翅碱蓬脱水素基因克隆及表达载体构建.pdfVIP

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2019-04-12 发布于浙江
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翅碱蓬脱水素基因克隆及表达载体构建.pdf

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0FSOUTHERNAGRICUIJURE2013，44(6)：893—897 南方农业学报 JOURNAL ISSN2095—1191：CODENNNXAAB http：／／www．nfnyxb．cn DOI：10．3969／j：issn．2095—1191．2013．6．893 翅碱蓬脱水素基因克隆及表达载体构建马慧，李丽丽，祝红艳，钟鸣，陈丽静，郭志富 (沈阳农业大学生物科学技术学院，辽宁省农业生物技术重点实验室，沈阳 11叭61) 摘要：【目的】克隆翅碱蓬脱水素蛋白基因并构建其植物表达载体，为其耐盐性研究奠定基础。【方法】提取翅碱蓬总RNA，通过同源克隆和RAcE方法分离获得翅碱蓬脱水素蛋白基因，并构建该基因的植物表达载体pBll2l—D删。【结果】克隆获得翅碱蓬脱水素蛋白基因的全长cDNA为847 分析结果表明，ssDHN全长cDNA中5’-UTR为61bp，ORF为678bp，3’_UTR为108bp且包含29bp的poly(A)尾巴，其起始密码子ATG位于62bp处，终止密码子TAA位于737bp处，编码225个氨基酸。氨基酸比对结果表明，该基因推导的 Dm徕缘关系较近，与咖啡、杜鹃花的亲缘关系较远。【结论】成功克隆了翅碱蓬脱水素基因，并构建了其表达载体，可用于翅碱蓬抗盐的遗传改良。关键词：盐地碱蓬；脱水素蛋白；基因克隆；表达载体构建中图分类号：s567；0943．2 文献标志码：A J1■ ● 1 ● J J 』● n— l ■ VeCtorC0nStrUCnon0I5Uaeda船Jsa C10nln2andeXDreSSlon dehydringene MA Zhi—fu Hui，LILi—li，ZHU Hong—yan，ZHONGMing，CHENLi-jing，GU0 Scienceand (CollegeofBiological Technology，ShenyaIlgA加cultumlUniversity，UaoningKeyLaboratoryofA鲥cultuml 110161，China) Biotechnology，Shenyang and vectorof5uaedasaka wereconductedto references dehydrin Abstract：【Objective】Cloningexpression gene pmvide for researchofsuaeda RNAof5uaedasakawas the of5uaedasajsa extracted，and enduring—salt saka．【Method】Total gene wasobtained andRACE methods．The vector dehydmtion usinghomologycloning separation plantexpressionpBll2