VSMC增殖的影响:MTT示不同浓度姜黄素 (7.5~120 μmol/L)在24~72 h范围内,浓度和时间依赖性抑制VSMC增殖;30 μmol/L 以上浓度姜黄素显著抑制增殖的VSMC细胞周期进程,使S及G2/M期减少(P0.05)、 G0/G1期增加(P0.05);流式细胞术和TUNEL法显示30 μmol/L和60 μmol/L姜黄素作用 VSMC24 h后,凋亡率较对照组明显升高(P0.05);30 μmol/L的姜黄素可抑制cyclinD1 表达,促进P21waf1 / cip1 蛋白表达。
结论 姜黄素具有明确的抑制VSMC增殖和诱导细胞凋亡的作用;也具有诱导细胞周 期停滞的作用,其与cyclinD1, P21waf1 / cip1蛋白变化有关。
关键词: 姜黄素;平滑肌细胞;血管;增殖;凋亡
Effect of curcumin on proliferation and apoptosis of cultured rat aortic vascular smooth muscle cell
Abstract
Objective To investigate the anti-proliferation, induced apoptosis and cell cycle arrest effects of curcumin on rat vascular smooth muscle cell(VSMC),and observe the expression changes of cyclinD1 and P21waf1 / cip1.
Methods VSMC was primarily cultured by explant method from the thoracic aorta of SD rats.The VSMC was treated by curcumin with different concentration. The viability and proliferation of VSMC were assayed by MTT. Flow cytometry and TUNEL methods were implied to detect the apoptgsis of VSMC. Changes of cell cycle of VSMC
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