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细胞生物学
绪论一、细胞是一切生物的基本结构单位,它是由膜围成的能独立进行生长繁殖的原生质团。细胞生物学:是从细胞整体、超微结构和分子水平上研究细胞的结构和生命活动规律的科学,是现代生命科学的基础学科。
二、“Micrographia”(显微图谱) 。该书的发表,标志着人类在科学上进入了对物质世界进行显微研究的时代。
A.V. Leeuwenhoek(荷兰) 他是历史上第一个观察到活细胞的人!1938年,终于研制出世界上1st台商业电镜
三、1838年,德国植物学家M. Schleidon根据自己的观察,论证了所有的植物体都是由细胞组合而成的。
1839年,德国动物学家T. Schwann认为,动物体也是由细胞所组成。
T. Schwann总结了前人的工作,正式提出了细胞学说(Cell Theory),肯定了一切生物体均由细胞组成。1855年,德国病理学家R. Virchow明确指出:“新细胞来自原有的细胞”。
于是,完善的细胞学说包含了三点内容:
⑴ 细胞是多细胞生物的最小结构单位,而原生生物本身即是一个细胞单位;
⑵ 多细胞生物的每一个细胞即是一个活动单位,执行特定的功能;
⑶ 细胞只能由原有细胞分裂而来。
四、1896年,E.B. Wilson发表著作——The Cell in Development and Heredity:是细胞学发展史上第一部系统的细胞学著作 (把细胞学、遗传学和胚胎发育结合起来)
1925年该书的第三版中发表了E.B. Wilson绘制的一幅细胞模式图。----第一幅细胞模式图
1961年,J. Brachet据电镜下观察到的结构,并集40、50年代的研究成就,在“Living Cell” 一文中绘制了一幅细胞模式图-----细胞学发展史上的第二幅细胞模式图 (动态超微结构)
1981年,中国科学院上海生物化学研究所、中国科学院上海细胞生物研究所、北京大学等单位合作,经过13年的努力,人工合成了酵母丙氨酸转移核糖核酸,这项成果是我国继在世界上领先人工合成牛胰岛素之后,又取得的一项世界性的重大成就。
第二章 细胞生物学的研究方法
一、特殊光学显微镜:1. 紫外光显微镜:分辨率可提高1倍,可以看到许多在普通光学显微镜下看不到的胶体颗粒。同时还可以可用来测定细胞核中的核酸含量。2. 暗视野显微镜:分辨率比普通显微镜高了40倍,可用于观察一些细胞器,如核、线粒体等结构。
3 . 相差显微镜:提高了活细胞结构的反差,从而解决了对活细胞观察的难题。
微分干涉差显微镜(DIC显微镜):其优点是能显示结构的三维立体投影影像。DIC显微镜使细胞的细微结构立体感特别强,适合于显微操作。目前像基因注入、核移植等生物工程的显微操作常在这种显微镜下进行。
荧光显微镜:用不同的荧光染料去标记抗体,再由抗体去特异性结合抗原。可用于免疫细胞化学的研究。
激光共聚焦显微镜:通过共聚焦可进行光学切片,对固相、液相物体均可进行观察。透射电镜与普通光学显微镜的成像原理有何异同?
透射电镜与光学显微镜的成像原理基本一样,不同的是:
1) 透射电镜用电子束作光源,用电磁场作透镜,
2) 光学显微镜用可见光或紫外光作光源,以光学玻璃为透镜。
1、透射电子显微镜:标本须制成厚度仅有0.05?m的超薄切片,并放在铜网上
2、扫描电子显微镜:用来观察标本的表面形态结构。
3.、扫描隧道显微镜:能直接观察生物大分子(如DNA、RNA和蛋白质等)的原子布阵,
能观察一些生物结构(如生物膜、细胞壁等)的原子排列。
三、生物化学分析技术1、免疫荧光技术(免疫细胞化学):将免疫学方法与荧光标记技术相结合用于研究特异蛋白抗原在细胞内分布的方法。如果将抗体结合上标记物,再与组织中的抗原发生反应,即可在光镜或电镜下显示出该抗原存在于组织中的部位。直接法:将带有标记的抗体与抗原反应,显示出抗原存在的部位
间接法:在抗体抗原初级反应的基础上,再用带标记的次级抗体与初级抗体反应,从而使初级反应得到放大,增强显示效果
2、免疫电镜技术:免疫荧光技术虽然快速、灵敏、特异性强,但其分辨率有限。同样用抗原——抗体反应的原理,免疫电镜技术则能有效地提高样品的分辨率,在超微结构水平上研究特异性蛋白抗原的定性与定位。
细胞工程技术1、细胞工程:在细胞水平上的生物工程。所使用的技术主要是细胞培养、细胞分化的定向诱导、细胞融合和显微注射等。
细胞培养技术(cell culture)或称组织培养技术即是选用各种最佳生存条件对活细胞进行培养和研究的技术。2、动物细胞培养:细胞培养方式大致可分为两种:群体培养和克隆培养。转化:正常细胞在某种因子的作用下发生突变而具有癌性
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