银丹心脑通和主要成分配伍对心肌缺血再灌注损伤保护作用.docxVIP

银丹心脑通和主要成分配伍对心肌缺血再灌注损伤保护作用 ［摘要］目的：研究银丹心脑通及其主要成分配伍对 心肌缺血再灌注损伤的保护性作用。方法：采用全心停灌再 灌注的方法建立大鼠离体心脏缺血再灌注损伤模型。SD大鼠 分为空白组(control),模型组(model ),银丹心脑通全方 组(YDXNTC)，银杏提取物组(GBE),丹参醇提物组(SM-E), 丹参水提物组(SM-H),混合物组(灯盏细辛，三七，山楂, 绞股蓝，大蒜，天然冰片；MC),银杏+丹参醇提物配伍组， 银杏+丹参水提物配伍组，丹参醇提物+丹参水提物配伍组。 离体心脏平衡后，空白组正常灌流70 min；模型组正常灌流 10 min,停灌30 min,复灌30 min；给药组以含有相应药 物的灌流液正常灌流10 min,余同模型组。实验过程中全程 记录心电图，观察室性心动过速/室颤(VT/VF)发生率，心 脏停跳时间，复跳时间，正常律动时间及心率失常持续时间。 复灌结束后，将心肌匀浆，测定SOD活力，MDA, LDH, CK-MB 和心肌钙蛋白I (cTnl)释放量。结果：①银丹心脑通全方 组，丹参醇提物，丹参水提物，混合物能够延长心脏停跳时 间，缩短复跳时间、正常律动时间及心率失常持续时间，但 对VT/VF发生的发生没有明显作用。银杏提取物对减少复跳 时间、正常律动时间及心率失常持续时间有较好作用，同时 能够改善VT/VF的发生。除银杏+丹参水提配伍对心脏停跳 时间无明显影响以外，主要成分配伍对心脏停跳时间，复跳 时间，正常律动时间及心率失常持续时间均有良好作用，且 银杏+丹参醇提对VT/VF发生也有明显作用。②银丹心脑通 全方组，银杏提取物，丹参醇提物，银杏+丹参醇提物配伍 组，丹参醇提物+丹参水提物配伍组能够提高心肌SOD活力, 降低MDA含量；丹参水提物，混合物，银杏+丹参水提物配 伍组仅使MDA含量降低。③银丹心脑通全方组和丹参水提物 减少了 LDH的释放。银杏提取物，丹参醇提物，丹参水提物 及银杏+丹参醇提物配伍降低了 CK-MB含量。④银杏+丹参醇 提物配伍抑制了 cTnl的释放。结论：银丹心脑通、主要成 分及主要成分配伍对心肌缺血再灌注损伤具有一定的保护 作用，其作用机制可能与抗氧化，减轻钙超载有关。 ［关键词］银丹心脑通；主要成分配伍；心肌缺血再灌损 伤；保护作用 冠心病是导致人类死亡的主要病因之一，再灌注是急性 心肌梗死最有效的治疗手段，但再灌注损伤是影响再灌注治 疗的重要因素［1］。心肌在经历缺血后，当再恢复血液供应 时，由于能量衰竭，氧自由基生成，钙超载，炎症反应，细 胞凋亡等因素，缺血心肌及周围组织会受到进一步的损伤 ［1-2］。因此预防及减轻再灌注损伤已成为抗心肌梗死的热 点问题。 银丹心脑通是由银杏，丹参，灯盏细辛，三七，山楂， 绞股蓝，大蒜，天然冰片精制而成的天然苗药制剂［3-4］ o 临床上主要用于冠心病心绞痛，心律失常，心肌梗死等［3］。 其相关研究主要集中在临床应用及疗效观察方面，有关药效 物质基础的研究尚未报道。本实验采用离体心脏灌流模拟缺 血再灌注损伤研究了银丹心脑通及主要成分配伍对心肌缺 血再灌注损伤的保护作用，为探讨其主要作用物质基础奠定 基础。 1材料 1药品与试剂 银杏提取物（GBE）,丹参醇提物（SM-E）,丹参水提物 （SM-H）,混合物（灯盏细辛，三七，山楂，绞股蓝，大蒜, 天然冰片；MC）,均由贵州百灵制药股份有限公司提供。乳 酸脱氢酶（LDH）试剂盒（批.丙二醛（MDA） 试剂盒（批.超氧化物歧化酶（SOD）试剂盒（批 ,均购自南京建成生物工程研究所。肌酸激酶 同工酶（CK-MB）试剂盒（批.心肌钙蛋白I（cTnl） 试剂盒（批,均购自上海蓝基生物科技有限公 司。 1.2动物 健康SD雄性大鼠，250?300 g, SPF级，购自北京大学 医学部实验动物科学部，合格证号SCXK （京）2011-0012o 1.3仪器 Langendorff离体心脏灌流系统（西班牙PanLab公司）; FI55002蠕动泵（法国吉尔森公司）；MP150多导生理记录系 统（美国Bipac公司）；DFM-96 Y放射免疫分析仪（合肥众 城电子系统有限责任公司）；MK3酶标仪（赛默飞世尔科技有 限公司）。 2方法 1提取物制备[5] 2. 1. 1银杏提取物制备银杏叶粉碎，稀乙醇加热回流 提取，合并提取液，回收乙醇，浓缩物加至大孔吸附树脂柱 上，1次用水及不同浓度乙醇洗脱，收集相应洗脱液，回收 乙醇，真空干燥，粉碎成极细粉，总黄酮质量分数25.4%, K-H液配制，用于实验。 2. 1.2丹参醇提物制备乙醇回流提取2次，过滤，合