华北大黑鳃金龟性信息素粗提物的分离及活性组分初探.PDF

西北林学院学报1997—12(2)：52--56 ofNorthwestForeslryCollege Journst 华北大黑鳃金龟性信息素粗提物的分离 及活性组分初探。 王 惠一 陈竹君李科友 (陕西省林业科学研究所．7：21oo陕西杨睦；第作者：女，37岁，工程师) 摘要采用求偶时间观察及性信息素的室内定量生物划定法，确定了华北是黑鳃金龟 释放性信息的高峰期为20：oo～21：00时，活性粗提物的制取应在此时进行。性信息素粗 提物的生物测定结果表明：用乙醇浸提性信息素腺体，所得粗提物显示较强引诱活r『生，色 谱分离和收集馏分的生物测定结果表明：组分A具有明显生物活性．是华北大黑鳃金龟 性信息素的主要有效成分之一。 关键词华北大黑鳃金龟；性信息素粗提物：色谱分离；生物活性测定， 分类号s433．5$765．38 oblita 华北大黑鳃金龟(ttolotrickiaFald．)属鞘翅目金龟总科害虫。其幼虫(蛴螬)主要危 害一些作物及苗木嫩根，危害十分严重。由于其地下生活特性，农药防治方法难以取得理想效 果。利用昆虫性信息素对成虫进行监测和防治，降低其繁殖量，效果好，无污染，乃当今较理想 的技术和方法。但鞘翅目昆虫性信息索研究成功的报道较少，到目前为止，金龟总科昆虫只见 到有4个虫种的性信息素的研究报道“。’““。1987年我国曾有人试图对华北大黑鳃金龟进行 性信息素的研究，但始终未得到具有性诱活性的粗提物=j。我们从1992年开始，在对华北大黑 鳃金龟进行求偶行为研究“。的基础上，对产卵器分泌物的活性进行了研究“。，同时对性信息索 释放部位及时辰节律、粗提物分离方法和主要成分结构等进行研究，经人工合成制得了具有生 物活性的性引诱剂。本文拟就性信息素粗提物的分离及活性组分测定结果作一报道。 1材料和方法 仪器设备：采用美国惠普公司生产的5890Ⅱ型气相色谱仪，配套的】9395A型顶空进样 器、3396A型积分仪及火焰离子化检测器， 虫源：5～6月份傍晚在苗圃地抓回成虫后，将雌雄虫分开饲养。饲养容器为直径30cm，商 30cm的玻璃缸，底部装有lOcm厚的过筛壤土(含水量12％～16蛹)，缸上罩以尼龙纱网保持 空气流通，缸内插有华北大黑鳃金龟成虫的主要寄主 李子树的带叶枝条供其取食。饲养 10d后．进行试验， 性信息索粗提物的制备：每13下午黄昏前，在雌虫饲养容器内换插新的饲料后开始观察． 996一岫一20 收稿日l}[|l -扬陵农业科技开发基金资助项目 **乇惠同志现在西北农业大学植物保护系工作 2期 王惠等华北太黑鳃金龟信息素粗提物的分离及活性组分初探 当雌虫爬上枝条并有产卵器外伸等求偶行为出现时，摘除产卵器及与之连接的性信息素腺体， 在溶剂L}『浸泡24h后，弃去虫{奉．离心弃去不溶物．胃氮气浓缩至200～300td即可。同时另取 一份产卵器及性信息素腺体直接装入空样品瓶中密封．生物测定时作对照。 生物测定方法：本研究采用两种方法。即有气流有位移生物测定法和无气流无位移的小容 器生物测定法”3，前法是将性成熟的雄虫装人10cm×6era×6era的铁纱笼中，将纱笼置于一 根60cm长，12cm内径的有机玻璃柱的一端，柱的另一端放待测样品，外侧距样品30cm处放 一小风扇，柱端蒙双层纱布使柱内气流平缓。试验开始时打开铁纱笼盖．流动的空气带着洋品 通过柱子到达雄虫处，雄虫感受到样品中的性信息素后，会表现出振翅、逆风趋向等行为。以雄 虫趋向率的大小表示样品的生物活性的大小，后法是将性成熟的雄虫放入500ml的烧杯中， 待测样品直接插人杯中虫体上方约2～3cm处，当雄虫感受到性信息素时．立即表现出剧烈振 翅甚至企图交配等行为反应。M振翅雄虫占供试雄虫总数的百分率表示样品生物活’洼的大小． 每天20：o。时前选性成熟的雄虫jo头．在8：oo～12：00时之间每小时内取其中】0头雄 虫对不同试样进行生物测定，以当晚50头雄虫对样品的总反应率作为一次测定结果。 粗提物分离方法：本实验采用两种分离方法。(1)提取液液体进样．25mFFAP弹性石英毛 0r，mln 5I7mI“