结球甘蓝三倍体的创建及其细胞和胚胎发育研究-蔬菜学专业论文.docxVIP

摘要 摘要 本文以二、四倍体结球甘蓝为试材，采用雌蕊整体压片荧光显微观察和石蜡切片 等技术，对二、四倍体正反交的授粉受精和胚胎发育过程进行了较系统地观察比较， 并对其杂交败育的原因及解决方法进行了研究探讨。同时，对所获得三倍体的生长发 育特性、生理生化指标以及减数分裂行为、花粉败育途径和配子传递率等进行了观察 测定。此外，我们还发现了能自然产生2n配子的甘蓝材料，并通过对其减数分裂中 期II纺锤体的动态观察，探讨了其产生2n雄配子细胞学机制。所得结果主要有以下 几点： 1甘蓝2x×4x、4x×2x授粉受精过程均能正常进行，但胚胎发育均不正常，存 在不同程度的胚胎败育现象，且败育均是由胚胎发育过程中胚乳异常退化、内珠被细 胞严重坏死，从而断绝了胚胎发育的营养供给所致，但两者发生败育的时间不同，2x ×4x主要发生在小球胚阶段，胚胎尚未出现组织分化，因此败育十分彻底，最终形 不成种子；而4x×2x主要发生在心形胚或晚心形胚阶段，胚胎已有了明显的组织分 化，最终能形成少量具幼胚的小粒种子。 2甘蓝4x×2x和2x×4x结荚率都比较高，无明显差异，但结实性差异很大，2x ×4x仅结有极少量的大粒种子(O．57％)，而4x×2x除结有少量的大粒种子(O．54％) 外，还结有一些小粒种子(3．25％)。经倍性鉴定，4x×2x所结小粒种子中绝大部分 为3x=27的三倍体，还有极少量为2n=26亚倍体和2n=28的超倍体，4xx2x和2x ×4x所结的大粒种子均为四倍体。 3激素处理膨大过程中的子房对杂种幼胚的发育有一定的促进作用，其作用大小 因激素种类、浓度和配比而异，其中200ppmlAA+200ppmBA的处理效果最好，结籽 率较对照提高了3．87倍。 4胚珠离体培养的效果受胚胎发育程度的影响很大。在MS基本培养基上，心形 胚以前的胚珠均未能培养成功，心形胚以后的部分胚珠能够完成后熟作用，并直接萌 发成苗。 5杂交获得的小粒种子在MS基本培养基上或在铺有湿滤纸的培养皿中均能萌 发，前者的萌发率为45．56％，后者为31．10％，但后者的畸形苗相对较少，且操作简 便。 6三倍体结球甘蓝生长健壮，耐热性增强，结球紧实，叶型指数变小，平均叶球 重和部分营养品质指标高于其二倍体。 7甘蓝三倍体减数分裂行为较二倍体复杂，终变期多以三价体存在，单价体和二 价体占少数；中期I、中期II均含有游离染色体：后期I染色体分离不均衡有9／18、 10／17、11／16、12／15、13／14等方式，频率分别为0．77％， 3．87％，8．76％，31+19％ 和48．45％，其中10／17分离是创建三体系的细胞学基础。 8三倍体甘蓝的花粉败育主要是由于减数分裂行为异常，产生的小孢子本身染色 体组成不均衡，导致其遗传生理不协调所致，而与绒毡层细胞的发育关系不大。 9甘蓝3x×2x的结籽率为10．36％，2x×3x的结籽率为0．83％，但前者的2n+1 株率为26．47％，后者为72．70％。表明甘蓝三倍体产生的各种非整倍性配予中，通过 株率为26．47％，后者为72．70％。表明甘蓝三倍体产生的各种非整倍性配予中，通过 花粉一般只能传递的n+l的配子，而通过胚囊，不仅能传递n+l的配子，还能传递 n+2、n+3等染色体组成更加不均衡的配子。 10二倍体甘蓝中存在能自然产生2n配子的植株，其形成2fl配子的细胞学机制 主要是由于减数分裂中期II纺锤体定向发生改变，形成三分体和二分体所致，并以形 成二分体为主。 关键词：甘蓝；三倍体；胚胎发育；减数分裂：败育 A A Study on the Obtaining of Triploid and its Cell,Embryo development in Head Cabbage A ut h 0 r：LIU Lin—po Maior ：0lericulture Supervi sor：ZHANG Cheng-he (College of Horticulture·Agricultural University of Hebei．Baoding、China 07 l 00 1) Abstract The process of pollination，fertilization and embryo development of 4x X 2x and 2x X 4x in head cabbage was observed by the ways of fluorescence microscopy and paraffin section．Then the characters of quality,growth and development，meiosis behavior and gamates t