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BYL无细胞系统对植物RNA病毒翻译复 制机制的研究进展 吴元华 沈阳农业大学植物保护学院 摘要： 无细胞翻译系统是高效表达重组蛋口质的体外分子研究系统，BYL是一种通过密 度梯度离心法脱去液泡的烟草BY-2裂解液无细胞系统。BYL系统可支持外源m RNA以及多种植物RNA病毒的蛋白质表达，由于BYL系统中保留植物R\A病毒复 制所需的胞内膜结构，所以该系统可支持RNA病毒核酸负义链、正义链和亚基因 RNA的合成。综述了 BYL系统应用于植物RNA病毒翻译和复制等机理以及RNA干 扰机制方面的研究进展，并对其研究前景进行展望，旨在便于更多的研究者系 统了解BYL无细胞系统，将其更广泛地应用于其他RNA病毒的翻译复制机制研究 中。 关键词： 无细胞体系；BYL;蛋白质表达;植物RNA病毒; 作者简介：安梦楠，男，博士，讲师，研究方向:植物病毒 学;E-mai1:anmengnanl984@163? com 作者简介：吴元华，男，博士，博士生导师，研究方向:植物病毒 学;E-mail:wuyh7799@163. com 收稿日期：2017-06-21 基金：国家自然科学基金项冃 Research Progress on BYL Cell-free Systems in Plant RNA Virus Translation and Replication Mechanisms AN Meng-nan WU Yuon-hua College of Plant Protection, Shenyang Agriculturol University; Abstract： Cel1-free translation system is an in vitro molecular study system for efficient expression of recombineint proteins. The BYL istobacco BY~2 lysate cell-free system from which vacuoles arc removed by density gradient centrifugation. The BYL system supports recombinantprotein expression and many plant viral protein expressions. Because the intracellular membrane fraction required for viral RNA replication i sretained, the BYL system al so supports negative-strand, positivc-strand and subgenomic RNA synthesis of plant positivc-strand RNA viruses. This paper reviewed the applications of BYL system in the molecular insight of translation and replication mechanism of plant RNA viruses aswell as RNA in ter fere nee mecha nism, and prospec ted their future research trend. This review systematically illustrated the BYL system, whichis cxpected to be applied in the study of of other plant RNA viruses and provides intriguing insights. Keyword： cell-free system; BYL; protein expression; plant RNA virus; Received： 2017-06-21 无细胞蛋白质合成系统（Cell-free protein synthesis, CFPS）是在细胞抽提 物中补充底物和能源物质，通过加入外源m RXA或DNA为模板来人工合成蛋口质 的体外研究系统［1］。与体内（in vivo）蛋白质表达体系相比，无细胞系统突破 了细胞的限制，具有反应时间短、蛋白质表达迅速、不易于被蛋白酶降解、可表 达对细胞有毒性的蛋白质等诸多优点及1。无细胞系统中的粗裂解液中包括核糖 体、翻译起始因子等翻译所需的基础因子，通过外源加入蛋白酶抑制剂、氨基酸、 能量再生物质及底物等可实现短时间内表达目标蛋口质固。