高碘酸钠氧化法固定化脂肪酶的研究.pdfVIP

2012年4月 中国粮油学报 V01．27，No．4 oftheChineseCereals 第27卷第4期 Journal andOilsAssociation Apr．2012 高碘酸钠氧化法固定化脂肪酶的研究 刘 晶1 王 雪1 张佳宁1 李 越1 王校红2 于殿宇1 (东北农业大学食品学院1，哈尔滨150030) (黑龙江省粮食科研所2，哈尔滨150030) 摘要研究了以醋酸纤维素／聚丙烯复合膜为栽体的高碘酸钠氧化法固定化脂肪酶的固定化条件，采 用响应面分析法对固定化条件进一步优化，并对固定化酶膜的酶学性质进行了讨论。结果表明，以固定化酶 活力为指标，当高碘酸钠浓度为0．15tool／L，活化为60rain时，浓度为0．013g／mL的酶液与pH8．0的磷酸盐 缓冲溶液于戊二醛质量分数0．24％，温度4℃下，进行交联反应，反应3．1h后，获得的固定化酶活最高，为 0．52 U／cm2。固定化酶膜的酶学性质为：固定化酶最适温度35℃，最适pH为9，0。 关键词 高碘酸钠 醋酸纤维素／聚丙烯复合膜脂肪酶 固定化 中图分类号：TS229文献标识码：A 文章编号：1003—0174(2012)04—0068—06 脂肪酶是一种广泛分布于动物、植物和微生物中 所要应用的环境来选择最适合的方法¨2|。 的酶，能够进行可逆的甘油酯键水解或合成。在一定 本试验以醋酸纤维素／聚丙烯复合膜为载体，由 的条件下，脂肪酶可以主要催化合成反应，即可以用来 于纤维素表面有大量的羟基，因此用高碘酸钠氧化 合成生物柴油。无论在小规模的实验还是工业规模的 法来氧化活化载体膜，进而更好的固定化脂肪酶，再 酯合成中，作为催化剂，脂肪酶已经得到成功应 以交联的固定化方式，采用响应面分析法确定了最 用u。4 o。固定化酶技术，就是将酶结合在载体上，或将 佳的固定化条件。 其限制在有限空间内的一类技术，酶仍能进行相应催 化活性，并方便回收利用怕。。一般将酶的固定化技术 1 材料与方法 分为酶与载体的结合和包埋两大类。其中结合法包括 1．1试验材料 物理吸附、离子吸附、共价键结合及交联法等。6‘91。 脂肪酶：Sigma公司；聚丙烯，上海硕光电子科技 固定化方法是否成功很大方面取决于选择合适 有限公司；高碘酸钠，氢硼化钠：分析纯，广东东莞市 的载体。同定化载体的选择主要考虑是否拥有固定 大岭山公司；磷酸二氢钾，磷酸氢二钠：天津市光复 化所需的最佳性能，如机械强度、稳定性、亲水疏水 精细化工研究所；聚乙烯醇：国药集团化学试剂有限 性、孑L隙度、反应性、再生性及经济性等方面。10|。常 公司；橄榄油：中国医药上海化学试剂；其余试剂均 用的载体主要有微晶纤维素、硅藻土、硅胶等。而以 为分析纯。 膜为载体，不仅结合了膜的分离功能，还结合了载体 1．2试验仪器 功能和分隔功能，具有其他载体不可比拟的优点¨“。 磁力搅拌器85—2型：江苏中大仪器厂；LGl0— 醋酸纤维素／聚丙烯复合膜具有一定的吸附性、化学 2．4A型高速离心机：北京市医用离心机厂；电子天