滚压载荷生物反应器及不同状态软骨细胞对兔骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化的作用-外科学专业论文.docxVIP

；10III ；10III ll tit III I II Iitl IIl Y1 901 079 目 录 中文摘要 1 英文摘要 4 研究论文 滚压载荷生物反应器及不同状态软骨细胞对兔骨 髓间充质干细胞向软骨细胞分化的作用 第一部分 滚压载荷生物反应器促进兔骨髓间充质干细胞向 软骨细胞分化的研究 前言刖舌 “· 一一“·· ““ 一 一“ ” 。 8S 材料与方法 9 结果 · · · ··· ·· ·17 附图 O O 19 附表 25 讨论 ” 一” 一 一 ”27 结论 · · · ··· ·· ·29 参考文献 O 30 第二部分 不同状态软骨细胞在共培养系统下对骨髓间充质 干细胞向软骨细胞诱导分化作用的研究 前言日U舌 “ 一一“一 一O O ““ ”一 一一34 材料与方法 34 结果 ” 一“ 一··· ···· 44 附图 46 附表 O O 52 讨论 · · · · · ·······54 结论 · ·· ·· ··· ··· · ···· ··56 参考文献 57 综述 不同环境刺激对骨髓间充质干细胞成软骨分化作用 的研究进展 60 参考文献 67 致谢 ·· ·· ···· ···· · ·········· ··· ····· ··69 个人简历 70 中文摘要滚压载荷生物反应器及不同状态软骨细胞对兔骨髓间充质干细 中文摘要 滚压载荷生物反应器及不同状态软骨细胞对兔骨髓间充质干细 胞向软骨细胞分化的作用 摘 要 软骨是一种半透明并且有弹性的组织，它的结构和功能平衡至关重 要。一旦这种平衡被打破，软骨将会导致病变。关节软骨由于缺乏血管供 应、神经支配、淋巴回流，损伤后难以进行修复。随着工程学、材料科学 和细胞生物学的迅猛发展，用组织工程学技术体外制造具有生物学特性和 功能的软骨组织成为解决这一难题最有希望的方法。骨髓间充质干细胞 (Bone mesenchymal stem cells，BMSCs)由于来源方便，扩增快，目前被 认为是软骨组织工程最佳的种子细胞。力学因素和生物化学因素在BMSCs 向软骨细胞分化的过程中起关键作用。基于此，本课题分两部分来研究滚 压载荷生物反应器及不同状态软骨细胞对兔骨髓间充质干细胞向软骨细 胞分化的作用和不同状态软骨细胞在共培养系统下对骨髓间充质干细胞 向软骨细胞诱导分化作用。 1滚压载荷生物反应器促进兔骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化的研究 目的 观察滚压载荷生物反应器对BMSCs．琼脂糖复合体中BMSCs向 软骨细胞诱导分化的作用。 方法分离新西兰兔BMSCs，培养至第三代后与低熔点琼脂糖复合成 凝胶块并在自制的模具中形成直径为4mm高为4mm的圆柱形胶块。将 样本分为TGF—pl+力学组、TGF．131组、力学组和对照组进行不同的处理。 在第7、14、21天时去各组标本进行实时定量PCR、GAG含量检测以及 组织学染色。 结果TGF—pl+力学组II型胶原基因表达在第7、14、2l天三个时间 点随时间的推移逐渐增强，并在第2l天时显著增强。第7天TGF．pl+力 学组、TGF．pl组、力学组II型胶原基因表达分别上调2．5+0．24(P0．05)、 1．8+0．12和1．9+0．20倍，蛋白聚糖基因表达分别上调2．7土o．34(P0．05)、 2．6+0．06和2．1+0．07倍。而对照组II型胶原基因表达下调0．6a：O．08倍，蛋 白聚糖基因表达下调0．8士,-0．10倍。第14天TGF．131+力学组、TGF．pl组、 力学组、对照组II型胶原基因表达分别上调5．7+0．61(P0．05)、3．4+0．54 中文摘要(P0．05)、3．2+0．36和1．2+0．22倍，蛋白聚糖基因表达分别上调8．6+1．61 中文摘要 (P0．05)、3．2+0．36和1．2+0．22倍，蛋白聚糖基因表达分别上调8．6+1．61 (P0．05)、7．7士1．42(P0．05)、6．7+0．93和1．24-0．04倍。第2