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新型ATI受体拮抗剂降压活性探究 【摘要】目的研究新型ATI受体拮抗剂的降压活性。方 法利用放射性受体结合实验和降压实验评价化合物对ATI 受体亲和力大小以及体内降压活性。结果与阳性对照氯沙 坦相比，1号化合物有更好的ATI受体亲和力。结论1号化 合物具有较好的降压效果。 【关键词】高血压；细胞；新型ATI 高血压是一种常见的心血管疾病，在人群中有相当高的 致病率和死亡率。我国当前有1.6亿高血压患者，而且每年 还以300万人新发病递增，每年因心脑血管合并症而死亡的 有260万人，严重影响了人民的生命和健康。自从第一个血 管紧张素II受体拮抗剂一氯沙坦在瑞典问世以来，人们对 沙坦类药物的作用机制、药理作用、临床效果的认识不断更 新，在心脑血管疾病的防治中应用越来越广泛，而且越来越 受到临床上的重视。最新研究报告显示，长期服用沙坦类药 物的高血压患者，患癌症的几率远低于不服用沙坦类药物的 人群，从而揭开了沙坦类药物具有抗肿瘤作用的新篇章。 世界卫生组织(WHO)建议的血压测量标准是：正常成 人收缩压应小于或等于140 mmHg (18. 6kPa),舒张压小于或 等于90 mmHg (12kPa)o如果成人收缩压大于或等于160 mmHg (21. 3kPa),舒张压大于或等于95 mmHg (12. 6kPa)则为高 血压；血压值在上述两者之间，为临界高血压。全球高血压 的患病人数逐年增加，调查表明高血压的发病年龄逐渐趋于 年轻化。据2009年国际高血压学会第21届年会报道，目前 全球大约有9. 72亿人患高血压或血压偏高，相当于成年人 口的26. 4%,发达国家高血压患者有3. 33亿人，发展中国家 有6. 39亿人。预计到2025年，这一数字将增加到15. 6亿。 目前庞大的市场被国外产品垄断，国内沙坦类降压新药的研 发还需突破和发展。 血管紧张素II受体拮抗剂（沙坦类药物）是一类特异 性高、耐受性好、而且副作用小、安全可靠的新型抗高血压 药物。本文以BMS-180560为先导化合物，通过构效分析、 生物电子等排和结构拼合等药物设计基本方法，设计合成了 化合物1,并进行了活性评价。 关键词：血管紧张素II受体1,拮抗剂，高血压， 1实验动物 雌性SHR （中国科学院斯莱科上海实验动物中心）。 2材料 2. 1材料与仪器 新型化合物：东华大学生物医药研究组；EP214C型电子 分析天平：SW-CJ-1FD型超净工作台：苏州净化；SN-682 型Y计数器：上海日环厂；上海一恒科学仪器有限公司； ZH-HX-Z无创尾动脉血压测量分析系统：淮北正和生物公司; 二氧化碳细胞培养箱:Thermo Scientifico 3实验方法 251-Ang II 溶液配制:取 0. 012g （12mg） 1251-AngII, 加lml PBS溶解，得到浓度10-2Mo 细胞铺板：取血管平滑肌细胞3-7代铺于24孔板中 （IX 107/孔），贴壁后用于试验。 3. 1结合反应：每个浓度采用3个复孔。细胞板每孔依 次加入浓度逐渐增加的1251-Ang II溶液，使其终浓度分别 为 OnM； 0.02nM； 0.04nM； 0.08nM； 0.16nM； 0.32nM； 0.64nM； 1. 5nM,为了扣除非特异性结合，每个浓度的第三个平行复 孔加入未标记的Ang II （终浓度为1X10-6 M）和浓度递增 的1251-Ang II溶液，每孔的最终体积为1000 uL （其中 500 uL为细胞培养液），4*反应150 min,反应结束后去除 多余的反应液，用PBS洗涤3次，加入0. lmol/L NaOH溶液 消化细胞lOmin,将细胞消化液移入塑料管，用V计数器测 量每管内溶液的Y计数。经GraphPad Prism4饱和曲线拟 合程序处理得到1251-Ang II受体结合饱和曲线。 3. 1竞争性实验： 药物溶液：取一定量的化合物溶于1 niL的DMSO溶液， 浓度为10-2 M,再10倍稀释成不同浓度的溶液（1X10-10 M ?1X10-4 M）o 细胞铺板（IX 107/孔）后，每孔加入0. 1 nM 1251-Ang II以及不同浓度的新化合物（终浓度1 X10-6?1X10-12 mol/L），总体积为1000 uL, 4工反应150 min,反应结束 后去除游离的1251-AngII,用PBS洗涤3次，加入0. 1 mol/L NaOH溶液消化10 min,将细胞液移入塑料管，用Y计数器 测量每管内溶液的Y计数。经GraphPad Prism 4竞争结合 曲线拟合程序处理即可得出新型化合物抑制与膜蛋白结合 的半抑制常数和IC50值。 3.2体内降压实验 低剂量组（10mg/kg）、高剂量组（15mg/kg、阳性对照 组（洛